Головна · Правильне харчування · Алергени та токсини для діагностичних шкірних проб. Постановка та облік реакції шику Механізм негативної реакції шику

Алергени та токсини для діагностичних шкірних проб. Постановка та облік реакції шику Механізм негативної реакції шику

Реакція Шика може допомогти в диференційній діагностиці між атиповою дифтерією та іншими захворюваннями з супутнім носійством дифтерійних паличок (у тих випадках, де реакція Шика ставиться до введення протидифтерійної сироватки).

Дослідження протягом останніх двох років діагностичного значення проби Шика у титраційній методиці за В. І. Іоффе, з 1/40, 1/10, 1/5 DLM дифтерійного токсину (1, 4 та 8 шкірних доз), привели до висновку, що визначення висоти імунітету допомагає у диференціальній діагностиці.

У більшості носіїв токсигенних дифтерійних паличок визначається напружений антитоксичний імунітет, що виражається негативними реакціями не тільки на одну, а й на 4 та 8 шкірних доз токсину (К. В. Блюменталь).

У деяких хворих на дифтерію, у яких вдалося до введення сироватки визначити стан імунітету по реакції Шика, остання виявилася позитивною на одну шкірну дозу.

Таким чином, якщо при сумнівній клінічній картині та виявленні токсигенних дифтерійних паличок реакція Шика у звичайній постановці (1/40 DLM токсину) дає позитивний результат, більш обґрунтовано припущення про дифтерію.

Реакція аглютинації може також допомогти в диференціальній діагностиці, тому що при захворюванні на дифтерію відзначається закономірне наростання антитіл у крові до 2 - 3-го тижня від початку хвороби, у той час як, за даними авторів, супутнє носійство не дає помітного наростання антитіл у зазначені терміни. .

На закінчення слід сказати, що відмова від діагнозу дифтерії при виявленні дифтерійних паличок у всіх випадках має бути достатньо обґрунтовано переконливими клінічними даними.

Враховуючи те, що при диференціальній діагностиці в подібних випадках нерідко виникають великі труднощі, особливо для дільничного лікаря, рекомендується направлення цих хворих до діагностичних відділень. За відсутності діагностичних ліжок діагноз дифтерії може бути знятий лише після консультації з досвідченим лікарем.

«Дифтерія в дітей віком», М.Е.Сухарева, К.В.Блюменталь

Виявлення BL при типовій клінічній картині фолікулярної ангіни, коли фолікули, що нагноилися, як просяні зерна, просвічують з-під слизової мигдалики, також легко може бути розцінено як супутнє носійство, бо острівці дифтерійних нальотів завжди розташовуються на поверхні слизової. Хронічний тонзиліт нерідко супроводжується більш менш тривалим носієм дифтерійних паличок і через це часто доводиться диференціювати атипову дифтерію.

Нескладна для досвідченого лікаря діагностика грибкової ангіни (викликається leptotrix) з супутнім носійством дифтерійних паличок, оскільки клінічний прояв мікозу глотки по суті не має схожості з дифтерійним процесом; але, мабуть, одні й самі причини, найчастіше хронічне ураження носоглотки, сприяють одночасно тривалої вегетації грибка, і носію дифтерійних паличок. Більш складна диференціальна діагностика.

Люда П., 8 років, вступила до лікарні ім. І. В. Русакова 9 вересня 1960 з діагнозом «дифтерія зіва?». Дівчинка правильно імунізована проти дифтерії, дуже часто хворіє на ангіну. Захворіла 5 вересня, температура 37,5 °, головний біль, помірний біль у горлі. 6 - 7-го вересня температура в межах 38 - 39 °, погане самопочуття, біль у горлі трималася.

Виявлення дифтерійних паличок у посіві зі зіва або носа при типовій клінічній картині грипозного крупа або крупа при катарі верхніх дихальних шляхів не може бути вирішальним доводом на користь дифтерійної етіології крупа. У таких випадках необхідна ідентифікація виділених мікробів, проте цілком можливе носійство BL у зіві або носі, що супроводжує недифтерійну крупу. Наводимо виписку з історії.

Боря Б., 8 років, вступив до дифтерійно-діагностичного відділення лікарні ім. І. В. Русакова 27 вересня I960 з діагнозом «дифтерія зіва?». Хлопчик правильно імунізований проти дифтерії. Повторно хворіє на ангіни. Захворів 24. IX, температура 39,5 °, озноб, біль у горлі. 25. IX дитина оглянута лікарем: температура залишалася високою, відзначена яскрава гіперемія зіва, жовтуваті, пухкі, але досить великі.

Алергени бактеріальні або інфекційні є суспензією вбитих мікробних клітин або вилучених з них різних фракцій і застосовуються як діагностичні препарати для виявлення підвищеної чутливості організму до збудників інфекційних захворювань.

Бактеріальні екзотоксини (дифтерійний, скарлатинозний), використовуються для шкірних проб щодо антитоксичного імунітету до цих захворювань.

Алергічні шкірні проби застосовуються для діагностики при багатьох інфекційних захворюваннях, що супроводжуються алергічною перебудовою організму. Залежно від способу введення алергену шкірні проби можуть бути аплікаційні - щодо чутливості до деяких лікарських, хімічних речовин; скарифікаційні - при визначенні чутливості до побутових, пилкових, епідермальних алергенів та внутрішньошкірні - при визначенні чутливості до бактеріальних та грибкових алергенів.

Діагностичне значення реакцій організму на алергени по-різному протягом інфекційного процесу. На початку інфекційного процесу позитивна реакція свідчить лише про зараженість певним збудником та стан алергії до нього і не може розцінюватися як діагностична. У розпал захворювання алергічна проба враховується як діагностична. Після деяких інфекційних хвороб залишається алергія до відповідного збудника протягом кількох років, виявлення якої свідчить про перенесену інфекцію. При позитивній реакції на алерген, що враховується через 20 хвилин, а потім через 24 і 48 годин (рідко 7 діб), відчувається відчуття печіння на місці введення препарату, почервоніння, набряк, може бути везикула.

Алергени, що застосовуються з діагностичною метою, різноманітні за хімічною природою та методами отримання.

Нижче наводиться опис деяких діагностичних препаратів, що увійшли до широкої практики.

1. Туберкулін. В даний час випускаються три препарати для проведення алергічних туберкулінових проб:

альттуберкулін Коха, сухий очищений туберкулін (РРД) та очищений туберкулін у стандартному розведенні.

Альттуберкулін Коха (АТК)-жовтувато-коричнева рідина, одержувана в результаті випарювання до 1/10 початкового об'єму 5-6-тижневої культури мікобактерій, вирощеної на гліцериново-м'ясо-пептонному бульйоні. Старий туберкулін Коха містить продукти життєдіяльності та розпаду мікобактерій та живильне середовище. Препарат повинен містити не менше 90 000 ТЕ (туберкулінових одиниць) в 1 мл.

Сухий очищений туберкулін (РРД)-(Derivatum protei nos purificatum tuberculini mammalinii) є білковим препаратом, отриманим з фільтрату культури мікобактерій туберкульозу осадженням хімічними речовинами з подальшим очищенням. В 1 мл очищеного сухого туберкуліну міститься 50000 ТЕ. Препарат застосовується для внутрішньошкірних проб по Манту, підшкірної проби Коха та інших тестів.

Очищений туберкулін у стандартному розведенні (РРД-2) приготований з порошку-туберкуліну розведенням його в розчиннику (твін-80), що забезпечує стабілізацію біологічної активності препарату - 2 або 5 ТЕ в 0,1 мл.

Застосовується тільки для встановлення внутрішньошкірних проб по Манту.

Перевагою очищених туберкулінів є їхня велика чутливість і стандартність.

Туберкулінова діагностика проводиться з метою визначення інфікованості населення, особливо дітей та підлітків, туберкульозом; при відборі людей, які підлягають щепленню проти туберкульозу; визначення ефективності вакцинації тощо.

При масовій туберкуліновій діагностиці застосовують внутрішньошкірну пробу Манту, використовуючи очищений туберкулін у стандартному розведенні.

За відсутності у людини інфікованості мікобактеріями туберкульозу спостерігається негативна реакція; при розмірі інфільтрату 2-4 мм – проба сумнівна, тому реакцію слід повторити через 3-4 тижні. Якщо інфільтрат більше 5 мм – реакція розцінюється як позитивна.

2. Тулярин містить убиті нагріванням при 70°С мікроорганізми в 3%-ному гліцерині, застосовується для внутрішньошкірного введення при діагностиці туляремії, починаючи з 3-5-го дня хвороби. Проба з тулярином застосовується також визначення посгвакцинального імунітету.

3. Бруцеллін - являє собою фільтрат 3-тижневої (убитої нагріванням) бульйонної культури всіх трьох видів бруцел.

Препарат вводиться строго внутрішньошкірно при діагностиці бруцельозу та при визначенні імунітету у вакцинованих людей (шкірна проба Бюрне).

4. Токсоплазмін - антигенний комплекс, отриманий з ексудату черевної порожнини мишей, заражених усередині очеревинного збудником токсоплазмозу. Препарат не повинен містити життєздатних токсоплазм.

Токсоплазмін застосовується для діагностики при захворюваннях, підозрілих на токсоплазмоз – при акушерській патології, ураженні очей, лихоманках неясної етіології тощо.

5. Антраксин - препарат, що містить білково-полісахаридно-нуклеїновий комплекс, отриманий шляхом гідролізу сибіркових бацил. Антраксин використовується для діагностики у хворих на сибірку, для визначення стану алергії у імунізованих людей і у тих, хто переніс цю інфекцію. Алергічна проба позитивна вже у перші дні захворювання.

6. Дизентерії - є білковою фракцією двох збудників дизентерії шигел Флекснера і Зонне і використовується як додатковий засіб діагностики при підозрі на дизентерійну етіологію шлунково-кишкового захворювання у людей різного віку.

7. Бактеріальні алергени з таких мікроорганізмів як стафілококи, стрептококи, пневмококи, нейссерії катаральні, ешерихії, ентерококи, протеї, ложнодифтерійні палички отримують у вигляді очищених термостабільних фракцій фільтратів 5-6-добової -інакнтнованої суспензії бактерій, що містить і продукти метаболізму. Очищені бактеріальні алергени являють собою вилучені з мікроорганізмів білки (до 83%) з невеликою домішкою Цукрів та нуклеїнових кислот.

Препарати призначені виявлення підвищеної чутливості організму до мікроорганізмів, з яких вони отримані.

Бактеріальні екзотоксини (дифтерійний і скарлатинозний) застосовуються для визначення антитоксичного імунітету до дифтерії реакції Шика і до скарлатини реакції Дика.

Дифтерійний токсин готують з очищеного екзотоксин, після дворічної витримки, розведенням в гліцерино-желатинової суміші з таким розрахунком, щоб 0,2 мл містилося 1/40 Dim для морської свинки. Токсин вводять у дозі 0,2 мл строго внутрішньошкірно у середню частину долонної поверхні передпліччя. При позитивній реакції на токсин (тобто за відсутності антитоксичного імунітету у обстежуваного), що враховується через 72-96 годин, на місці введення з'являється інфільтрат та еритема від 15 до 30 мм. Отже необхідно додаткове вакцинування проти дифтерії.

Дітям із негативною реакцією Шика (за відсутності місцевих змін внаслідок нейтралізації антитоксинами введеного токсину) додаткових щеплень не проводять.

Скарлатинозний токсин (еритрогенний) – термостабільний нуклеопротеоїд стрептокока, консервований фенолом (0,2%) або мертіолатом (у розведенні 1: 10000). Скарла тинозний токсин дозується в так званих шкірних дозах, причому за одну шкірну дозу приймається така кількість токсину, яка при внутрішньошкірному введенні кролика викликає запалення (15-20 мм). Для визначення напруженості імунітету проти скарлатини дітям суворо внутрішньошкірно вводять скарлатинозний токсин у дозі 0,1 мл (одну дозу для кроля). Облік реакції проводять через 18-24 години.

Позитивною реакцією, що свідчить про відсутність імунітету до скарлатини, вважається утворення в місці введення еритеми розміром від 20-30 мм і більше при різко позитивній реакції.

ШИКА РЕАКЦІЯ(Schick) запропонована 1913 р. визначення ступеня сприйнятливості до дифтерії. Ш. н. виконується шляхом строго внутрішньошкірного введення дифтерійного токсину обсягом 0,2 см 3 ,укладають 1/40 Dim (див. Дифтерія).Токсин вводиться у шкіру лівої руки; у шкіру правої руки вводиться для контролю така сама кількість токсину, прогрітого при 100° протягом 10 хв. Результати впорскування відзначаються через 24 і 96 годин, при цьому можуть спостерігатися наступні явища: 1. При повній відсутності реактивних явищ на місці впорскування «контрольного» (грітого) токсину на місці впорскування активного токсину з'являються почервоніння та інфільтрат, що супроводжуються відчуттям легкого печіння та зуд. Ці явища розвиваються в першу добу, досягають максимуму на четверту добу, потім зникають, залишаючи на деякий час пігментацію шкіри. За величиною почервоніння та інфільтрату можна судити про ступінь реакції, яка позначається так: + («сумнівна» реакція; см), + +(якщо почервоніння має діаметр від 1,5 до 3 см)і + + + (якщо почервоніння більше 3 см); цей тип реакції називається «позитивною» Ш. н. 2. За відсутності будь-яких реактивних явищ дома впорскування як гретого, і активного токсину говорять про «негативної» Щ. 3. Якщо реактивні явища відзначаються обох руках однаковою мірою, таке явище позначається як «хибна» Ш. р. Ступінь помилкової (з грітим токсином) реакції відзначається (подібно до позитивної) одним, двома, трьома знаками. Реакція на грітий токсин має деякі якісні відмінності від реакції на активний токсин: швидка поява і зникнення (зазвичай протягом 36-48 год.) і переважання ексудативних явищ над інфільтративними. 4. Якщо реактивні явища відзначаються на обох руках, але ступінь їх різна, то говорять про «комбіновану» Ш. р.-при переважанні явищ на боці активного токсину, і про «збочену» Ш. р.-при переважанні явищ на боці гретого токсину. Загальноприйняті ставлення до суті Ш. р. зводяться до наступного: якщо в крові випробовуваного суб'єкта немає антитоксину або він міститься в кількості, меншій, ніж "/з -А-Е в 1,0 сироватки, то впорскується внутрішньошкірно токсин викликає реактивні явища, що позначаються як «позитивна» Ш .р. Якщо ж у крові випробуваного суб'єкта є достатня кількість антитоксину (по Шику 1/30, по Берингу 1/хоо і більше АЕ в 1,0 сироватки), то останній виробляє нейтралізацію введеного токсину, і виходить «негативна» Ш. р. Ці положення підтверджуються наступним спостереженням: якщо чутливому до дифтерійного токсину суб'єкту ввести нейтральну суміш «токсин-антитоксин», то при цьому ніякої реакції на місці ін'єкції цієї суміші не спостерігається. за способом Ремера паралельно з Ш. р. (Шик, Рамон, Вексель та ін.) Ці досліди в більшості випадків виявляють зазначену залежність результату Ш. р. від кількості ан титоксин у крові. Спостерігаються іноді невідповідності між цими явищами що неспроможні похитнути загального правила, оскільки бувають досить рідко: Єнсен (Jensen) напр. відзначив наявність негативних Ш. н. при мізерному вмісті антитоксину «I/i 00 AE в 1,0 сироватки) у 9% випадків. Оцінюючи результатів Ш. р. Необхідно врахувати, що у ранньому грудному віці нерідко спостерігається негативна Ш. н. за відсутності антитоксину в крові. Це пояснюється властивою ранньому дитячому віку анергією шкіри. Щодо т.з. хибний Ш. н. та її варіантів (комбінована, збочена Ш. р.), тобто реакції шкіри на гретий токсин, то вона пояснюється чутливістю організму до термостабільних продуктів метаболізму дифтерійної палички та речовин поживного бульйону. Це чутливість алергічного характеру. Як показав Зігль (Siegl), вона складається з двох компонентів – специфічного та неспецифічного по відношенню до дифтерії. Спостереження Целлера (Zoller) показали повну ідентичність помилкової реакції з внутрішньошкірною реакцією на анатоксин (0,2 анатоксину, розведеного щодо 1: 100)-це так звана реакція Целлера. Залежно від результату реакцій на токсин і анатоксин Целлер ділить всіх людей 4 групи (див. табл.). Процес імунізації проти дифтерії Целлер уявляє собі наступним чином: чутливі до дифтерії особи (I група з Характеристика групи Реакція | Реакція Целлера Шлка f 1 Чутливі до II f длфтерчі III 1 Імунні до двф- IV / терії + + + 1 Стадій +) алергії Ш. р.) при зустрічі з дифтерійною паличкою (б-нь або носійство) або при штучній імунізації сенсибілізуються по відношенню до мікроба та його продуктів. Шкіра їх дає реакцію алергії; але оскільки при цьому ще не виробилося достатньої кількості антитоксину, то шкіра реагує і на активний токсин (II група з помилковою або комбінованою Ш. р.). Надалі кількість антитоксину в крові збільшується настільки, що реакція на активний токсин робиться негативною, але алергія ще залишається (III група зі збоченою Ш. р.); нарешті остання зникає, і настає міцний імунітет, характерний особам IV групи (з негативною Ш. р.). Значення Ш. н. як імунореакції визначається панівними поглядами на природу імунітету при дифтерії. За сучасними уявленнями в основі останнього лежить наявність достатньої кількості антитоксину в крові. Ці уявлення, як відомо, визначають сучасну практику імунізаційної профілактики дифтерії (суміші токсин-антитоксин, анатоксин). З цієї точки зору Ш. р., що зручно замінює громіздке пряме визначення антитоксин в крові за способом Ремера, може вважатися ідеальним способом з'ясування стану імунітету, resp. чутливість людини до дифтерії. Питання про мінімальну кількість антитоксину в крові, необхідну для здійснення міцного імунітету до дифтерії, є спірним; у разі необхідно відзначити порівняльну рідкість захворювання дифтерією осіб, мають негативну Ш. р.; крім того можна вказати і на пряме експериментальне підтвердження цього питання: Гетрі, Маршаль і Мосс (Gu-tnrie, Marshall і Moss) заразили шляхом змащування зіва вірулентною культурою дифтерії вісім добровольців, з яких чотири мали позитивну Ш. р., а чотири негативну. В результаті 4 особи першої групи проробили типове захворювання, з 4 осіб з негативною Ш. н. у 3 було відзначено тимчасове носійство дифтерійної палички без ознак захворювання. Епідеміологічному значенню Ш. н. присвячено величезну кількість робіт. З них випливає, що ГЛ. нар. представляє надійний метод визначення ступеня імунного прошарку колективу стосовно дифтерії. Виявилося, що якщо розподілити позитивні Ш. н. за віками, то виходить крива (Zin-gher) вікової чутливості до дифтерії, що досить точно збігається з віковим розподілом захворюваності на дифтерію. Відносно високий імунітет дітей раннього грудного віку (до півроку) можна пояснити пасивною передачею імун-тіл через молоко матері. Що стосується падіння чутливості до дифтерії з віком (починаючи з одного року), що супроводжується накопиченням антитоксину в крові, то одні автори (Fried-berger та ін) вважають це явище виразом «фізіологічного серогенезу», тобто що накопичення антитоксину йде в порядок фізіологічний, супроводжуючи таким of. разом дозрівання людського організму, інші автори (Цингер, Дедлі, Рамон та інших.) вважають, що люди накопичують антитоксин у крові результаті явної, а частіше «німої інфекції> дифтерією (див. малюнок). Епідеміологічна цінність Ш. н. полягає і в тому, що нею зручно користуватися для відбору осіб, які підлягають (у разі позитивного результату) активної імунізації проти дифтерії. Зазвичай вона застосовується у дітей

"-~-» $ осіб, які мають антитоксин у крові (за Греєром)

°--«> % осіб покладе, реакцією. Шика (за Парком і Цкнгером) стовпчики - захворюваність на дифтерію Розподіл за віком: осіб, які мають антитоксин у крові (в %); осіб із позитивною реакцією Шика (в %); захворюваності на дифтерію (°/ооо кожного віку). у віці понад 5 років, маючи на увазі відносну рідкість негативнішою Ш. н. віком до 5 років. Нарешті ІІІ. нар. застосовується і як об'єктивний контроль ефективності запобіжних щеплень проти дифтерії. Ця ефективність доводиться переходом позитивної (до щеплення) Ш. н. негативну після вакцинації (зазвичай через 6 тижнів після останнього щеплення). Техніка виробництва Ш. р.: 1. Для того, щоб приготувати необхідне розведення токсину в потрібному обсязі, виходять з токсину Dim. Допустимо Dim токсину = 0,0032. Щоб приготувати токсин, що містить I / 4l) Dim в 0,2 об'єму, надходять так: беруть lOODlm, в даному випадку = 0,32 і додають фізіологічного розчину до 10,0, тобто 9,68. Беруть 1,0 цього розведення (тобто 10 Dim) і додають до 79,0 фізіол. розчину. Тоді 80,0 другого розведення є 10.Dim; в 1 см 3отже-V» Dim, а 0,2-Vio Dim. При кожному розведенні необхідно брати свіжу піпетку суху, промиваючи її не менше 10 разів. При цьому необхідна особлива чіткість відмірювання і точність піпеток (половину приготованого т. о. розведення токсину переливають в окрему колбу і ставлять в киплячу водяну баню на 10 хв.; т. о. одержують токсин для «контролю»). Через те, що токсин, розведений фізіол. розчином, що швидко втрачає свою активність, зручніше для розведення брати т. і. боратно-буферний розчин (див. Дика реакція),в якому розведений токсин зберігає свою силу протягом декількох місяців. 2. Впорскування проводиться строго внутрішньошкірно, зручніше за допомогою туберкулінового шприца з платинової дуже тонкою голкою (№ 18, 19). Голка повинна мати коротку борідку. Борідку при ін'єкції треба тримати назовні. Введення токсину відбувається повільно з відомою напругою, характерною для внутрішньошкірного введення рідини, і в результаті на місці уколу утворюється добре відмежована бульбашка (Quaddel), що має вдавлення на місці волосяних мішечків. 3. Впорскування активного токсину виробляють у шкіру передпліччя лівої руки, гретий токсин вводиться у шкіру передпліччя правої руки. При масовій постановці ІІІ. нар. рекомендується робити двом лікарям одночасно - один вводить активний, інший грітий токсин. 4. Відлік Ш. н. проводиться двічі: через 24 години для обліку хибних реакцій і через 96 годин, коли істинна Ш. н. досягає кульмінаційного пункту. Літ.:Здродовський П., Сучасні проблеми специфічної профілактики дифтерії, Арх. біол. наук, т. XXXV, сірий. А, вип. 2, 1934; Doull J., Factors Influencing selective distribution tn diphtheria, Journ. ol prevent, med., v. IV, 1930; Frost W., Infection, immunity and disease in epidemiology of diphtheria, Ibid., v. II, 1928; Meerseman, Fries et Renard, La diphte-rie chez les suiets reaction de Schick negative, Compt. rend, de la soc. de biol., v. CXII, 1933; Park W., Toxin-antitoxin immunization до diphtheria, Journ. Amer. med. Ass., v. LXXIX, p. 1584, 1922; Rosl ing E., Die Schickreaktion und Ihre Bedeutung, Seuchen-bekamp-fung, B. VIІ, 1930; Schick Ст., Die Diphtherietoxin- Hautreaktion des Menschen a Vorprobe des prophylak-tisohen Diphlherieheilseruminielition, M"inch. med. Wo-chenschr., 1913, № 47; Nach Schick, Arch. f. Kinderheilk., B. XCVІII, 1932; Zinger r A., ​​The Schick test, Journ. of Amer. med. Ass., v. LXXVIII, 1922; reaction al"anatoxine diphterique ou anatoxf-reaction, Compt. rend. de la Soc. de biol., v. XCI, 1924. Див. Скарлатина. Р. Орлов.

Цитохімічні методипереслідують ототожнення хімічних та ферментних речовин у клітинах, використовуючи для цього кольорові реакції. Цитохімічні препарати зберігають клітинну структуру, що допускає виявлення клітин і внутрішньоклітинну локалізацію досліджуваного складового. Ось чому в гематології віддається перевага не біохімічним, трудомістким, що руйнує клітинну структуру, що відноситься до дуже різнорідної клітинної популяції, а цитохімічних способів.

Цитохіміядовела, що серед морфологічно однакових клітин є суттєві хімічні та ферментативні відмінності.

Глікоген (реакція ШІК) (PAS) – метод Гочкісс – Мак Мінус

Принцип ШІК-реакції. Полісахариди виявляються шляхом реакції, що окислює спиртні групи, які перетворюються на альдегідні групи, та ототожнення останніх шляхом кольорової реакції реагентом Шифф.

Реагенти для ШІК-реакції: 1. Закріплюючий суміш спирт-формалін: 9 частин абсолютного етилового спирту +1 частина 40% формаліну; зберігати за температури +4°.

2. Періодня кислота, 1% водний розчин. Розчин безбарвний. Зберігати у пляшці з коричневого скла, у темряві, при лабораторній температурі. Пожовклий розчин не застосовується.

3. Реагент Шіффа. Розвести 1 г основного фуксину 200 мл дистильованої води при температурі кипіння. Болтати 5 хвилин, охолодити до температури 50 °, профільтрувати і додати 20 мл нормальної соляної кислоти. Охолодити до 25°, додати 2 г натрію метабісульфіту або калію, які повністю забезпечують розчин. Розчин повинен простояти добу в умовах темряви та холоду (+4°). Потім додати 2 г активованого вугілля, побалакати 1 хв. та профільтрувати.
Отриманий фільтрат прозорий та безбарвний. Допускається трохи жовтуватий колір; якщо розчин рожевіє, стає непридатним. Зберігати при температурі +4° у герметично закритій пляшці з коричневого скла.

4. Зелений світлий –1% водний розчин.

5. Діастаз: нерозріджена слина людини або 0,1% розчину амілолітично-діастатичного ферменту у фізіологічному сольовому розчині.

Техніка проведення ШІК-реакції

1) 10-хвилинне закріплення мазків сумішшю спирт-формалін; промивання дистильованою водою;
2) окиснення 1% розчином періодної кислоти, 10 хв.; промивання дистильованою водою;
3) забарвлення реагентом Шиффа в накритому посуді, в умовах темряви та холоду, протягом 2 годин; промивання проточною водою;
4) контрастне забарвлення 1% зеленим-світлим протягом 1 хвилини; промивання проточною водою.

Контрольний закріплений мазокпіддається інкубації діастазом, 60 хв. в умовах кімнатної температури для вибіркового видалення глікогену. Після промивання дистильованою водою піддається обробці за звичайним методом.

Оцінка результатів ШІК-реакції

Глікоген, пофарбованим у багряно-червоний колір, представляється у вигляді зерен або розсіяний. Для контролю реакції використовують зрілі гранулоцити мазка. Крім глікогену ШІК позитивну реакцію дають інші речовини вуглеводної природи, такі як, муцин, мукопротеїни, цереброзиди, фібрин. Диференціація глікогену від цих складових здійснюється шляхом попередньої обробки діастаз, після чого глікоген більше не забарвлюється.

У гранулоцитахглікоген знаходиться у розсіяному вигляді вже на стадії промієлоциту і починає збільшуватись у міру дозрівання. У нормальних умовах лімфоцити негативні чи 20% їх можуть бути кілька дрібних зерен глікогену. Моноцити негативні чи мають тонку зернистість.

Інтенсивність забарвленнявизначається напівкількісно. У реакція ШІК відбивається у вигляді глікогенного показника, або середнього показника реакції (Астальді). Нормальний показник глікогену коливається не більше від 0,10 до 0,30. Зазвичай лише в патологічних лімфоцитів спостерігається ступінь навантаження більше ніж 3.

Значилося методу ШІК-реакції:
а) При постановці диференціального діагнозу окремих цитологічних видів гострої лейкемії:
- Мієлобласти та промієлоуїти ШІК-негативні або набувають слабкого дифузного забарвлення. Тіла Ауера дають позитивну реакцію, яка слабшає після травлення зі слиною.
- Лімфобласти при гострій лейкемії та лімфосаркомі дають різку ШІК-позитивну реакцію у вигляді зерен або великих блоків глікогену.
- еритробласти при еритреміі та гострій еритролейкемії дають різко позитивну розсіяну або зернисту реакцію, на противагу нормальним еритробластам, які ШІК-негативні;
- Моноцитоїдні бласти непостійно слабко позитивні, з тонкою зернистістю.

б) З метою встановлення діагнозу та спостереження за ефективністю лікування при хронічній лімфатичній лейкемії: завищений показник глікогену вказує на важку форму захворювання та тяжкий прогноз.
Зростання глікогенуу патологічних лімфоцитах не характерне для лейкемії явище, воно пояснюється зростанням метаболічної активності за будь-якого виду лімфоїдної проліферації.

в) Для диференціації клітин Гоше від інших макрофагів із накопиченням.

Шика реакція Шика реакція

внутрішньошкірна проба з дифтерійним токсином, що застосовується для встановлення протидифтерійного імунітету. Для постановки Ш.Р. внутрішньо шкіри долонної поверхні передпліччя туберкуліновим шприцом вводять 0,2 мл стандартного дифтерійного токсину, що містить 1/64 ДЛМ для морської свинки. Результат враховують через 72 - 96 год. У людей, які не мають Ат проти токсину або мають їх мало, на місці введення утворюються почервоніння та інфільтрат (позитивна реакція); у людей, в с-ке яких брало містяться антитоксичні Ат в концентрації 1 / 30 АЕ і більше, інфільтрат не розвивається або він менше 1 см (негативна реакція). Результати Ш.Р. використовують для оцінки колективного імунітету та проведення профілактичних щеплень. В даний час із цією метою застосовують РПГА з еритроцитарним діагностикумом.

(Джерело: «Словник термінів мікробіології»)


Дивитись що таке "Шика реакція" в інших словниках:

    ШИКА РЕАКЦІЯ- (Schick) запропонована у 1913 р. для визначення ступеня сприйнятливості до дифтерії. Ш. н. виконується шляхом строго внутрішньошкірного введення дифтерійного токсину обсягом 0,2 см3, що укладають 1/40 Dim (див. Дифтерія). Токсин вводиться у шкіру лівої руки; …

    - (В. Schick, 1877 1967, амер. педіатр) шкірна проба з дифтерійним токсином для оцінки рівня антитоксичного імунітету, що зумовлює несприйнятливість людини до дифтерії. Великий медичний словник

    Шкірна проба, що застосовується для оцінки сприйнятливості людини до дифтерії; одна з алергічних діагностичних проб (Див. алергічні діагностичні проби). Запропонована у 1913 р. австрійським педіатром Б. Шиком (В. Schick). Проводиться шляхом … Велика Радянська Енциклопедія

    ШИКА РЕАКЦІЯ- (Запропонована австрійським педіатром B. Schick, 1877-1967) - шкірна проба, що застосовується для оцінки сприйнятливості людини до дифтерії; заснована на оцінці виразності місцевої реакції (почервоніння, набряк), що розвивається через 3-4 доби після ... Енциклопедичний словник з психології та педагогіки

    реакція Шика- Внутрішньошкірна проба з дифтерійним токсином. [Англо російський глосарій основних термінів з вакцинології та імунізації. Всесвітня організація охорони здоров'я, 2009 р.] Тематики вакцинологія, імунізація EN Schick testSchick control … Довідник технічного перекладача

    Тест визначення сприйнятливості людини до дифтерії. Невелика кількість дифтерійного токсину уводиться під шкіру пацієнта; почервоніння та припухлість місця введення свідчать про відсутність у людини імунітету до дифтерії, тому… Медичні терміни

    РЕАКЦІЯ ШИКА- (Schick test) тест для визначення сприйнятливості людини до дифтерії. Невелика кількість дифтерійного токсину уводиться під шкіру пацієнта; почервоніння та припухлість місця введення свідчать про відсутність у людини імунітету до дифтерії. Тлумачний словник з медицини

    - (РН) лабораторний тест, крім Ат імунної ки нейтралізують, знешкоджують, гальмують біол. активність (летальну, інфекцію, токсичну, ферментативну та ін) мікроорганізмів, їх токсинів і ферментів. РН застосовують: 1) для якісного та… … Словник мікробіології

    ДІНА РЕАКЦІЯ- (Dick), названа на ім'я подружжя Дік, що запропонували її для визначення сприйнятливості до скарлатини. Ці американські дослідники вважають збудником скарлатини особливий вид гемолітичного стрептокока, який, локалізуючись первинно на слизовій оболонці. Велика медична енциклопедія

    Внутрішньошкірна реакція- Внутрішньошкірна реакція, або інтракутанна (від лат. intra всередині і cutis шкіра), поряд зі шкірною, підшкірною та кон'юнктивальною, застосовується зі слід. метою: 1) виявлення алергічного стану, т. е. підвищеної чутливості до… … Велика медична енциклопедія

Книги

  • Велика медична енциклопедія у 35 томах. Том 35. Шика реакція – Ящур, Н.А. Семашко. Велика Медична Енциклопедія ставить собі завдання бути як науковим довідником з усіх питань медицини та суміжних областей, а й дати читачеві відомості, з яких він…