Головна · Виразка · Рпга 1 40 що означає. Трепонемні випробування на сифіліс. Реакції на різних стадіях захворювання

Рпга 1 40 що означає. Трепонемні випробування на сифіліс. Реакції на різних стадіях захворювання

Багато пацієнтів неодноразово запитували: «Аналіз крові РПГА – що це таке?» Реакція пасивної гемаглютинації (РПГА) – таке дослідження, що допомагає визначити наявність в організмі збудника, здатного провокувати сифіліс. Даний аналіз надає достовірні результати та допомагає розпочати своєчасну терапію, яка призначається виключно фахівцем. Для отримання якісних результатів рекомендується дотримуватися порад лікаря. Розшифровкою аналізу займається спеціаліст, тому не варто займатися самостійною діагностикою, оскільки це може призвести до негативних наслідків. Рекомендовано обстеження у багатьох ситуаціях.

Значення аналізу крові РПГА

Це дослідження має на увазі особливу реакцію, яка виявляє в організмі неактивну гемаглютинацію, допомагає обчислити наявність антигенів блідої трепонеми, що вважається контагієм сифілісу - небезпечного захворювання, що призводить до несприятливих наслідків, що супроводжується різною симптоматикою.

В організмі вона здатна спровокувати певну реакцію імунітету, тобто вироблення специфічних антитіл. Якщо після здачі аналізу у крові відзначатимуться позитивні результати, це свідчить про прогресуванні даного організму. Означати це може лише одне – термінова терапія.

Серологічні дослідження бувають:

  • специфічні;
  • неспецифічні.

Даний підрозділ спирається на різновиди антитіл, які можна виявити у крові пацієнта внаслідок обстеження. Загалом, реакція пасивної гемаглютинації – РПГА – специфічне дослідження щодо блідої трепонеми. Встановлення сифілісу в організмі належить до категорії специфічних діагностик, які дозволяють визначити захворювання у час його розвитку.

Іноді РПГА може спричинити помилково позитивний результат дослідження у пацієнта. Дана ситуація спостерігається, якщо у людини розвиваються та діагностуються аутоімунні захворювання та патології.

Отримання хибних результатів тесту можуть бути спровоковані через вірусні захворювання, які збільшують у людському організмі неспецифічні антитіла. Тому пацієнту можуть призначити інші види досліджень виявлення прогресуючих патологій, і навіть повторні аналізи РПГА.

Необхідність аналізу

Оскільки сифіліс – захворювання, яке передається статевим шляхом, аналіз РПГА допомагає виявити зараження та сприятиме своєчасно розпочатій терапії. Якщо проігнорувати незахищений статевий акт, то це може призвести до серйозних незворотних наслідків та різних статевих захворювань.

Дане дослідження необхідне:

  • Для визначення наявності сифілісу в організмі, оскільки це захворювання передається не лише статевим шляхом, може протікати на початкових стадіях практично безсимптомно.
  • Для влаштування на роботу в різні організації, де співробітник працюватиме з людьми – їдальні, лікарні, військові організації.

  • При постановці на облік під час виношування дитини. У такій ситуації може коригуватися терапія при вагітності (бо захворювання може призвести до різних відхилень у розвитку плода).
  • Перед операційним втручанням та при госпіталізації пацієнта.
  • Для донорів крові виключити поширення вірусу.
  • Для людей, які відбувають термін у місцях ув'язнення.
  • Для пацієнтів, які мають ймовірність прогресування сифілісу.
  • Для пацієнтів, у яких скринінгове дослідження показало позитивний результат.
  • Після незахищеного статевого акту із неперевіреним партнером.
  • Проводиться дітям, які були народжені від зараженої блідої трепонемої матері. У цій ситуації дитині призначається спеціальна терапія, яка допоможе покращити її здоров'я та позбутися проблеми.
  • Для відстеження позитивних результатів під час активної терапії.
  • Для переконання, що лікування призвело до повного лікування пацієнта.

Аналіз крові РПГА – дослідження, що допомагає виявити в організмі прогресування трепонеми – збудник сифілісу.

Інші обстеження

Сифіліс – хвороба, яка потребує своєчасної діагностики та лікування, якщо виявити патології в перші дні після зараження, існує велика ймовірність повного лікування. Якщо є сумніви щодо зараження, то необхідно звернутися за додатковою консультацією до дерматовенеролога, який курируватиме лікування, що підбирається під кожного пацієнта окремо залежно від стадії патології.

Щоб поставити точний діагноз фахівець оглядає пацієнта, приділяється окрема увага статевим органам.

При даній патології відзначатимуться специфічні ознаки:

  • висипання на статевих органах;
  • ущільнення шкірного покриву;
  • збільшення лімфатичних вузлів.

Після цього лікар бере матеріал із пошкоджених ділянок шкіри для вивчення його під мікроскопом. Якщо фахівець виявить у досліджуваному матеріалі трепонему, це означатиме, що пацієнт заражений.

Але варто пам'ятати, що на деяких стадіях патології лабораторні аналізи можуть показати негативний результат, тому може знадобитися повторне обстеження через деякий період.

  • РНГА (реакція непрямої гемаглютинації).

Результати аналізів РПДА

Результат аналізу буде готовий вже через кілька днів, і пацієнт зможе дізнатися свій діагноз (якщо є). Визначити зараження можна лабораторним шляхом через місяць прогресування блідої трепонеми в організмі, тобто після первинного інфікування.

Найчастіше первинний аналіз уражає первинної стадії. Що ж до вторинної, то захворювання вже супроводжується підвищенням показань. При прихованому сифіліс також відзначаються знижені позначки.

Після пройденої терапії, яка відрізнятиметься між собою залежно від стадії патології, у пацієнта збережеться позитивний результат аналізу. Не варто цьому дивуватися, оскільки ця ситуація відзначається у більшості заражених хворих.

Для отримання достовірних результатів необхідно попередньо підготуватися:

  1. Кров здається на голодний шлунок вранці.
  2. Перед тестом не варто пити велику кількість рідини, оскільки це може вплинути на кров. Також компоненти напоїв можуть вплинути на результат.
  3. Варто відмовитися від тютюнопаління перед проходженням дослідження та вживання алкогольних напоїв напередодні.

Кров для дослідження береться з вени, яка розташовується на ліктьовому згині. Якщо вени перебувають надто глибоко (неможливо взяти кров на аналізи), то паркан може здійснюватися з вен, що знаходяться на кисті або в області передпліччя.

Необхідно розуміти, що якщо проігнорувати рекомендації фахівця щодо попередньої підготовки та отримати недостовірний результат дослідження, то пацієнту буде призначено неправильне лікування, яке може призвести до негативних побічних ефектів та розвитку інших патологій в організмі, тому не варто ризикувати своїм здоров'ям.

Часто пацієнти виходять із кабінету з квадратними очима, розглядаючи купу бланків на здачу аналізів у руках. Загальний аналіз крові та аналіз сечі питань не викликають, зате всі інші!

Наприклад, кров на РПГА. Що це за дивні букви? Навіщо беруть "зайву" кров, коли вже все ясно?

Це лише пацієнту здається, що все зрозуміло, а лікареві для того, щоб поставити діагноз, потрібен саме цей аналіз.

Що це за хитрий аналіз?

Якщо дали напрямок із цими дивними літерами у бланку "на РПГА", що це позначатиме? Це дослідження не призначається при звичайній діагностиці.

Аналіз дуже специфічний. Робиться, щоб визначити стадію сифілісу. У разі, коли загальноприйнятий аналіз на RW - реакцію Вассермана - виявився позитивним, чи лікар сумнівається, що його показник достовірний. Лікарю потрібні значення РПГА, щоб призначити адекватну терапію.

У чому суть РПГА?

Для тих, хто хоче дізнатися докладніше про те, що РПГА - що це, ми даємо відповідь. Це специфічний трепонемний тест. Якщо говорити медичною мовою, не зовсім зрозумілою для простих обивателів, - реакція пасивної гемаглютинації.

В її основу лягло те, що аглютинація еритроцитів, на поверхні яких знайшов притулок збудник сифілісу, званий спірохетою, відбувається з утворенням трепонемних антитіл.

Аглютинація - процес, при якому зі складу взятої на аналіз крові під впливом спеціальних реактивів випадає осад з будь-яких бактерій, вірусів та інших сторонніх включень.

Чим більше осідає еритроцитів з трепонемою, що впровадилася в них, тим вище стадія зараження.

Що таке сифіліс?

Навіть зіткнувшись з таким захворюванням, як сифіліс, не всі можуть зрозуміти, наскільки воно серйозне і чим загрожує.

Це венерична хвороба. Заразитися можна:

  • через слину;
  • через піхвовий секрет;
  • через сперму;
  • побутовим шляхом за наявності ушкоджень поверхні шкіри;
  • дитині може передатися сифіліс через молоко хворої матері.

На першій стадії зараження хворобою з'являються шанкри – щільні утворення або виразки, потім вони зникають.

Вторинна стадія характеризується висипом та збільшенням лімфатичних вузлів.

Третя та четверта стадії цієї неприємної хвороби можуть виразитися у поразці головного мозку, серцево-судинної системи, кісткових руйнуваннях та інших патологічних змінах в організмі.

Якщо вагітна жінка має сифіліс, то діти народжуються з гострими патологіями, які стосуються практично всіх життєво важливих систем.

Якщо лікар призначив здати кров на РПГА, що це таке можна уточнити для загального розвитку, але відмахуватися від такого серйозного аналізу не можна! Сифіліс потребує обов'язкового лікування.

Ті, хто мають це захворювання, становлять серйозну небезпеку для оточуючих.

Експерес-діагностику захворювання – реакцію Вассермана чи RW – обов'язково роблять усім, хто влаштовується на роботу чи потрапляє на лікування до стаціонару.

Як прочитати результати аналізу?

Аналіз зданий, і на руки видали бланк із незрозумілими цифрами. Наприклад, РПГА – 1/320. Що це може означати?

Цифри пишуться на бланку в тому випадку, якщо в організмі виявлено. Якщо її немає, то там буде написано слово "негативно". Отже, захворювання відсутнє, навіть якщо реакція Вассермана була позитивною.

РПГА показує захворювання не раніше, ніж через 4 тижні після впровадження трепонеми в організм, тобто після закінчення інкубаційного періоду.

Цифри значення – це титри.

Аналіз РПГА позитивний ще буде довгі роки після того, як сифіліс вилікувано.

Це цікаво

Тема специфічна, але й сифіліс – інфекція непроста. Страх заразитися ним може отруїти життя. Позитивний РПГА і RW так вибивають із колії, що деяких особливо нервових пацієнтів це змушує замислюватися про самогубство.

Не треба одразу впадати в паніку! Наприклад, реакція Вассермана може показати наявність сифілісу під час вагітності, при ангіні та деяких інших захворюваннях. Саме для уточнення того, чи є хвороба, і беруть додаткові аналізи, один з яких – РПГА – аналіз крові, який точно показує, чи є трепонема в організмі, і яка стадія захворювання.

Але це дослідження може виявитися неточним при деяких запальних захворюваннях внутрішніх органів. Хибнопозитивний РПГА - що це може означати, крім сифілісу? Наприклад, гостре запалення селезінки.

Тому, отримавши на руки первинні результати, не потрібно панікувати. Є ймовірність, що після повторного здавання крові результат виявиться негативним.

Якщо кілька специфічних аналізів крові на сифіліс показують позитивний результат, тоді зараження вважається 100%.

Тому проводять комплексне обстеження. Воно складається з:

  • реакції Вассермана;
  • РПГА;
  • ІФА – імуноферментного аналізу;
  • РІБТ, який виявляє сифіліс за відсутності зовнішньої симптоматики на пізніх стадіях.

На жаль, сифіліс – така хвороба, якою можна заражатися кілька разів. Імунітет після перенесеного захворювання не виникає.

При первинному сифілісі досліджується на бліду трепонему твердого шанкра, що відокремлюється, або пунктат лімфатичних вузлів. При вторинному сифілісі матеріал береться з поверхні ерозованих папул на шкірі, слизових, з тріщин та ін. хлориду натрію або призначити примочки з тим самим розчином. Очищену поверхню осушують сухим тампоном і платиновою петлею або лопаткою злегка подразнюють периферичні ділянки, одночасно злегка здавлюючи пальцями в гумовій рукавичці основу елемента до появи тканинної рідини (серуму), з якої готують препарат для дослідження. Отримання тканинної рідини має важливе значення для діагностики сифілісу, оскільки бліді трепонеми знаходяться у просвітах лімфатичних капілярів, у тканинних щілинах навколо лімфатичних та кровоносних судин.

Пункція регіонарних лімфатичних вузлів

Шкіру над лімфатичними вузлами обробляють 96% спиртом та 3-5% спиртовим розчином йоду. Потім 1 та 2 пальцями лівої кисті фіксують лімфатичний вузол. Правою рукою беруть стерильний шприц з декількома краплями ізотонічного розчину хлориду натрію, який працює паралельно поздовжньої осі лімфатичного вузла. Голка проштовхується у різних напрямках до протилежної стінки капсули вузла і вміст шприца повільно вводиться. Пальцями лівого пензля лімфатичний вузол злегка масажується. При повільному видаленні голки одночасно висувають поршень шприца, аспіруючи вміст лімфатичного вузла. Матеріал наноситься на предметне скло (при малій кількості матеріалу додається крапля ізотонічного розчину натрію хлориду), покривається покривним склом. Дослідження нативного препарату проводиться у темному полі зору за допомогою світлооптичного мікроскопа з темнопольним конденсором (об'єктив 40, 7х, 10х або 15х). Бліді трепонеми можуть виявлятися також у забарвлених препаратах. При фарбуванні по Романівському-Гімзі бліді трепонеми забарвлюються в рожевий колір, за Фонтаном і Морозовим в коричневий (чорний), за методом Буррі незабарвлені трепонеми виявляються на темному тлі.

Серологічна діагностика

Важливе значення у діагностиці сифілісу, оцінці ефективності лікування, встановленні критерію вилікуваності, виявлення прихованих, резистентних форм надається стандартним (класичним) та специфічним серологічним реакціям. До стандартних або класичних серологічних реакцій (КСР) відносяться:
  • Реакція Вассермана (РВ),
  • осадові реакції Кана та Закса-Вітебського (цитохолева),
  • реакція на склі (експрес-метод),
до специфічних:
  • реакція іммобілізації блідих трепонем (РІБТ),
  • реакція імунофлюоресценції (РІФ)

Реакція Вассермана (РВ)

- розроблена А. Вассерманом (A. Wasserman) спільно з А. Нейссером (A. Neisser) і Ц. Бруком (C. Bruck) у 1906 році. Реакція Вассермана заснована на феномен зв'язування комплементу (реакція Борде-Жангу) і дозволяє визначати протиліпідні антитіла (реагіни). Відповідно до сучасних уявлень, у реакції Вассермана визначаються антитіла до ліпідів макроорганізму, а не блідої трепонеми і реакція виявляє аутоімунний процес, який викликається денатуруванням блідими трепонемами тканин макроорганізму з утворенням ліпопротеїдного комплексу (кон'югата), в якому

Зазвичай РВ ставиться із двома чи трьома антигенами. Найбільш часто застосовується кардіоліпіновий антиген (екстракт з серця бика, збагачений холестерином і лецитином), що відрізняється високою чутливістю, і трепонемний антиген (оброблена ультразвуком завись анатогенних культуральних блідих трепонем). Спільно з реагінами сироватки крові хворого ці антигени утворюють імунний комплекс, здатний адсорбувати та пов'язувати комплемент. Для візуального визначення освіченого комплексу (реагін + антиген + комплемент) як індикатор застосовується гемолітична система (суміш еритроцитів барана з гемолітичною сироваткою). Якщо комплемент пов'язаний у 1 фазі реакції (реагін + антиген + комплемент), гемоліз не настає - еритроцити випадають у легко помітний осад (РВ позитивна). Якщо в 1 фазі комплемент не пов'язаний внаслідок відсутності у випробуваній сироватці реагінів, він буде використаний гемолітичною системою та відбудеться гемоліз (РВ негативна). Ступінь вираженості гемолізу при постановці РВ оцінюється плюсами: повна відсутність гемолізу ++++ або 4+ (РВ різко позитивна); гемоліз, що ледь почався +++ або 3+ (РВ позитивна); значний гемоліз або 2+ (РВ слабопозитивна); незрозуміла картина гемолізу ± (РВ сумнівна); повний гемоліз – (реакція Вассермана негативна).

Крім якісної оцінки РВ є кількісна постановка з різними розведеннями сироватки (1:10, 1:20, 1:80, 1:160, 1:320). Титр реагінів визначається максимальним розведенням, що ще дає різко позитивний (4+) результат. Кількісна постановка РВ має значення у діагностиці деяких клінічних форм сифілітичної інфекції, а також при проведенні контролю за ефективністю лікування. В даний час реакція Вассермана ставиться з двома антигенами (кардіоліпіновий та трепонемний озвучений штам Рейтера). Як правило, РВ стає позитивним на 5-6 тижні після зараження у 25-60% хворих, на 7-8 тижні - у 75-96%, на 9-19 тижні - у 100%, хоча останніми роками іноді раніше чи пізніше . При цьому титр реагінів поступово наростає і досягає максимальної величини (1:160-1:320 і вище) у разі появи генералізованих висипів (сифіліс вторинний свіжий). При позитивації РВ виставляється діагноз первинного серопозитивного сифілісу.
При вторинному свіжомута вторинному рецидивному сифілісі РВ позитивна у 100% хворих, але у виснажених хворих з ослабленим імунітетом може спостерігатися негативний результат. Згодом титр реагінів поступово знижується і при вторинному рецидивному сифіліс зазвичай не перевищує 1:80-1:120.
При третинному сифілісіРВ позитивна у 65-70% хворих і зазвичай спостерігається низький титр реагінів (1:20-1:40). При пізніх формах сифілісу (сифіліс внутрішніх органів, нервової системи) позитивна РВ спостерігається у 50-80% випадків. Титр реагінів коливається від 1:5 до 1:320.
При прихованому сифілісіпозитивна РВ відзначається у 100% хворих. Титр реагінів від 1:80 до 1:640, а при пізньому прихованому сифілісі від 1:10 до 1:20. Швидке зниження титру реагінів (до повної негативації) під час лікування свідчить про ефективність лікування.

Недоліки реакції Вассермана- Недостатня чутливість (в початковій стадії первинного сифілісу негативна). Вона також негативна у 1/3 хворих, якщо вони в минулому лікувалися антибіотиками, у пацієнтів третинним активним сифілісом з ураженнями шкіри та слизових, кістково-суглобового апарату, внутрішніх органів, центральної нервової системи, при пізньому вродженому сифілісі.
Недостатня специфічність- реакція Вассермана може бути позитивна в осіб, які раніше не хворіли і не хворіють на сифіліс. Зокрема хибнопозитивні (неспецифічні) результати РВ відзначаються у хворих, які страждають на системний червоний вовчак, лепру, малярію, злоякісні новоутворення, ураження печінки, великі інфаркти міокарда та інші захворювання, а іноді у абсолютно здорових людей.
Короткочасна хибно-позитивна реакція Вассермана виявляєтьсяу деяких жінок перед пологами або після них, у осіб, які зловживають наркотиками, після наркозу, алкоголю. Як правило, хибнопозитивна РВ виражена слабо, частіше з низьким титром реагінів (1:5-1:20), позитивна (3+) або слабко позитивна (2+). При масових серологічних обстеженнях частота хибно-позитивних результатів становить 0,1-0,15%. Для подолання недостатньої чутливості користуються постановкою на холоді (реакція Колляра) і одночасно вона ставиться з іншими серологічними реакціями.

Осадові реакції Кана та Закса-Вітебського

Реакція Вассермана застосовується в комплексі із двома осадовими реакціями (Кана та Закса-Вітебського), при постановці яких готуються концентрованіші антигени. Експрес метод (мікрореакція на склі) - відноситься до ліпідних реакцій та заснований на реакції преципітації. Ставиться зі специфічним кардіоліпіновим антигеном, 1 краплю якого змішують із 2-3 краплями досліджуваної сироватки крові в лунках спеціальної скляної пластини.
Перевага- Швидкість отримання відповіді (через 30-40 хв). Результати оцінюються за кількістю осаду, що випав, і величини пластівців. Виразність визначають як КСР - 4+, 3+, 2+ та негативна. Слід зазначити, що хибнопозитивні результати спостерігаються частіше, ніж за РВ. Як правило, експрес-метод застосовується при масових обстеженнях на сифіліс, при обстеженні у клініко-діагностичних лабораторіях, соматичних відділеннях та лікарнях. На підставі результатів експрес-методу діагноз сифілісу виставляти забороняється, виключається застосування у вагітних, донорів, а також для контролю після лікування.

Реакція іммобілізації блідих трепонем (РІБТ)

Реакція іммобілізації блідих трепонем (РІБТ)- Запропонована в 1949 році Р.Нельсоном (R.W.Nelson) і М.Мейєром (M.Mayer). Є найбільш специфічним діагностичним тестом на сифіліс. Однак складність та дорожнеча постановки обмежує її застосування. У сироватці крові хворих виробляється визначення відеоспецифічних антитіл (іммобілізинів), що призводять до нерухомості блідих трепонем у присутності комплементу. Антигеном є живі патогенні бліді трепонеми, що виділяються від заражених сифілісом кроликів. За допомогою мікроскопа проводиться порахунок тих, що втратили рухливість (іммобілізованих) блідих трепонем і оцінюються результати РІБТ: іммобілізація блідих трепонем від 51 до 100% - позитивна; від 31 до 50% – слабко позитивна; від 21 до 30% – сумнівна; від 0 до 20% – негативна.
РІБТ має значення при диференціальній діагностицідля відмежування хибно-позитивних серологічних реакцій від реакцій, обумовлених сифілісом. Пізно стає позитивнішою ніж РВ, РІФ і тому для діагностики інфекційних форм сифілісу її не застосовуютьХоча у вторинному періоді сифілісу вона позитивна у 85-100% хворих.
У третинному періоді сифілісу з ураженням внутрішніх органів, опорно-рухового апарату, нервової системи РІБТ позитивна у 98-100% випадків ( РВ часто негативна).
Необхідно пам'ятати, що РІБТ може виявитися хибнопозитивним у разі наявності в досліджуваній сироватці трепонемоцидних препаратів (пеніцилін, тетрациклін, макроліти та ін), які викликають неспецифічну іммобілізацію блідих трепонем. З цією метою кров на РІБТ досліджується не раніше 2 тижнів після закінчення прийому антибіотиків та інших лікарських засобів.
РІБТ як і РІФ у процесі лікування повільно негативуються, тому вона не застосовується як контроль у процесі лікування.

Реакція імунофлюоресценції (РІФ)

Реакція імунофлюоресценції (РІФ)- Розроблена в 1954 році A.Coons і вперше застосована для діагностики сифілітичної інфекції Deacon, Falcone, Harris в 1957 році. РІФ заснована на непрямому методі визначення флюоресціюючих антитіл. Антигеном для постановки є фіксовані на предметних стеклах тканинні бліді патогенні трепонеми, на які наносять досліджувану сироватку. Якщо в досліджуваній сироватці є протитрепонемні антитіла, що відносяться до IgM і IgG, вони міцно зв'язуються з антигеном - трепонемами, що виявляється в люмінесцентному мікроскопі за допомогою антивидової (протилюдської) флюоресцентної сироватки.
Результати РІФвраховуються за інтенсивністю свічення блідих трепонем у препараті (жовто-зелене свічення). За відсутності протитрепонемних антитіл у сироватці, бліді трепонеми не визначаються. За наявності антитіл виявляється світіння блідих трепонем, ступінь якого виражається у плюсах: 0 та 1+ - негативна реакція; від 2+ до 4+ – позитивна.
РІФ відноситься до групових трепонемних реакцій і ставиться в розведенні досліджуваної сироватки в 10 і 200 разів (РІФ-10 та РІФ-200). РІФ-10 вважається більш чутливою, проте часто випадають неспецифічні позитивні результати, ніж при постановці РІФ-200 (відрізняється вищою специфічністю). Як правило, РІФ стає позитивним раніше, ніж РВ- позитивна при первинному серонегативному сифілісі у 80% хворих, у 100% у вторинному періоді сифілісу, завжди позитивна при прихованому сифілісі та у 95-100% випадків при пізніх формах та вродженому сифілісі.
Специфіка РІФпідвищується після попередньої обробки досліджуваної сироватки сорбентом-ультраозвученим трепонемним антигеном, який зв'язує групові антитіла (РІФ - абс).
Показання до постановки РІБТ та РІФ- діагностика прихованого сифілісу на підтвердження специфічності комплексу ліпідних реакцій у разі припущення сифілітичної інфекції виходячи з позитивної РВ. Позитивні РІБТ та РІФ є доказом латентного сифілісу. При хибнопозитивної РВ при різних хворобах (системний червоний вовчак, злоякісні новоутворення та ін) і якщо повторні результати РІБТ та РІФ негативні, це свідчить про неспецифічний характер РВ. Підозра на пізні сифілітичні ураження внутрішніх органів, опорно-рухового апарату, нервової системи за наявності у хворих на негативну РВ. Підозра на первинний серонегативний сифіліс, коли у пацієнтів при багаторазових дослідженнях ерозії (виразки), що відділяється з поверхні, при пунктаті зі збільшених регіонарних лімфатичних вузлів бліда трепонема не виявляється - у цьому випадку ставиться тільки РИФ - 10.
При обстеженні осіб із негативною РВ, які мали тривалі статеві та побутові контакти з хворими на сифіліс, враховуючи ймовірну можливість лікування їх у недавньому минулому протисифілітичними препаратами, що викликали негативацію РВ. Імуноферментний аналіз (ІФА, ELISA – enzymelinked immunosorbent assay) – метод розроблений E.Engvall та співавт., S.Avrames (1971). Сутність полягає у поєднанні сифілітичного антигену, сорбованого на поверхні твердофазного носія з антитілом досліджуваної сироватки крові та виявлення специфічного комплексу антиген-антитіло за допомогою міченої ферментом антивидової імунної сироватки крові. Це дозволяє оцінювати результати ІФА візуально за ступенем зміни забарвлення субстрату під дією ферменту, що входить до складу кон'югату. Недостовірні результати ІФА можуть виникати внаслідок недостатнього розведення інгредієнтів, порушення температурного та тимчасового режимів, невідповідності рН розчинів, забруднення лабораторного посуду, неправильної техніки промивання носія.

Реакція пасивної гемаглютинації (РПГА)

Запропоновано як діагностичний тест на сифіліс T.Rathlev (1965,1967), T.Tomizawa (1966). Макромодифікація реакції називається ТРНА, мікромодифікація – МНА-ТР, автоматизований варіант – AMNA-TR, реакція з макрокапсулами з полісечовини замість еритроцитів – МСА-ТР. Чутливість і специфічність РПГА аналогічні РІБТ, РІФ, але РПГА має меншу чутливість при ранніх формах сифілісу порівняно з РІФ-абс і більшу при пізніх, при вродженому сифілісі. РПГА ставиться у якісному та кількісному варіантах.

Техніка взяття крові для серологічних реакцій

Для дослідження на РВ, РИФ, РІБТ кров беруть з ліктьової вени натще або не раніше 4 годин після їди стерильним шприцем або однією голкою (самотеком). У місці взяття шкіру попередньо обробляють 70% спиртом. Шприц та голка повинні бути промиті ізотонічним розчином хлориду натрію. У чисту суху холодну пробірку вливають 5-7 мл крові, що досліджується. На пробірку клеїться чистий папір із прізвищем, ініціалами пацієнта, номером історії хвороби чи амбулаторної карти, датою взяття крові. Після взяття крові пробірка поміщається в холодильник із температурним режимом +4°+8°С до наступного дня. Наступного дня сироватка зливається на дослідження. У разі невикористання крові на наступний день, сироватку необхідно злити зі згустку і зберігати в холодильнику не більше 1 тижня. Для дослідження на РІБТ пробірка має бути спеціально підготовлена ​​та стерильна. У разі порушення правил забору крові на дослідження недотримання умов може відбутися спотворення результатів.
Не рекомендується проводити забір крові для дослідження після їди, алкоголю, різних медикаментозних препаратів, після введення різних вакцин, під час менструального циклу у жінок.
Для дослідження на експрес-метод кров береглася з кінчика пальця, як це робиться при її взятті на ШОЕ, але беруть кров на 1 капіляр більше. Експрес-метод можна також ставити із сироваткою крові, отриманої за допомогою венопункції. Якщо виникає необхідність дослідження крові у віддалених лабораторіях, замість крові можна пересилати суху сироватку (метод сухої краплі). Для цього наступного дня після взяття крові сироватку відокремлюють від згустку і набирають у стерильний шприц у кількості 1 мл. Потім сироватку виливають у вигляді 2 окремих гуртків на смужку щільного паперу (вощаний папір або целофан) розміром 6x8 см. На вільному краї паперу пишеться прізвище, ініціали обстежуваного і дата забору крові. Папір із сироваткою захищають від прямих сонячних променів та залишають при кімнатній температурі до наступного дня. Сироватка засихає у вигляді невеликих кружальців блискучої жовтуватої склоподібної плівки. Після цього смужки паперу з висушеною сироваткою згортають як аптечний порошок і відсилають в лабораторію, вказуючи діагноз і з якою метою досліджується.

Серологічна резистентність

У частини (2% і більше) хворих на сифіліс, незважаючи на проведену повноцінну протисифілітичну терапію, спостерігається уповільнення (відсутність) негативації серологічних реакцій після закінчення лікування до 12 місяців і більше. Виникає так звана серологічна резистентність, яка останніми роками стала часто спостерігатися. Розрізняють форми серологічної резистентності:
  • Справжня(Абсолютна, безумовна) - необхідно провести додаткове протисифілітичне лікування, комбінуючи з неспецифічною терапією для підвищення імунних сил організму.
  • Відносна- після повноцінного лікування бліді трепонеми утворюють цист- або L-форми, які знаходяться в організмі в маловірулентному стані і внаслідок цього додаткове лікування не змінює показники серологічних реакцій, особливо РІФ та РІБТ.
У той самий час у цист-формах відбуваються незначні обмінні процеси, а оболонки цист-форм є чужорідним білком (антигеном). Для захисту організм виробляє специфічні антнтела, які позитивні чи різко позитивні при постановці серологічних реакцій, відсутності проявів захворювання. При L-формах обмінні процеси знижені і антигенні властивості відсутні або незначно виражені. Специфічні антитіла не виробляються або вони у невеликій кількості, серологічні реакції слабко позитивні чи негативні. Чим більший період від моменту зараження, тим більше блідих трепонем трансформується у форми виживання (цисти, суперечки, L-форми, зерна), у яких протисифілітична терапія не ефективна.

Псевдорезистентність- після проведеного лікування, незважаючи на позитивні серологічні реакції, бліда трепонема в організмі відсутня. Антигену в організмі немає, але продовжується вироблення антитіл, які фіксуються при постановці серологічних реакцій.
Серологічна резистентність може розвиватися внаслідок:

  • неповноцінного лікування без урахування давності та стадії захворювання;
  • недостатня доза і зокрема через неврахування маси тіла пацієнтів;
  • порушення інтервалу між запровадженням препаратів;
  • збереження в організмі блідих трепонем незважаючи на проведене повноцінне специфічне лікування, через їх стійкість до пеніциліну та інших хіміопрепаратів у разі наявності прихованих, осумкованих вогнищ ураження у внутрішніх органах, нервовій системі, лімфатичних вузлах, які малодоступні для антибактеріальних препаратів. у тканинах рубця через багато років після закінчення терапії, у лімфатичних вузлах іноді вдається виявити бліді трепонеми через 3-5 років після протисифілітичної терапії);
  • зниження захисних сил при різних захворюваннях та інтоксикаціях (ендокринопатії, алкоголізм, наркоманія та ін.);
  • загального виснаження (прийом їжі бідної вітамінами, білками, жирами).
Крім цього, нерідко виявляється хибна позитивація серологічних реакцій, не пов'язана з наявність у хворих на сифіліс і викликана:
  • супутніми неспецифічними захворюваннями внутрішніх органів, порушеннями серцево-судинної системи, ревматизмом, дисфункціями ендокринної та нервової систем, важкими хронічними дерматозами, злоякісними новоутвореннями;
  • ураженнями нервової системи (важкі травми, струс головного мозку, психічні травми);
  • вагітністю; хронічні інтоксикації алкоголем, нікотином наркотиками; інфекційними хворобами (малярія, туберкульоз, вірусний гепатит, дизентерія, висипний, черевний та зворотний тифи).
Зазначені чинники можуть впливати на імунологічну реактивність організму як у період активного розвитку сифілітичних проявів, і під час їх регресу.

РПГА є одним із найбільш значущих аналізів крові. Він дозволяє виявити сифіліс на будь-яких стадіях, а також низку інших захворювань. Цей аналіз вважається одним із найточніших методів виявлення збудників сифілісу. У яких випадках пацієнта можуть відправити на обстеження та що означають результати?

Що таке РПДА

РПГА є реакцією пасивної гемаглютинації, і якщо точніше - аналізом виявлення цього процесу. У ході дослідження легко можна виявити антигени блідої трепонеми, саме цей мікроорганізм провокує сифіліс. Якщо людина повністю здорова, бліда трепонема, потрапивши в організм, провокує реакцію у відповідь з боку імунної системи - вироблення особливих антитіл. За їх наявністю і визначається, чи є захворювання чи ні.

Усі лабораторні дослідження на сифіліс поділяються на два типи:

  • специфічні;
  • неспецифічні.

Все залежить від того, які саме антитіла є в крові. РПГА відносять до специфічного типу аналізу виявлення збудників сифілісу. Вперше такі дослідження стали проводити у 1965 році, РПГА виявився настільки точним аналізом, що швидко став найбільш популярним серед решти методик діагностики сифілісу. Дослідження дозволяє виявити хворобу на будь-якій стадії, включаючи латентну.

Однак у деяких випадках РПГА може дати хибну позитивну реакцію. Це може статися через наявність деяких вірусних захворювань або за зниженого імунітету після будь-якої хвороби.

Наскільки аналіз достовірний?

Якщо людина заразилася сифіліс, виявити хворобу можна не раніше ніж через 2-4 тижні - тільки на цьому терміні починають вироблятися антитіла до збудника. Іноді інкубаційний період може тривати більше місяця. РПГА, аналіз крові при ранній діагностиці має точність 86%. Початкова стадія захворювання "найвловніша" для цього типу дослідження. А ось на наступних стадіях сифілісу та у носіїв латентного вірусу, точність діагностики підвищується до 99-100%.

Це дозволяє застосовувати РПГА як додаткове дослідження для підтвердження вже наявного діагнозу або за позитивних результатів інших аналізів (нетрепонемного типу). РПГА все частіше використовують для скринінгу, але за позитивних результатів так чи інакше проводять ще одне специфічне дослідження.

Хто в зоні ризику

Для проведення РПГА потрібен направлення від лікаря. Направити пацієнта на аналіз можуть у кількох випадках:

  1. Якщо є видимі ознаки хвороби. Сюди відносяться виразки на шкірі, збільшені лімфовузли, часткове облисіння волосяного покриву та ін.
  2. Якщо у пацієнта був прямий контакт з хворими на сифіліс, для профілактики йому також необхідно пройти обстеження.
  3. Усі донори, які здають кров, повинні перевірятися на сифіліс перед процедурою.
  4. Для оформлення санітарної книжки або щорічних профоглядів на підприємствах також потрібно буде пройти необхідні обстеження.
  5. Якщо скринінг дав позитивний результат.
  6. На сифіліс перевіряють кожного, кого готують до госпіталізації до стаціонару.
  7. Обстеження пацієнта перед будь-якою операцією також потребує проходження обстеження.

Лікар може призначити РПГА не лише при підозрі на сифіліс або для планового огляду, але й для діагностики наступних захворювань:

  • дифтерії;
  • дизентерії;
  • сальмонельозу.

Як проводиться аналіз

Для проведення РПГА береться кров із вени, отриманий зразок відправляють на дослідження. Щоб результати були максимально точними і не спотвореними, важливо правильно підготуватися до процедури. Щоб не довелося здавати кров наново, необхідно керуватися такими правилами перед візитом до фахівця:

  1. Кров здається рано-вранці до 8-10 годин.
  2. Не можна снідати, пити чай чи каву, допустиме лише вживання невеликої кількості води. Бажано, щоб останній прийом їжі був за 10-12 годин до аналізу.
  3. Хоча б за півгодини до обстеження не можна курити, але найкраще зробити перерву між сигаретами о 4-6 годині.
  4. У день аналізу та мінімум за добу до нього не можна пити алкогольні напої будь-якої фортеці.
  5. Якщо є необхідність за графіком приймати ліки, про це обов'язково потрібно сказати лікареві, якщо немає можливості трохи перенести це за часом.
  6. При поганому самопочутті чи слабкості потрібно обов'язково попередити медсестру, яка забирає кров для аналізу чи лікаря.

Кров із вени на РПГА

До підготовки важливо відноситися відповідально, оскільки від результатів аналізу залежить багато чого, особливо точна постановка діагнозу.

Помилки в діагностиці та призначення невірного лікування можуть призвести до плачевних наслідків.

Коли чекати на результати

Щоб РПГА аналіз нарешті дав позитивну або негативну реакцію на сифіліс, має пройти певний час. Позитивна реакція може виявитися через місяць після зараження, проте на первинній стадії показники титрів одні з найнижчих – менше 1:320. На вторинній стадії показники збільшуються, а при латентному сифілісі аналізи будуть такими ж, як і на самому початку розвитку захворювання.

Коли точно визначено стадію сифілісу, призначається лікування у вигляді курсу препаратів. Але навіть після лікування від захворювання, аналізи РПГА можуть давати позитивні результати на сифіліс. Це трапляється в більшості випадків, позитивний аналіз у людей, які вилікувалися від сифілісу, може бути протягом всього життя.

Існують випадки, коли позитивні реакції на сифіліс викликані зовсім іншими причинами. Такі результати аналізу називають хибнопозитивними, найчастіше такі реакції бувають:

  • у вагітних;
  • під час менструації;
  • якщо нещодавно була вакцинація;
  • якщо був інфаркт міокарда незадовго до обстеження;
  • при інфекційних захворюваннях (віспа, грип, ГРВІ, ВІЛ, гепатит (вірусний) та ін.);
  • при онкології;
  • при ослабленні імунітету;
  • у хворих із патологіями внутрішніх органів.

Дослідження РПГА для діагностики інших інфекцій

Реакція РПГА дозволяє виявити не лише сифіліс, а й низку інших інфекційних захворювань. Здавати кров знадобиться, наприклад, людям із підозрами на гостру кишкову інфекцію (сальмонельоз).

Хворобу провокують сальмонели, які у організм людини. У міру розвитку сальмонельозу поступово руйнується структура шлунково-кишкового тракту, а також відбувається сильна інтоксикація. Основними симптомами кишкової інфекції є:

  • блювання;
  • діарея;
  • зміна запаху випорожнень, а також поява в ньому слизу або кривавих виділень;
  • біль в животі;
  • висока температура;
  • озноб;
  • погане самопочуття;
  • зневоднення та ін.

Ще одним захворюванням, виявлення якого можна застосовувати РПГА, є кір. Вона характеризується ураженнями слизових ока, ротової порожнини та дихальних шляхів. Крім цього явними ознаками хвороби є висипи на всьому тілі пацієнта, а також сильна інтоксикація. Остання супроводжується блюванням, порушеннями випорожнень, порушенням водного балансу в організмі та ін.

Дослідження РПГА також може виявити правець, який є гострою інфекцією.

Збудник цього захворювання легко проникає в організм через подряпини, рани, порізи, опіки та ін. Також можна заразитися правцем, якщо в лікарнях або при косметичних процедурах використовувалися нестерильні інструменти та матеріали. Головними симптомами, за якими можна виявити правець, є:

  • тонус м'язів;
  • слабкість;
  • дратівливість;
  • поганий апетит;
  • апатія;
  • судоми у м'язах обличчя;
  • якщо правець наслідок травми, може відчуватися тягне навколо пошкодженої ділянки тіла;
  • утруднюється ковтання води та їжі.

Дослідження РПГА також застосовується для виявлення кашлюку на будь-якій стадії. Це дуже важливо, оскільки на початковій стадії захворювання немає чітких симптомів, що дозволяють його діагностувати. Підозри на інфекцію найчастіше з'являються на більш пізніх стадіях.

При кашлюку може бути підвищена температура, проте так само вона може залишатися в межах норми і не перевищувати стандартні 36,6. Пізніше у хворого з'являється кашель, напади якого поступово стають дедалі частіше.

Отже, реакція пасивної гемаглютинації є дуже ефективним методом діагностики сифілісу. Незважаючи на те, що найчастіше РПГА використовують для виявлення антитіл блідої трепонеми, за допомогою цього аналізу можна встановити наявність та інших інфекцій - кору, кашлюку, сальмонельозу та ін. Щоб результати дослідження були максимально чіткими, важливо правильно до них готуватися і дотримуватися всіх необхідних умови.

Наразі для проведення РПДА користуються стандартизованими тест-наборами.

Вони є все необхідне для аналізів:

  • Флакон з еритроцитами, які містять на поверхні антигени блідої трепонеми штаму Nichols.
  • Така ж ємність, але вже з чистими червоними кров'яними тільцями (потрібні для контролю).
  • Буферний розчин для розведення сироватки пацієнта (нижче розкажемо, навіщо це роблять).
  • Сироватка від людини, свідомо хворої на сифіліс, теж використовується для контролю (К+).
  • Сироватка від свідомо здорової людини (К-).
  • Пластикова планшетка з пронумерованими луночками для змішування зразків та оцінки результатів.

Кожен тест набір містить запас реактивів для встановлення певної кількості проб. Зазвичай – 100. Тому сироватку іноді зберігають, доки набереться необхідну кількість зразків на дослідження.

Методика проведення аналізу РПДА

Реакція пасивної гемаглютинації може надати два типи результатів:

  • Якісний.Відповідає питання, чи є у досліджуваному зразку антитіла до збудника.
  • Кількісний.Дозволяє оцінити інтенсивність синтезу імуноглобулінів і в такий спосіб відстежити активність інфекції.

Як правило, спочатку проводиться якісна оцінка, а позитивні зразки відбираються кількісних досліджень.

Алгоритм простого виявлення інфікованості такий:

  • У лунки планшета вносяться однакові дози досліджуваних зразків. На одного пацієнта виділяється ряд із шести лунок.
  • У перші дві капають його плазму, розведену буфером 1:20.
  • Наступна пара служить контролю, у ній поміщають сироватку До+. І ще дві лунки для матеріалу К-.
  • Потім вносять мічені антигеном еритроцити першу лунку з кожної пари. По-друге – еритроцити чисті.
  • Планшет деякий час похитують для ретельного перемішування реактивів і дають спокій. Мінімум – 45 хвилин. Можна і всю ніч.

Результати оцінюються візуально. Якщо реакція негативна, еритроцити осідають на дно сферичного заглиблення лунки.

Це має статися в обох лунках із зразками пацієнта і там, куди було додано чисті контрольні еритроцити тест-системи.

При позитивному результаті еритроцити не збираються в одному місці, а рівномірно розподілені по всьому дну лунки. Подібна картина має бути там, де мічені стандартним антигеном еритроцити змішуються із зразком хворого та сироваткою К+. Таким чином, проводиться контроль реакції, що дозволяє уникнути помилкових результатів.

Кількісна оцінка РПДА

Зразки з позитивним результатом відбирають і кілька разів буферним розчином розводять (титрують). Перед кожним розведенням сироватку капають у відповідну лунку планшета і відзначають над нею ступінь сумарного розведення. Потім до зразків додають еритроцити з трепонеми антигеном і визначають, при якому титрі ще відзначається позитивний результат. Це кількісний аналіз крові на сифіліс РПГА, він показує концентрацію антитіл до збудника.

Результати оцінюють так:

  • 4+ означає, що еритроцити вистилають дно лунки рівномірним шаром. Поява складчастості краю говорить про високі концентрації антитіл у досліджуваному зразку. Реакція є позитивною.
  • 3+ ставлять, якщо коло чітке, але частина еритроцитів «стікає» до центру. Картина нагадує розправлену парасольку, що розцінюється як позитивна реакція.

  • 2+ виглядає як широке кільце з тенденцією до просвітлення у центрі. Слабкопозитивна.
  • 1+ означає сумнівний результат. У лунці – вузьке колечко. Потребує повтору через 1-2 тижні.
  • При негативному аналізі, еритроцити формують ґудзик у центрі лунки.

Є, щоправда, серорезистентні випадки сифілісу, у яких хвороби вже начебто немає, а антитіла зберігаються тривалий час. Тому РПГА іноді потребує підтвердження іншими методами.

При необхідності здати РПГА та пройти будь-яке обстеження на сифіліс, звертайтеся до грамотних венерологів.