Що таке реакція Кумбса? Реакція Кумбса непряма (антиглобуліновий тест, виявлення неповних антиеритроцитарних антитіл), кров

• 1.Медична мікробіологія. Предмет, завдання, методи, зв'язок із іншими науками. Значення медичної мікробіології у практичній діяльності лікаря.
• 3. Мікроорганізми та їх становище у системі живого світу. Номенклатура бактерій Принципи класифікації
• 6. Зростання та розмноження бактерій. Фази розмноження.
• 7. Харчування бактерій. Типи та механізми харчування бактерій. Аутотрофи та гетеротрофи. Чинники зростання. Прототрофи та ауксотрофи.
• 8. Поживні середовища. Штучні живильні середовища: прості, складні, загального призначення, елективні, диференційно-діагностичні.
• 9. Бактеріологічний метод вивчення мікроорганізмів. Принципи та методи виділення чистих культур аеробних та анаеробних бактерій. Характер зростання мікроорганізмів на рідких та щільних живильних середовищах.
• 13. Спірохети, їх морфологія та біологічні властивості. Патогенні для людини види.
• 14. Ріккетсії, їх морфологія та біологічні властивості. Роль рикетсій в інфекційній патології.
• 15. Морфологія та ультраструктура мікоплазм. Види, патогенні для людини.
• 16. Хламідії, морфологія та інші біологічні властивості. Роль у патології.
• 17. Гриби, їх морфологія та особливості біології. Засади систематики. Захворювання, що спричиняються грибами у людини.
• 20. Взаємодія вірусу із клітиною. Фази життєвого циклу Поняття про персистенцію вірусів та персистентні інфекції.
• 21. Принципи та методи лабораторної діагностики вірусних інфекцій. Методи культивування вірусів.
• 24. Будова геному бактерій. Рухливі генетичні елементи, їх роль еволюції бактерій. Поняття про генотип та фенотип. Види мінливості: фенотипічна та генотипічна.
• 25. Плазміди бактерій, їх функції та властивості. Використання плазмід у генній інженерії.
• 26. Генетичні рекомбінації: трансформація, трансдукція, кон'югація.
• 27. Генна інженерія. Використання методів генної інженерії для отримання діагностичних, профілактичних та лікувальних препаратів.
• 28. Поширення мікробів у природі. Мікрофлора ґрунту, води, повітря, методи її вивчення. Характеристика санітарно-показових мікроорганізмів.
• 29. Нормальна мікрофлора тіла людини, її роль у фізіологічних процесах та патології. Поняття про дисбактеріоз. Препарати відновлення нормальної мікрофлори: эубиотики (пробиотики).
• 31. Форми прояву інфекції. Персистенція бактерій та вірусів. Поняття про рецидив, реінфекцію, суперінфекцію.
• 32. Динаміка розвитку інфекційного процесу, його періоди.
• 33. Роль мікроорганізму в інфекційному процесі. Патогенність та вірулентність. Одиниці виміру вірулентності. Поняття факторів патогенності.
• 34. Класифікація факторів патогенності за О.В. Бухарін. Характеристика факторів патогенності
• 35. Поняття про імунітет. Види імунітету.
• 36. Неспецифічні захисні чинники організму проти інфекції. Роль І.І. Мечникова у формуванні клітинної теорії імунітету.
• 37. Антигени: визначення, основні властивості. Антигени бактеріальної клітки. Практичне використання антигенів бактерій.
• 38. Структура та функції імунної системи. Кооперація імунокомпетентних клітин. Форми імунної відповіді.
• 39. Імуноглобуліни, їх молекулярна структура та властивості. Класи імуноглобулінів. Первинна та вторинна імунна відповідь. :
• 40. Класифікація гіперчутливості за Джейлом та Кумбсом. Стадії алергічної реакції.
• 41. Гіперчутливість негайного типу. Механізми виникнення, клінічне значення.
• 42. Анафілактичний шок та сироваткова хвороба. Причини виникнення. Механізм. Їхнє попередження.
• 43. Гіперчутливість уповільненого типу. Шкірно-алергічні проби та їх використання у діагностиці деяких інфекційних захворювань.
• 44. Особливості противірусного, протигрибкового, протипухлинного, трансплантаційного імунітету.
• 45. Поняття клінічної імунології. Імунний статус людини та фактори, що впливають на неї. Оцінка імунного статусу: основні показники та методи їх визначення.
• 46. ​​Первинні та вторинні імунодефіцити.
• 47. Взаємодія антигену з антитілом in vitro. Теорія мережевих структур.
• 48. Реакція аглютинації. Компоненти, механізм, методи постановки. Застосування.
• 49. Реакція Кумбса. Механізм. компоненти. Застосування.
• 50. Реакція пасивної гемаглютинації. Механізм. компоненти. Застосування.
• 51. Реакція гальмування гемаглютинації. Механізм. компоненти. Застосування.
• 53. Реакція зв'язування комплементу. Механізм. компоненти. Застосування.
• 54. Реакція нейтралізації токсину антитоксином, нейтралізації вірусів у культурі клітин та в організмі лабораторних тварин. Механізм. компоненти. Методи постановки. Застосування.
• 55. Реакція імунофлюоресценції. Механізм. компоненти. Застосування.
• 56. Імуноферментний аналіз. Імуноблотинг. Механізми. компоненти. Застосування.
• 57. Вакцини. Визначення. Сучасна класифікація вакцин. Вимоги до вакцинних препаратів.
• 59. Вакцинопрофілактика. Вакцини з убитих бактерій та вірусів. Принципи приготування Приклади вбитих вакцин. Асоційовані вакцини. Переваги та недоліки вбитих вакцин.
• 60. Молекулярні вакцини: анатоксини. Отримання. Використання анатоксинів для профілактики інфекційних захворювань. Приклади вакцин.
• 61. Генно-інженерні вакцини. Отримання. Застосування. Переваги і недоліки.
• 62. Вакцинотерапія. Поняття про лікувальні вакцини. Отримання. Застосування. Механізм дії.
• 63. Діагностичні антигенні препарати: діагностикуми, алергени, токсини. Отримання. Застосування.
• 64. Сироватки. Визначення. Сучасна класифікація сироваток. Вимоги до сироваткових препаратів.
• 65. Антильні препарати – сироватки, що застосовуються для лікування та профілактики інфекційних захворювань. Способи одержання. Ускладнення при застосуванні та їх попередження.
• 66. Антильні препарати – сироватки, що застосовуються для діагностики інфекційних захворювань. Способи одержання. Застосування.
• 67. Поняття про імуномодулятори. Принцип дії. Застосування.
• 68. Інтерферони. Природа, способи одержання. Застосування. №99 Інтерферони. Природа, способи одержання. Застосування.
• 69. Хіміотерапевтичні препарати. Поняття про хіміотерапевтичний індекс. Основні групи хіміотерапевтичних препаратів, механізм їхньої антибактеріальної дії.
• 71. Лікарська стійкість мікроорганізмів та механізм її виникнення. Поняття про госпітальні штами мікроорганізмів. Шляхи подолання лікарської стійкості.
• 72. Методи мікробіологічної діагностики інфекційних хвороб.
• 73. Збудники черевного тифу та паратифів. Таксономія. Характеристики. Мікробіологічна діагностика Специфічна профілактика та лікування.
• 74. Збудники ешеріхіозів. Таксономія. Характеристики. Роль кишкової палички в нормі та патології. Мікробіологічна діагностика ешеріхіозів.
• 75. Збудники шигельозу. Таксономія. Характеристики. Мікробіологічна діагностика Специфічна профілактика та лікування.
• 76. Збудники сальмонельозів. Таксономія. Характеристики. Мікробіологічний діагноз сальмонельозу. Лікування.
• 77. Збудники холери. Таксономія. Характеристики. Мікробіологічна діагностика Специфічна профілактика та лікування.
• 78.Стафілококи. Таксономія. Характеристики. Мікробіологічна діагностика захворювань, що викликаються стафілококами. Специфічна профілактика та лікування.
• 79. Стрептококи. Таксономія. Характеристики. Мікробіологічна діагностика стрептококових інфекцій. Лікування.
• 80. Менінгококи. Таксономія. Характеристики. Мікробіологічна діагностика стрептококових інфекцій. Лікування.
• 81. Гонококи. Таксономія. Характеристики. Мікробіологічна діагностика гонореї Лікування.
• 82. Збудник туляремії. Таксономія. Характеристики. Мікробіологічна діагностика Специфічна профілактика та лікування.
• 83. Збудник сибірки. Таксономія та характеристика. Мікробіологічна діагностика Специфічна профілактика та лікування.
• 84. Збудник бруцельозу. Таксономія та характеристика. Мікробіологічна діагностика Специфічна профілактика та лікування.
• 85. Збудник чуми. Таксономія та характеристика. Мікробіологічна діагностика Специфічна профілактика та лікування.
• 86. Збудники анаеробної газової інфекції. Таксономія та характеристика. Мікробіологічна діагностика Специфічна профілактика та лікування.
• 87. Збудники ботулізму. Таксономія та характеристика Мікробіологічна діагностика. Специфічна профілактика та лікування.
• 88. Збудник правця. Таксономія та характеристика. Мікробіологічна діагностика та лікування.
• 89. Неспоротворні анаероби. Таксономія. Характеристики. Мікробіологічна діагностика та лікування.
• 90. Збудник дифтерії. Таксономія та характеристика. Умовно – патогенні корінебактерії. Мікробіологічна діагностика Виявлення анатоксичного імунітету. Специфічна профілактика та лікування.
• 91. Збудники кашлюку та паракоклюшу. Таксономія та характеристика. Мікробіологічна діагностика Специфічна профілактика та лікування.
• 92. Збудники туберкульозу. Таксономія та характеристика. Умовно – патогенні мікобактерії. Мікробіологічна діагностика туберкульозу.
• 93. Актиноміцети. Таксономія. Характеристики. Мікробіологічна діагностика Лікування.
• 95. Збудник хламідіозів. Таксономія. Характеристики. Мікробіологічна діагностика Лікування.
• 96. Збудник сифілісу. Таксономія. Характеристики. Мікробіологічна діагностика Лікування.
• 97. Збудник лептоспірозу. Таксономія. Характеристики. Мікробіологічна діагностика Специфічна профілактика. Лікування.
• 98. Збудник бореліозів. Таксономія. Характеристики. Мікробіологічна діагностика
• 99. Клінічна мікробіологія, її завдання. Ролі умовно - патогенних мікроорганізмів у виникненні внутрішньолікарняних інфекцій.
• 100. Класифікація грибів. Характеристики. Роль у патології. Лабораторна діагностика. Лікування.
• 101. Класифікація мікозів. Поверхневі та глибокі мікози. Дріжджі гриби роду кандида. Роль у патології людини.
• 102. Збудник грипу. Таксономія. Характеристики. Лабораторна діагностика. Специфічна профілактика та лікування.
• 103. Збудник поліомієліту. Таксономія та характеристика. Лабораторна діагностика. Специфічна профілактика.
• 104. Збудники гепатитів а і е. Таксономія. Характеристики. Лабораторна діагностика. Специфічна профілактика.
• застосовуютьу хворих при внутрішньосудинному гемолізі. У деяких хворих виявляють антирезусні антитіла, які є неповними, одновалентними. Вони специфічно взаємодіють із резус-позитивними еритроцитами, але не викликають їх аглютинації. Наявність таких неповних антитіл визначають у непрямій реакції Кумбса. Для цього в систему антирезусні антитіла + резус-позитивні еритроцити додають антиглобулінову сироватку (антитіла проти імуноглобулінів людини), що спричиняє аглютинацію еритроцитів. За допомогою реакції Кумбса діагностують патологічні стани, пов'язані з внутрішньосудинним лізисом еритроцитів імунного генезу, наприклад, гемолітичну хворобу новонароджених: еритроцити резус-позитивного плоду з'єднуються з циркулюючими в крові неповними антитілами до резус-фактору, які перейшли через резус-фактор.

  Механізм. Складність виявлення неповних (моновалентних) антитіл пов'язана з тим, що ці антитіла, зв'язуючись з епітопами специфічного антигену, не утворюють структуру грат і реакція між антигенами та антитілами не виявляється ні аглютинацією, ні преципітацією, ні іншими тестами. Для виявлення комплексів, що утворилися, антиген - антитіло доводиться використовувати додаткові тест-системи. Для виявлення неповних антитіл, наприклад до резус-антигена еритроцитів у сироватці крові вагітної жінки, реакція ставиться у два етапи: 1) до дворазових розведень випробуваної сироватки додають еритроцити, що містять резус-антиген, і витримують при 37 ° С протягом години; 2) до ретельно відмитих після першого етапу еритроцитів додають кролячу антилюдську антиглобулінову сироватку (в заздалегідь відтитрованому робочому розведенні). Після інкубації протягом 30 хв при 37 °С результати оцінюють за наявністю гемаглютинації ( позитивна реакція). Необхідно ставити контроль інгредієнтів реакції: 1) антиглобулінова сироватка + свідомо сенсибілізовані специфічними антитілами еритроцити; 2) оброблені нормальною сироваткою еритроцити + антиглобулінова сироватка; 3) оброблені досліджуваною сироваткою резус-негативні еритроцити + антиглобулінова сироватка.

  50. Реакція пасивної гемаглютинації. Механізм. компоненти. Застосування.

  Реакція непрямої (пасивної) гемаглютинації(РНДА, РПДА)заснована на використанні еритроцитів (або латексу) з адсорбованими на їх поверхні антигенами або антитілами, взаємодія яких з відповідними антитілами або антигенами сироватки крові хворих викликає склеювання та випадання еритроцитів на дно пробірки або комірки у вигляді фестончастого осаду.

  компоненти.Для постановки РНГА можуть бути використані еритроцити барана, коня, кролика, курки, миші, людини та інші, які заготовляють про запас, обробляючи формаліном або глютаральдегідом. Адсорбційна ємність еритроцитів збільшується при обробці розчинами таніну або хлориду хрому.

  Антигенами в РНГА можуть бути полісахаридні АГ мікроорганізмів, екстракти бактеріальних вакцин, АГ вірусів і рикетсій, а також інші речовини.

  Еритроцити, сенсибілізовані артеріальною гіпертензією, називаються еритроцитарними діагностикумами. Для приготування еритроцитарного діагностикуму найчастіше використовують еритроцити барана, які мають високу адсорбуючу активність.

  Застосування. РНГА застосовують для діагностики інфекційних хвороб, визначення гонадотропного гормону в сечі при встановленні вагітності, для виявлення підвищеної чутливості до лікарських препаратів, гормонів та деяких інших випадках.

  Механізм. Реакція непрямої гемаглютинації (РНГА) відрізняється значно більш високою чутливістю та специфічністю, ніж реакція аглютинації. Її використовують для ідентифікації збудника за його антигенною структурою або індикації та ідентифікації бактеріальних продуктів - токсинів у досліджуваному патологічному матеріалі. Відповідно використовують стандартні (комерційні) еритроцитарні антитільні діагностикуми, отримані шляхом адсорбції специфічних антитіл на поверхні танізованих (оброблених таніном) еритроцитів. У лунках пластмасових пластин готують послідовні розведення досліджуваного матеріалу. Потім кожну лунку вносять однаковий обсяг 3% суспензії навантажених антитілами еритроцитів. При необхідності реакцію ставлять паралельно кількох рядах лунок з еритроцитами, навантаженими антитілами різної групової специфічності.

  Через 2 години інкубації при 37 °С враховують результати, оцінюючи зовнішній виглядосадка еритроцитів (без струшування): при негативній реакції з'являється осад у вигляді компактного диска або кільця на дні лунки, при позитивній реакції - характерний мереживний осад еритроцитів, тонка плівка з нерівними краями.

  

Проба Кумбса – це клінічний аналізкрові, який проводиться, щоб виявити, чи кров містить певні антитіла, які можуть бути небезпечні. Ці антитіла приклеюються до еритроцитів і можуть вторгнутися в імунну систему, а також завдати шкоди іншими способами. У медичної термінологіїце дослідження також називають антиглобуліновим тестом (АГТ).

Типи проб Кумбса

Існує два типи проб Кумбса – прямий та непрямий.

Пряма проба Кумбса, також відома як пряма (ПАТ), виявляє ауто-антитіла, які прикріплюються до поверхні еритроцитів. Ці антитіла іноді виробляються в організмі внаслідок певних захворювань або прийому певних медикаментів, таких як прокаїнамід, метилдопа або хінідин.

Дані антитіла є небезпечними, тому що іноді вони викликають анемію, руйнуючи еритроцити.

Цей тест іноді призначається для діагностики причини жовтяниці або анемії.

У нормі реакція Кумбса є негативною.

Позитивно при:

• гемолітичної хворобиновонароджених;
• аутоімунний гемоліз;
• гемолітичні трансфузійні реакції;
• лікарської імунної гемолітичної анемії

Непряма проба Кумбса, також відома як , використовується для виявлення антитіл до еритроцитів, що містяться в сироватці крові (сироватка – це прозора жовта рідина крові, яка залишається після того, як виводяться червоні кров'яні тільця та коагулянт).

Непряма проба Кумбса застосовується при переливанні крові для визначення того, чи кров донора збігається з кров'ю реципієнта. Це називається пробою на сумісність, вона допомагає запобігти будь-якій несприятливу реакціюна кров донора. Даний аналізтакож рекомендований вагітним жінкам. Деякі жінки мають антитіла класу IgG, які можуть проникати через плаценту в кров плода та завдати шкоди новонародженому, викликавши гемолітичне захворювання, відоме як гемолітична анемія.

Процедура

Кров береться за допомогою шприца з вени, зазвичай з тильного бокудолоні чи згині ліктя. Місце проколу перед цим ретельно дезінфікується, а після взяття аналізу крові накладається чиста марля чи вата.

Отримана кров очищається у лабораторії, при цьому відокремлюються червоні кров'яні тільця. Зразок потім послідовно досліджується із застосуванням різних реагентів сироватки та Кумбса, який протиставляється. Якщо не відбувається аглютинації (злипання червоних кров'яних тілець), це означає позитивний результат.

Однак, якщо тест негативний, це означає, що в крові є антитіла, які діють проти еритроцитів. Це може вказувати на різні захворювання, такі як анемія (як природна, так і спровокована прийомом медикаментів), сифіліс або мікоплазмова інфекція. Після отримання результатів лікар призначить відповідне лікування.

Відео

Показання для призначення: встановлення імунної природи гемолітичної анемії.

Позитивна реакція виявляється у тому, що еритроцити хворої людини, з фіксованими ними антитілами, при взаємодії з антиглобулінової сироваткою (проти антитіл), отриманої після імунізації кролика, аглютинують. Пряма проба Кумбса проводиться, коли є підстави припускати, що еритроцити, що досліджуються, вже in vivo піддалися сенсибілізації відповідними антитілами, тобто. перша фаза реакції - фіксація антитіл на поверхні еритроцитів вже відбулася і додавання антиглобулінової сироватки викликає аглютинацію сенсибілізованих клітин. Іншими словами, позитивна пряма реакція Кумбса передбачає, що in vivo на поверхні еритроцитів покриті імуноглобуліни або комплемент.

За допомогою прямої проби Кумбса виявляють імуноглобуліни (антитіла) на поверхні еритроцитів. Це імуноглобуліни, що утворюються у відповідь на сенсибілізацію до будь-яких антигенів, наприклад, резус-фактору. Для постановки проби сироватку з антиглобуліном (Кубсова сироватка) додають до відмитих еритроцитів. Якщо на еритроцитах є імуноглобуліни або комплемент, відбувається аглютинація. Проба називається прямою, тому що вона одноступінчаста - вимагає лише додавання сироватки Кумбса до відмитих еритроцитів.

Проба Кумбса– аналіз виявлення антитіл прикріплених до поверхні чи розчинених у плазмі. З його допомогою виявляють імунізацію та антитіла до еритроцитів. Друга назва – антиглобуліновий тест. Буває прямим і непрямим.

При прямому антиглобуліновому тестівизначає антитіла, фіксовані на поверхні еритроцитів. Проводиться при підозрі на , при інших аутоімунних захворюваннях, після прийому ліків (метилдопа, пеніцилін, хінін) та .

Еритроцити були сенсибілізовані in vivo - до них вже міцно прикріплені антитіла, а додавання антиглобулінової сироватки (анти-IgG) викликає склеювання сенсибілізованих клітин, що видно неозброєним оком.

Непряма проба Кумбсавиявляє антиеритроцитарні антитіла в плазмі крові, її виконують перед переливанням крові та при .

Антиеритроцитарні антитіла – вид аутоантитіл, тобто. антитіл проти власних тканин. Аутоантитіло виникає при патологічній реактивності імунної системина деякі препарати, наприклад, високі дозипеніциліну.

Еритроцити на своїй поверхні містять різні хімічні структури (гліколіпіди, сахариди, глікопротеїни та протеїни), які в медицині називають антигенами. Людина успадковує від батьків певну карту антигенів на кожній червоній клітині крові.

Антигени об'єднані в групи і при цьому кров ділять на кілька груп - за системою AB0, резус, Келл, Левіс, Кідд, Даффі. Найвідоміші і найзначніші у роботі лікаря - AB0 і резус-фактор (Rh).

Система AB0

Резус-належність людини визначається наявністю саме цих антигенів. Особливо важливий антиген еритроцитів – антиген D. Якщо він присутній, то говорять про резус-позитивної крові RhD, А якщо його немає - про резус-негативної Rhd.

Якщо антигенам еритроцитів приєднається відповідне антитіло, то еритроцит руйнується – відбудеться гемоліз.

Показання

Головне свідчення до прямомуантиглобулінового тесту- підозра на гемолітичну анемію. Найчастіше його проводять при первинній аутоімунній гемолітичній анемії, гемолізі при ревматичних, пухлинних, інфекційних захворюваннях, гемолізі, спричиненому ліками.

Якщо анемія з'явилася через кілька днів або місяців після переливання крові або при тривалій жовтяниці у новонародженого роблять пряму пробу Кумбса.

Непрямийантиглобуліновий тест виконуютьперед переливанням крові та при вагітності резус-негативної жінки.

Автоімунна гемолітична анемія

Автоімунна гемолітична анемія (первинна)- класичне аутоімунне захворювання з невідомими причинами. Порушено взаємодію всередині імунної системи, що веде до сприйняття власних еритроцитів як чужих. У лімфовузлах синтезуються антитіла класу IgG (реагують при t 37°C) та/або IgM (при t 40°C), які приєднуючись до поверхні еритроциту запускають ряд ферментів (систему комплементу) і «продирюють» стінку еритроциту, що призводить до його руйнування. - Гемолізу.

Перші симптоми зумовлені як руйнуванням еритроцитів, і зменшенням гемоглобіну. Серед них:

• втома, Загальна слабкість, дратівливість
• задишка
• біль у животі та грудях, нудота
• темний колір сечі
• болі у спині
• жовтяничне фарбування шкіри та слизових оболонок
• зниження кількості еритроцитів та

Позитивний результат прямий проби Кумбсана 100% підтверджує діагноз аутоімунної гемолітичної анемії, доводячи її аутомунне походження. Одночасно негативний результат- не дає змоги зняти діагноз.

Вторинна гемолітична анемія

Вторинна аутоімуна гемолітична анемія та позитивна пробаКумбса можуть бути при таких захворюваннях:

• синдром Еванса
• інфікування пневмонії

Позитивний антиглобуліновий тест при цих захворюваннях є одним із симптомів, а не критерієм діагнозу.

Гемолітична хвороба новонародженого

Причина гемолітичної хвороби новонароджених -несумісність групи крові у матері та плода, в більшості випадків за системою резус, в одиночних – за системою АВ0, казуїстично – за іншими антигенами.

Резус-конфлікт розвивається, якщо у резус-негативної жінки плід успадкував від батька резус-позитивну кров.

Захворювання у новонародженого розвивається тільки в тому випадку, якщо мати вже виробила антитіла до відповідних антигенів, що трапляється після попередніх вагітностей, абортів, переливання несумісної крові. Найбільш часта причиназапуску синтезу антитіл до антигенів еритроцитарної оболонки – пологи (фето-материнська кровотеча). Перші пологи в основному проходять без ускладнень, але наступні загрожують гемолітичною хворобою новонародженого в перші дні після народження.

Симптоми гемолітичної хвороби новонародженого:

• жовтяничність шкіри
• , і слизових
• збільшення печінки та селезінки
• порушення дихання
• набряк всього тіла
• збудження та поступове пригнічення центральної нервової системи

Анемія після переливання крові

Непряму пробу Кумбсапроводять перед переливанням крові з метою оцінки сумісності, а пряму пробу Кумбса - після нього за підозри на посттрансфузний гемоліз, тобто. при наявності симптомів, таких як лихоманка, полив (читай нижче). Мета аналізу – виявити антитіла до перелитих еритроцитів, які зв'язалися з еритроцитами крові, що отримав і є причиною посттрансфузного гемолізу, а також передчасного видалення донорських еритроцитів з кровообігу у реципієнта (того, хто отримав кров).

Симптоми:

• підвищення температури тіла
• висип на шкірі
• болі у спині
• червона
• нудота
• запаморочення

Розшифровка

Важливі правила розшифровки прямого і непрямого антиглобулінового тесту однакові. Єдина відмінність – розташування антитіл – у крові чи вже на еритроциті.

• якщо пряма проба Кумбса негативна– отже на еритроцитах не «сидить» антитіло і причину симптомів слід шукати далі і провести непряму пробу Кумбса
• якщо позитивний результат проби Кумбса виявлено після переливання крові, інфекцій, ліків – позитивність триває до 3 місяців (час життя еритроцитів 120 днів – 3 місяці)
• позитивний результат антиглобулінового тесту при аутоімунному захворюванні триває місяці і навіть роки

Норма

• пряма проба Кумбса – негативно
• непряма проба Кумбса - негативно

Якісно позитивний результат вимірюється у кількості плюсів від одного до чотирьох (+, ++, +++, ++++), а кількісно у цифровому вигляді – 1:16, 1:256 і т.д.

Так. Про те, що Ви отримали трансфузію крові, обов'язково повинен знати Ваш лікар, оскільки вона впливає на правильність розшифровки результатів аналізів зараз. При отриманні чужої (хоч і багато разів перевіреної крові) завжди існує можливість того, що ваше тіло виробить антитіла проти перелитої крові. Саме дані антитіла нададуть негативний впливстан здоров'я. При наступних переливаннях крові лікар повинен знати, що Ви вже отримували трансфузії, а отже був час для синтезу антитіл. Для вагітних жінок дана інформаціяще актуальніша.

3. Якщо невідповідність по резус-фактору між матір'ю та дитиною, чи будуть хворі всі діти?

Залежить на резус-позитивності чи негативності дитини (RhD). Носії групи крові I, II, III та IV можуть бути як резус-позитивними, так і негативними. У ситуації коли мати резус-негативна, а дитина резус позитивна - антитіла будуть вироблятися вже з першою вагітністю, але тільки після перших пологів (або переривання вагітності) відбудеться прямий контакт крові матері та дитини. Реалізація гемолітичного впливу антитіл буде лише при других та наступних пологах, що призведе до гемолітичної хвороби у новонародженого.

Кожна жінка з негативним резус-фактором має бути ретельно обстежена під час вагітності, а після пологів проводиться профілактичне лікуваннядля попередження появи антитіл та подальших ускладнень.

4. Під час вагітності потрібно знати групу крові чоловіка перед проведенням проби Кумбса?

Потрібно не просто знати, а ще й перевірити групу крові біологічного батька дитини під час вагітності.

Факти

• запропонована вперше в Кембриджі у 1945 році
• поріг чутливості – не менше 300 фіксованих молекул антитіл на одному еритроциті
• число антитіл, що запускають гемоліз - індивідуально для кожної людини (від 16-30 до 300)
• динаміка інших лабораторних показниківгемолітична анемія (гемоглобін, білірубін, ретикулоцити) може нормалізуватися, а проба Кумбса залишиться на тому ж рівні

Проба Кумбса was last modified: Березень 16th, 2018 by Марія Бодян

КУМБСА РЕАКЦІЯ(R. R. А. Coombs, англ. імунолог, нар. 1921 р.; син.: проба Кумбса, антиглобуліновий тест) - імунологічна реакція для виявлення неповних антитіл до ауто- та ізоантигенів еритроцитів.

Реакція була розроблена в 1908 Мореші (С. Moreschi), але отримала широке застосуваннялише з 1945 р. після того, як Кумбсом була показана її роль у визначенні сумісності при гемотрансфузіях, резус-конфлікті, діагностиці аутоалергічних та аутоімунних станів та ін.

К. н. заснована на використанні в ній спеціально приготовленого препарату – антиглобулінової сироватки. У присутності антиглобулінової сироватки еритроцити, навантажені неповними антитілами, аглютинуються. Еритроцити, що не містять на своїй поверхні антитіл, залишаються неаглютинованими.

К. н. широко застосовується для: а) встановлення стану ізосенсибілізації, тобто виявлення ізоантитіл, що виникають при повторних переливання крові (див. Переливання крові) або вагітності (див. Вагітність); б) виконання проби на сумісність при гемотрансфузіях; в) визначення в еритроцитах різновиду резус-фактора (див.); г) виявлення аутоімунних антитіл на еритроцитах хворих на набуту гемолітичну анемію (див.) та інші аутоалергічні хвороби (див.), а також при деяких інфекціях, що протікають з алергічним компонентом; д) виявлення ізоімунних антитіл, фіксованих на еритроцитах дітей, які страждають на гемолітичну хворобу новонароджених (див.). К. н. застосовується також у судово-медичних та антропологічних дослідженнях.

Основним матеріалом для постановки До. є сироватка або цитратна плазма та еритроцити, хворого. Розрізняють два варіанти К. р.: непряму та пряму. При непрямій До. вивчають сироватку хворого, в якій визначають вільно циркулюючі антитіла. При прямій До. досліджують еритроцити на наявність антитіл, фіксованих на цих формених елементахкрові.

Антиглобулінову сироватку для К. н. одержують шляхом імунізації лаб. тварин (кроликів, кіз, овець та ін.) глобулінами, виділеними із сироватки людини фракціонуванням етанолом, сірчанокислим амонієм або гель-фільтрацією на сефадексі. При отриманні антиглобулінової сироватки необхідно видалити гетероаглютинуючі антитіла, що виникають в результаті імунізації тварин глобулінами людини. Досягають цього шляхом адсорбції імунної сироватки сумішшю еритроцитів людей з різною групоюкрові або розведенням її ізотонічним розчином хлориду натрію. У останньому випадкутитр гетеро-аглютинінів повинен бути невисокий (1: 16 - 1: 32), щоб антиглобулінова сироватка після розведення зберегла хорошу активність в До.

Непряма Кумбса реакція

Непряма Кумбса реакція проводиться у два етапи. Перший етап виконують у спеціально призначених для цієї мети невеликих пробірках розміром 4 X 0,5 см. У кожну пробірку до трьох крапель сироватки (цілісна, 1: 2 і т. д.), в якій підозрюють наявність антитіл, додають одну краплю осідання еритроцитів відомого антигенного складу. Вміст пробірки перемішують і поміщають термостат при t° 37° на 1 годину. Потім еритроцити тричі відмивають ізотонічним розчином хлориду натрію. Другий етап полягає в приготуванні 5% суспензії відмитих еритроцитів і з'єднанні на білій (порцелянової) платівці зі змочуваною поверхнею однієї краплі еритроцитів з однією краплею антиглобулінової сироватки. Облік результатів виконують до 10 хв. Виняток хибнопозитивних результатів роблять шляхом виконання контрольних досліджень. Використання ізотонічного розчинухлориду натрію замість антиглобулінової сироватки не повинно супроводжуватись аглютинацією еритроцитів. Виконання непрямої До. щодо еритроцитів відомого фенотипу ізоантигенів дозволяє встановити специфічність антитіл. Наприклад, дослідження сироватки хворого з еритроцитами 0(I), CDE, Kk, Fya; 0(1), CDe, Kk, Fуа; 0(I), сDe, Кк, Fya; 0(I), cDE, Кк, Fya; 0(I), cde, kk, Fya показало позитивний результат із зразком крові в 1-му та 4-му випадках; інші зразки крові (2, 3, 5 випадки) показали негативний результат. Сироватка містить анти-Е-антитіла. За допомогою непрямої К. н. можуть бути виявлені неповні антитіла проти антигенів: З, D, Е, с, е; До, k; Fya, Fyb; Lea, Leb; Jka, Jkb та ін. (Див. Групи крові).

Пряма Кумбса реакція

Пряма Кумбса реакція з техніки виконання відповідає другому етапу непрямої К. р.: триразово відмиті ізотонічним розчином хлориду натрію досліджувані еритроцити хворого (5% завис) з'єднують з антиглобулінової сироваткою. Пряму К. н. виконують, коли є підстави вважати, що еритроцити досліджуваного хворого in vivo вже сенсибілізовані антитілами. Позитивна пряма До. служить діагіостичною ознакою при гемолітичній хворобі новонароджених, обумовленої сенсибілізацією організму жінки до антигенів плода та проникненням антитіл через плаценту в організм дитини, а також при набутій гемолітичній анемії.

За Останніми рокамиК. н. суттєво вдосконалена. З її допомогою вдається як констатувати наявність на еритроцитах антитіл, а й встановити клас імуноглобулінів (див.). Для цього використовують сироватку проти окремих класів імуноглобулінів: IgG, IgM, IgA. Ізоімунні антитіла проти резус, Келл-антигенів, Даффі-антигенів та інших антигенів, а також теплові аутоімунні антитіла, як правило, відносяться до IgG. Холодові аутоімунні антитіла, а також ізоімунні антитіла проти Le та деяких інших антигенів, як правило, відносяться до IgM. Природу IgA мають лише рідко зустрічаються аутоімунні антитіла (див. Аутоантитіла).

Бібліографія:Дигін В. П. Аутоімунні захворюванняу клініці внутрішніх хвороб, Л., 1970, бібліогр.; Касир-ський І. А. і Алексєєв Г. А. Клінічна гематологія, М., 1970; Косяков П. Н. З антигени і з антитіла людини в нормі та патології, М., 1974, бібліогр.; В i v i n P. e. a. Les anemies hemolytiques, p. 93, P., 1971, bibliogr.; Clinical aspects of immunology, ed. by P. G. H. Geli а. о., Oxford, 1975; Coombs R. R. A., M o u gan t A. E. a. Race R. R. In-vivo isosensitisation of red cells in babies with haemolytic disease, Lancet, v. 1, p. 264, 1946.