Тест статевого хроматину та його застосування. Практичне значення тесту статевого хроматину. Визначення Х- та Y-хроматину

1. Вступ ………………………………………………………………………………………………………………………2

2. Дослідження «статевого хроматину» …………………………………….…………………………………2

3. Значення для медицини……………………………………………………………………………………………..6

4. Висновок.………………………………………………………………………………………………….…………………… .6

5. Список літератури………………………………….……………………………………………………………………6

1. Введення:

Хроматин статевий - невелике тільце, розташоване на периферії ядра соматичної клітини; має трикутну, округлу або паличкоподібну форму; Розмір 0,7-1,2 мк (рис. 1). Ядра всіх клітин організму людини, крім статевих, мають 23 пари хромосом. З них 22 пари – це аутосоми (хромосоми з 1 по 22), які «працюють» лише попарно. І останні дві пари хромосом - "статеві": X і Y. Загальний набір хромосом клітини називається: каріотип. У нормі у жінок каріотип – 46, ХХ, у чоловіків – 46, XY. У кожній парі хромосом гомологічні ділянки перебувають у двох станах – активному (експресія гена) та неактивному. Цей механізм регулюється особливими генами-модифікаторами, а також механізмом геномного імпринтингу (або успадкування схеми експресії генів хромосоми одного з батьків).

«Статеві» хромосоми - Х і Y: «індивідуалісти», т.к. вони повністю активовані і для нормального функціонування клітини потрібні в однині. Якщо є дві Х-хромосоми (жінка в нормі), одна з них повністю інактивується. За рахунок механізмів клітинної саморегуляції інактивується "найгірша" хромосома. Цим пояснюється, що жінки практично не хворіють на Х-зчеплені спадкові захворювання. На відміну від інших хромосом в інтерфазному періоді (тобто коли клітина не ділиться), "зайва" Х - хромосома знаходиться в ядрі в конденсованому стані. При особливому способі фарбування конденсований стан хромосоми у вигляді глибок можна виявити при мікроскопії (відкриті 1949 англійськими дослідниками М. Барром і Л. Бертрамом). Ці брили отримали назву «статевий хроматин», «Х-хроматин» або «тільця Барра». Число ядер з Х-хроматином залежить від інтенсивності розмноження клітин у даній тканині та від гормонального стану організму. У нормі у жінок 10-30% клітинних ядер мають тільце Барра, у чоловіків у нормі вони відсутні. Число тілець в одному ядрі залежить від кількості інактивованих Х-хромосом. Якщо каріотип має додаткові Х-хромосоми, число тілець Барра відповідає числу Х-хромосом ядра мінус одна (активна). І тут кількість ядер з статевим хроматином також збільшується (50% і більше).

рис.1. Ядра містять статевий хроматин 1

2. Дослідження «статевого хроматину»

Найбільш простим і широко використовується методом є цитологічне дослідження статевого хроматину в клітинах епітелію порожнини рота. Взявши металевим шпателем зішкріб зі слизової оболонки ротової порожнини, з отриманого матеріалу готують мазок, який фіксують у спирті або в суміші спирту з ефіром. Препарат фарбують гематоксиліном та еозином та переглядають під мікроскопом за допомогою імерсійного об'єктива. У препаратах мазків із порожнини рота чоловіків статевий хроматин зустрічається лише у 0,5–0,7% клітинних ядер; у жінок цей відсоток дорівнює 40-60.

Мал. 3. Механізм запліднення та детермінації статі (Е.Тетеру). а – детермінація жіночої статі; б – детермінація чоловічої статі; 1 – яйцеклітина; 2 – зародки жіночої та чоловічої статі; 3 – наявність статевого хроматину (рис. а) та відсутність його (рис. б)

Для отримання безпомилкових результатів визначення статевого хроматину в ряді лабораторій вдаються до складнішої методики забарвлення, використовуючи розчин тіоніну. За такої більш тривалої і кропіткої роботи виходять хороші результати. Хромосоми X у ряді клітин зародка з каріотипом 45/Х0, що відповідає так званому синдрому Шерешевського – Тернера ці клітини втрачають життєздатність, і відмирання частини їх під час зародкового життя призводить до виникнення соматостатевих аномалій, що часто спостерігаються при цьому синдромі (низький). складки на шиї та ін.).

Мал. 4. Різні картини статевого хроматину в мазках, взятих із ротової порожнини

Мал. 5. Різні локалізації "барабанних паличок" у ядрах нейтрофільних лейкоцитів (за Е. Тетером).

При фарбуванні ядра клітин забарвлюються в зелений колір, причому структура їх стає дуже чіткою і різко виділяється статевий хроматин, наявність якого вдається встановити легко (рис. 4). Можливе визначення статевого хроматину та в мазках крові, взятої уколом з м'якоті пальця. Висушений мазок забарвлюють реактивом Май-Грюнвальда або фарбою Гімза; потім, промив водою, його висушують при кімнатній температурі. Препарати вивчають за допомогою імерсії при 750-1500-кратному збільшенні. Для встановлення статевого хроматину необхідно переглянути 500 нейтрофілів; у чоловіків не більше ніж 6 лейкоцитів мають додаткові часточки (завбільшки до 1,5 мкм), пов'язані з рештою маси клітинного ядра ниточкою каріоплазми. У осіб генетично жіночої статі на 250 переглянутих лейкоцитів виявляється принаймні 6 або значно більше клітин з додатковими часточками, що нагадують «барабанні палички». Форми ядерних відростків, які у нейтрофильных лейкоцитах, прийнято ділити втричі групи (рис. 5). Група А – «барабанні палички», що мають вигляд маленьких грушоподібних відростків, прикріплених до одного з сегментів ядра лейкоциту топкою, але чітко вираженою ниточкою. Вони мають постійну величину і форму і характерні в основному для генетично жіночої статі. Група відрізняється мінливістю форми відростків, відшнурованих від ядра нейтро-філа; Іноді їх буває дещо в одному лейкоциті і зовні вони менш схожі на типові «барабанні палички». Хоча ця група зустрічається в осіб обох статей, вона найчастіше виявляється у особин чоловічої статі. Група С - "псевдобарабанні палички" - мають округлу або овальну форму, нерівномірно забарвлюються; поверхня їх нерідко складчаста, вони з'єднуються з масою лейкоциту товстою ніжкою. Група С зустрічається в осіб обох статей, частіше у чоловіків. Справжній жіночий хроматин є набряклою глибкою, сполученою з одним із сегментів лейкоциту дуже тонкою ніжкою. Встановлена наявність статевого хроматину загалом вважається ознакою жіночої статі. В даний час тільця Барра розглядаються як результат спіралізації однієї з двох Х-хромосом, властивих жінці. Ця спіралізація, що відбувається в клітинах поза мітозом, веде до генетичної інактивації статевої хромосоми. Оскільки єдина у чоловіків Х-хромосома не спіралізується, вони зазвичай тільця Барра відсутні. Вони відсутні також у жінок із патологічним набором хромосом ХО. Однак спостерігаються вроджені аномалії статі, які характеризуються відсутністю у жінок статевого хроматину, але наявністю в ядрах клітин мозаїки, коли частина ядер клітин містить лише одну Х-хромосому, інша має ХУ-хромосоми. Припускають, що така мозаїка є наслідком втрати У-хромосоми однією з клітин чоловічого зародка на ранніх стадіях його розвитку. У подібних випадках, хоча зовнішні та внутрішні статеві органи побудовані за жіночим типом, при чревосіченні на одній стороні виявляють рудименти гонади, а на іншій – неповноцінний яєчник, в якому при скупченні клітин Лейдіга відсутній сперматогенез. Наявність піхви, матки, яйцеводів свідчить, що єдина гонада-насінник – не виділяла достатньої кількості індукторів, які б забезпечити повну регресію дериватів мюллерових каналів і маскулінізацію статевих шляхів, у результаті і розвинулася жіноча статева система. Колишній погляд, згідно з яким для утворення статевого хроматину необхідні дві хромосоми X, переглянувся і не знайшов підтвердження. У жінок з каріотипом 47/XXX при дослідженні статевого хроматину було виявлено два тільця Барра; при хромосомному наборі 48/ХХХ було встановлено наявність трьох глибок статевого хроматину. У світлі цих даних в даний час прийнято за правило, що кількість тілець Барра, що знаходиться в кожній клітині, визначається за правилом п - 1, тобто дорівнює кількості знайдених в ньому статевих хромосом мінус 1 (рис. 6).

Мал. 6. Порівняльні дослідження статевого хроматину та хромосомного набору (кожному типу ядерного хроматину відповідають дві та більше комбінації статевих гетерохромосом (за Е. Тетером).

Втім, трапляються винятки. Так, при дослідженні плодів з поліплоїдною кількістю хромосом за наявності в одній клітині до 6 хромосом X визначали лише одне тільце Барра. За наявності у жінок в нормі двох Х-хромосом (однієї батьківського і однієї материнського походження) інак-тивнуватися може то одна, то інша. Вказана спіралізація та деспіралізація статевої хромосоми є одним із проявів загальної здатності соматичних клітин активувати або інактивувати окремі гени або комплекси генів, розташовані в одній хромосомі, що відіграє важливу роль у здійсненні процесу розвитку та диференціювання клітин. Слід пам'ятати, що особи чоловічої статі можуть мати хромосоми ХХУ, і в таких випадках у клітинах їх тканин можливе визначення статевого хроматину, що ще не дозволяє розглядати їх як представників жіночої статі. У той самий час відсутність статевого хроматину ще є доказом наявності статевих хромосом чоловічого типу (XY) оскільки при дисгенезії гонад склад хромосом то, можливо ХО, і тоді клітинах тканин немає жіночого ядерного хроматину (рис. 7, а, б). Тому в даний час застосовується наступна термінологія: 1. У обстежуваної особи є позитивний тип ядерного хроматину (тобто в клітинах тканин виявляються характерні тільця Барра); 2. У обстежуваної особи негативний. Іноді вдається диференціювати хромосоми, морфологічне відокремлення яких інколи дуже важко. Слід також згадати про електронно-мікроскопічному вивченні хромосом людини. Зважаючи на величезне збільшення числа досліджень з використанням вищевказаних технічних методів та значної кількості індивідуальних номенклатур ряду авторів стала необхідною розробка єдиної номенклатури хромосомного набору, що було зроблено на конференції цитогенетиків у Денвері.

Мал. 7 Патологічний результат запліднення, зумовлений явищем нероздільності про 1 – на прикладі синдрому Шерешевського – Тернера; б - на прикладі синдрому Клейнфельтера,

Тип ядерного хроматину (якщо принаймні 40–60% клітин його тканин немає тілець Барра). Не слід, проте, забувати, як і в осіб із чоловічим типом статевих хромосом можлива наявність статевого хроматину в 0,5–0,7% випадків. Серед новонароджених хлопчиків число хроматин-позитивних становить у середньому 1,7 на 1000. Кількість хроматин-негативних дівчаток становить 0,3 на 1000. На 1000 новонароджених жіночої статі припадає один випадок із каріотипом 47 XXX (так звані наджінки).

3. Значення для медицини

Визначення статевого хроматину використовується для діагностики хромосомних захворювань, зокрема при підозрі на хромосомні порушення, пов'язані зі статевими хромосомами. Найбільш об'єктами дослідження є слизова оболонка щоки, рідше піхви, клітини волосяних фолікулів, околоплодных вод (для пренатальної діагностики статі плода). При порушеннях статевого розвитку, пов'язаних із збільшенням числа статевих хромосом, виявляється додатковий статевий хроматин. Так, при каріотипі 47, XXX в клітинах жінок виявляються два, а при каріотипі 48, XXXY - три Х-хроматину; при каріотипі 47, XYY - два Y-хроматини. За наявності хроматину статевого може бути визначена генетична стать дитини, що знаходить практичне застосування при діагностиці різноманітних клінічних форм дисгенезії гонад, гермафродитизму, в судово-медичній практиці.

4. Висновок

Необхідно пам'ятати, що статевий хроматин-динамічна структура, що змінюється в залежності від метаболізму клітини та загального стану організму. Не рекомендується досліджувати статевий хроматин у першу добу після народження, під час прийому гормональних препаратів, антибіотиків та деяких інших сильнодіючих лікарських засобів. Дослідження статевого хроматину необхідне при діагностиці аномалій будови зовнішніх геніталій і статевого розвитку, при первинній аменореї, особливо в поєднанні з низьким зростанням (у дівчаток), і при високому євнухоїдному зростанні в поєднанні з гіпогонадизмом (у хлопчиків).

5. Список літератури

1) Пренатальна діагностика >> Дослідження статевого хроматину (http://www.malanova.ru/showMatherial.php?dealWithArticle&id=113) 2) Підлоговий хроматин (http://www.medkursor.ru/seksualnoe_zdorove/violation/maturity/4829 .htm) 3) Підлоговий хроматин (http://ginekolog.my1.ru/publ/ginekolog/genetika_v_ginekologii/polovoj_khromatin/22-1-0-189) 4) Хроматин статевий (http://cureplant.ru/index.php /medicinska-enciklopedia/1607-hromatin-polovoj)

ПІДЛОМИЙ ХРОМАТИН- ділянка ядра соматичної клітини, що знаходиться в інтерфазі, що являє собою конденсовану статеву хромосому; в результаті конденсації Х-хромосоми утворюється X-хроматин, а конденсації Y-хромосоми – Y-хроматин. У людей із нормальним складом хромосом (див. Каріотип) у соматичних клітинах жінок міститься X-хроматин, а в соматичних клітинах чоловіків – Y-хроматин. За наявністю цих утворень може бути визначена генетична стать індивіда (див. стать), що знаходить практичне застосування при діагностиці різноманітних клин, форм тестикулярної та оваріальної дисгенезії (див. Дисгенезія гонад), орієнтовному дослідженні індивідів на помилковий - псевдогермафродітізм (див.) гермафродитизм (див.), до суд.-мед. практиці тощо.

X-хроматин (так зв. тільце Барра) як специфічний для жіночої статі цитол, ознака вперше був описаний Барром (М. Barr) та Бертрамом (E. G. Bertram) у 1949 р.; одна з двох X-хромосом у ранньому ембріогенезі генетично інактивується (гетерохроматинізується) і залишається конденсованою протягом усього інтерфазного періоду життя соматичної клітини. Деконденсація гетерохроматинізованої X-хромосоми в соматичній клітині не означає її генетичної активації. Друга Х-хромосома в жіночій клітині та Х-хромосома в чоловічій соматичній клітині не утворюють X-хроматину. Y-хроматин формується за рахунок частини довгого плеча Y-хромосоми; він складається з гетерохроматину, що конденсується в інтерфазному ядрі та здатного інтенсивно флюоресціювати після фарбування акрихіном та іншими флюорохромами (див.). Тест з флюорохромами для визначення статевої приналежності клітин Y-хроматину був вперше запропонований Касперссоном (Т. Caspersson) в 1970 р.

При визначенні генетичної статі індивіда клітини його досліджують як на Х-, так і на Y-хроматин. Для цього отримують клітинний матеріал (джерелом його можуть бути найрізноманітніші тканини, хоча переважно ті, для яких не потрібно попереднього культивування in vitro; для визначення X-хроматину найчастіше використовують мазки зі слизової оболонки щоки, рідше слизової оболонки піхви, а також клітини волосяних фолікулів, для пренатальної діагностики статі плода використовують амніотичні клітини.Вміст Y-хроматину, крім перерахованих тканин, можна визначати також у сперматозоїдах. лімфоцитах крові добре виявляється Y-хроматин.Фіксацію препаратів проводять до їх підсушування на повітрі, зазвичай фіксують метанолом або сумішшю етанолу і оцтової к-ти (у співвідношенні 3:1) або тільки етанолом. X-хроматин краще виявляється при фарбуванні препаратів основними нефлюоресцентними барвниками: основним фуксином, тіоніном, ацетоорсеїном, толуїдиновим синім та ін. Y-хроматин виявляють при фарбуванні препаратів флюорохромами - похідними помаранчевого акридинового: акрихіном, акрихін-іпритом, акрихін-пропілом. Препарати укладають у спеціальний буферний розчин і вивчають в ультрафіолетовому світлі за допомогою люмінесцентного мікроскопа (див.). Аналіз проводять на роз'єднаних, розпластаних клітинах. Зрізи тканин визначення П. х. використовують лише тоді, коли неможливо отримати мазки чи препарати-відбитки зрізу органу.

Тільце Барра в нормальній диплоїдній клітині має форму трикутника, круглого або навіть паличкоподібного утворення, середній лінійний розмір якого 1 мкм. Дуже часто тільце Барра знаходиться на периферії ядра і нерідко стикається з ядерною оболонкою. Розмір, форма, положення в ядрі та щільне фарбування дозволяють відрізняти X-хроматин від глибок конденсованого хроматину інших хромосом. Частота, з якою X-хроматин зустрічається в клітинах, залежить від стану організму (гормональний статус, фізичне навантаження та ін.) * Вона низька у новонароджених дівчаток в перші 2-3 дні життя. У статевозрілої жінки частота народження X-хроматину коливається в різні періоди менструального циклу, різна в різних тканинах і ніколи не досягає 100%. У клітинах слизової оболонки щоки X-хроматин виявляється в 25-60% клітин, в фібробластах, що культивуються in vitro - в 40-80% клітин, в некультивованих амніотичних клітинах приблизно в 5% клітин. У гранулоцитах X-хроматин має вигляд барабанної палички; низька частота виявлення (1,5-5%) та труднощі диференціювання цієї освіти з іншими ядерними структурами обмежили практичне поширення цього тесту. У поліплоїдних клітинах число тілець Барра кратне числу диплоїдних наборів хромосом. У чоловіків цитологічно подібні до X-хроматину глибини хроматину виявляються приблизно в 1% клітин.

Розміри Y-хроматину в нормальних диплоїдних клітинах у різних індивідів сильно різняться, що пов'язано з великими коливаннями довжини самої Y-хромосоми. При діагностиці статі по Y-хроматину слід пам'ятати, що зустрічаються індивіди або з незначною кількістю гетерохроматину в Y-xpo-мосомі або зовсім позбавлені гетерохроматину, і невиявлення Y-хроматину у таких осіб не є фактом, що заперечує їхню приналежність до чоловічої статі. У більшості чоловіків Y-хроматин виглядає порівняно великим (0,3-1 мкм), яскраво світиться (тільцем) зазвичай округлої форми; в окремих клітинах він може мати подвійну структуру або дещо дифузним. На периферії клітинного ядра Y-тільце розташовується рідше ніж тільце Барра. У ядрі присутні яскраво світяться глибки хроматину інших хромосом, відрізнити які від Y-тельця зазвичай неважко. Частота народження Y-хроматину значно різниться у різних тканинах. У клітинах слизової оболонки щоки він виявляється у 20-80% клітин, у клітинах волосяного фолікула у 70-90%, у лімфоцитах периферичної крові у 60-87% клітин. Подібні з Y-тільцем флюоресцентні тільця в клітинах жінки (аутосомний гетерохроматин) зустрічаються приблизно в 5% клітин. У жінок, вагітних плодом чоловічої статі, клітини останньої можуть проникати у кров'яне русло матері. Вони виявляються за наявності в них Y-хроматину. Для визначення генетичної статі Y-хроматину рекомендується переглянути не менше 50 клітин.

Практичне застосування тесту на П. х. подвійно. Цей тест використовується для визначення статі індивіда за його клітинами, коли сам індивід недоступний для дослідження (пренатальна діагностика статі плода, суд.-мед. експертиза і т. п.), або в тих випадках, коли проводиться масова перевірка відповідності фенотипного (паспортного ) статі генетичної (напр., при обстеженні жінок на спортивних змаганнях). Визначення статі плода внутрішньоутробно проводять при підозрі на спадкову хворобу, зчеплену зі статтю (гемофілія, деякі форми м'язової дистрофії та ін), з метою запобігання народження невиліковно хворої дитини.

При обстеженні пацієнтів із клин. проявами порушення статевої диференціювання та інших випадках, коли необхідно точний опис стану статевих хромосом, незалежно від результатів аналізу на П. х. вдаються до хромосомного аналізу (див. Хромосоми).

Особливо часто визначення П. х. використовується для попередньої діагностики відхилень у чи структурі статевих хромосом, коли у досліджуваного є порушення статевого розвитку. Простота та швидкість виконання дозволяють застосовувати тест на П. х. при масовому обстеженні новонароджених та інших дітей для виявлення аномалій статевих хромосом. Кінцевий діагноз ставлять після вивчення хромосомного набору (див.). Відхилення в системі статевих хромосом у бік зменшення кількості їх матеріалу, сумісні з життєздатністю індивіда, відбуваються за рахунок гетерохроматинізованої Х-хромосоми і гетерохроматинової частини Y-хромосоми і тому можуть бути встановлені шляхом аналізу статевого хроматину. Відсутність X-хроматину в клітинах пацієнта з жіночим фенотипом спостерігається при повній агенезії гонад при синдромі Шерешевського - Тернера з формулою каріотипу 45,X або у осіб з каріотипом 46,XY при тестикулярній фемінізації (див.) і при хромі -тин-негативної формі дисгенезії гонад. При дисгенезії яєчників хромосомного генезу частота народження та розміри тільця Барра залежать від характеру відхилень у Х-хромосомі і корелюють з клин. поліморфізм хвороби. Тільце Барра може мати нормальну величину, але виявлятися рідко або навіть зовсім бути відсутнім в окремих тканинах (мозаїчна форма синдрому Шерешевського – Тернера, формула каріотипу зазвичай 46, XX/45, X); воно може бути зменшеним у порівнянні з нормою (делеція короткого або довгого плеча Х-хромосоми, кільцева Х-хромосома) або, навпаки, збільшеним (довго плече Х-ізохромосоми). Різноманітні клин, форми тестикулярної дисгенезії корелюють з характером відхилень у Y-хромосомі та мають різну картину Y-хроматину: від його відсутності або низького вмісту (мозаїцизм з формулою каріотипу 46,XY/45,X) до змін у величині та формі (делеції довгого плеча ізохромосоми, дицентричні хромосоми). Дослідження П. х. при різних формах істинного і помилкового гермафродитизму проводяться тільки як орієнтовні, за якими має слідувати ретельне дослідження хромосомних наборів.

При порушеннях статевого розвитку, пов'язаних із збільшенням числа X-хромосом, у клітинах пацієнток виявляються додаткові тільця Барра. Їх число визначається формулою n – 1, де n – загальна кількість X-хромосом у індивіда. Так, при каріотипі 47,XXX в клітинах жінки виявляються два тільця Барра, при каріотипі 48,ХХХХ - три тільця Барра. Додаткові Y-хромосоми проявляють себе появою в клітині додаткових тілець Y (при каріотипі 47, XYY - два Y-тільця, при каріотипі 48, XYYY - три Y-тільця). При синдромі Клайнфелтера (див. Клайнфелтера синдром), коли Каріотип пацієнта включає дві або більше Х-хромосоми і одну або більше Y-хромосому, в соматичних клітинах одночасно містяться X- і Y-хроматин (по одному тільцю кожного при формі синдрому, що найчастіше зустрічається) з формулою каріотипу 47, XXY).

Статевий хроматин у судово-медичному відношенні

Дослідження П. х. до суд.-мед. практиці проводиться з метою встановлення статевої належності слідів крові, слини та інших біол, рідин, вирваного волосся, слідів-відбитків клітин тканин та органів, шматочків тканин, які можуть бути виявлені на місці події, на різних предметах, одязі, тілі потерпілого та підозрюваного у скоєнні злочину, на знаряддях травми, на транспортних засобах, і навіть при виявленні обгорілих трупів чи частин розчленованих трупів. Рідше П. х. досліджують із метою суд.-мед. встановлення генетичної статі в осіб із аномаліями статевого розвитку, використовуючи загальноприйняті методики.

Для приготування препаратів зі слідів крові і слини шматочки предмета-носія поміщають у пробірку і заливають 0,5-40% (сліди крові) або 5-10% (сліди слини) оцтовою до-тою. Екстрагують при кімнатній температурі протягом декількох годин і, видаливши шматочки предмета-носія, центрифугують. Осад переносять на предметне скло та висушують на повітрі. З плям крові на предметах, що не вбирають рідину (метал, скло, пластмаса та ін), роблять зіскрібки, які потім обробляють таким же чином.

При дослідженні волосся корінь волосся поміщають на предметне скло і додають 10-25% оцтову до-ту. Після набухання відокремлюють і подрібнюють волосяний фолікул, видаляючи інші частини волосся.

З шматочків тканин п органів, при необхідності попередньо витримавши їх до набухання в оцтовій к-ті відповідної концентрації або у фізіол, розчині, готують гістол, препарати, мазки або препарати-відбитки. Сліди-накладання клітин, тканин чи органів на знаряддях травми змивають фізіол, розчином, одночасно зіскоблюючи їх. Дрібні шматочки тканин, які у таких слідах, подрібнюють препаровальними голками. Змив-соско-би поміщають у пробірки, центрифугують, з осаду готують гістол, препарати. Дослідження препаратів доцільно починати з виявлення Y-хроматину, тому що за його відсутності ті ж препарати можуть бути використані для виявлення X-хроматину. При дослідженні враховують лише досить добре збереглися непошкоджені ядра клітин. При аналізі слідів крові Y-хроматин визначають у ядрах лімфоцитів, тому що в нейтрофілах Y-хроматин у препаратах зі слідів крові чоловіків може не виявлятися.

За відсутності підвищеної вологості П. х. може довго зберігатися у висохлих слідах, а також у клітинах фолікула вирваного волосся. Висока температура (вище 150 °) руйнує ядра клітин і П. х. Значна вологість протягом кількох діб також призводить до руйнування клітин, що унеможливлює виявлення статевого хроматину. Т. до. умови, в яких брало знаходяться сліди, можуть послідовно змінюватися, вирішальне значення для встановлення придатності слідів крові, слини і т. д. для визначення П. х. має стан клітин, що виявляються в них, і їх ядер. У клітинах висохлих шматочків тканин, що не піддаються дії вологи, П. х. зберігається тривалий час. У цілих трупах та їх великих частинах у процесі аутолізу і гниття протягом кількох діб відбувається деструкція клітинних ядер. У обгорілих трупах статевий хроматин деякий час може зберігатися в клітинах глибоко розташованих органів і тканин.

При виявленні невеликого числа клітин, що зберегли ядра, що досліджуються на П. х., з метою встановлення статистичної достовірності результатів використовують різні математичні методи аналізу, що враховують як загальну кількість виявлених клітин, так і кількість клітин. містять X- або Y-хроматин.

Бібліографія:Давиденкова Е. Ф., Берлінська Д. К. і Тисяч-н ю до С. Ф. Клінічні синдроми при аномаліях статевих хромосом, JI., 1973; Захаров А. Ф. Хромосоми людини, М., 1977; Капустін А. Ст Судово-медична діагностика статі за статевими відмінностями в клітинах, М., 1969; Лабораторні та спеціальні методи дослідження у судовій медицині, під ред. В. І. Пашкової та В. В. Томіліна, с. 157, М., 1975; Любінська С. І. та Антонова С. Н. Дослідження Y-хроматину в слідах крові, Суд.-мед. експертиза, т. 18 № 3, с. 17, 1975; Основи цитогенетики людини, за ред. A. А. Прокоф'євої-Бельгівської, М., 1969; Methods in human cytogenetics, ed. by H. G. Schwarzacher a. U. Wolf, p. 207, В. а. о., 1974; The sex chromatin, ed. by K. L. Moore, Philadelphia - L., 1966.

А. Ф. Захаров; А. В. Капустін (суд.).

Підлоговий хроматин, щільне тільце, що фарбується, виявляється в ядрах клітин, що не діляться, у гетерогаметних (мають Х і Y статеві хромосоми) тварин і людини. Статевий хроматин поділяють на Х-хроматин, або тільце Барра (відкритий у 1949 англійськими дослідниками М. Барром та Л. Бертрамом), та Y-хроматин (відкритий у 1970 шведськими вченими Т. Касперсоном та Л. Цех). Х-хроматин - тільце (0,7-1,2 мкм), що інтенсивно фарбується основними барвниками, частіше прилягає до ядерної оболонки і має трикутну напівмісячну або округлу форму. Y-хроматин значно менший за розмірами, виявляється при фарбуванні ядра флюорохромами (акрихін, акрихініприт) та дослідженні в ультрафіолетовому світлі. У особин жіночої статі (тип XX) одна з Х-хромосом неактивна, що проявляється в її сильнішій спіралізації та ущільненні. В інтерфазному ядрі ця спіралізована Х-хромосома і помітна у вигляді Х-хроматину. Y-хроматин у людини та деяких приматів має велику гетерохроматинову ділянку, яка дає інтенсивну флюоресценцію. Т. о., технічно просте дослідження інтерфазного ядра дозволяє будувати висновки про стан системи статевих хромосом. Х-хроматин більш менш часто зустрічається у жінок в ядрах клітин всіх тканин (наприклад, в клітинах епітелію слизової оболонки рота в 15-60% ядер). Число ядер з Х-хроматином залежить від інтенсивності розмноження клітин у даній тканині та від гормонального стану організму. Зміна кількості статевого хроматину свідчить про зміну кількості статевих хромосом, що детальніше виявляється аналізом каріотипу. Визначенням П. х. широко користуються для встановлення статі дитини (що нині можливо і до її народження і необхідно у разі спадкування хвороб, зчеплених зі статтю).

Ряд порушень соматостатевого розвитку організму людини, анатомічних або функціональних дефектів гонад може бути правильно розпізнаний і класифікований, в першу чергу, за допомогою визначення стану статевого хроматину, а далі шляхом оцінки каріотипу (характерного для індивіда або виду наборів хромосом). Тому необхідно почати з деяких основних відомостей щодо значення цитогенетичних досліджень в акушерстві та гінекології.

Основою численних робіт з вивчення статевого хроматину стали цікаві дані, опубліковані Bertram, які виявили у кішок різницю між ядрами нервових клітин самок і самців.

Знайдена цими авторами в клітинних ядрах самок ціанофільна глибка хроматину, що відрізнялася за величиною і щільністю від інших зернят останнього, була названа статевим хроматином. У той час як у самок ця глибка має вигляд прилеглого до ядерної оболонки плосковипуклого утворення, у самців хроматин майже ніколи не визначається, тому що він поступово розподілений по всьому клітинному ядру. Так само і у жінок у ядрах більшості клітин епітелію ротової порожнини, а також ряду інших областей, вдалося пізніше виявити наявність статевого хроматину у вигляді одного тільця; у чоловіків найчастіше статевої хроматин відсутня чи зустрічається зрідка.

Питання, що визначає поява в потомстві особин чоловічої та жіночої статі в генетичному плані, давно вирішено. Підлога дитини детермінована дуже рано, вже в момент запліднення, залежно від того, який сперматозоїд проник у яйцеклітину в процесі її запліднення.

Як відомо, у людини існує два види сперматозоїдів. У ядрі однієї групи міститься 23 хромосоми, зокрема одна статева, чи Х-хромосома (гоносома), інші називаються аутосомами. Інший вид сперматозоїдів містить також 23 хромосоми, але замість Х-хромосоми має іншу статеву хромосому. Всі жіночі яйцеклітини містять, отже, 22 аутосоми плюс X статеву хромосому, будучи таким чином абсолютно однаковими за набором хромосом. При заплідненні яйцеклітини сперматозоїдом з Х-хромосомою народжується дівчинка, в клітинах якої міститься два набори з 22 аутосом плюс 2 Х-хромосоми, тобто всього 46 хромосом. При злитті яйцеклітини зі сперматозоїдом, що містить У-хромосому, народжується хлопчик, в ядрах клітин якого містяться два набори аутосом плюс дві статеві хромосоми. F-хромосома, беручи участь у детермінації статі, сприяє формуванню чоловічої особини.

Для теоретичного пояснення цих фактів Lyon запропонувала гіпотезу, зміст якої стисло зводиться до наступного. Якщо в ранньому періоді розвитку жіночого зародка є дві активні статеві Х-хромосоми, то близько 16-го дня ембріонального життя одна з них інактивується і набуває вигляду глибок гетерохроматину. Слід мати на увазі, що в організмі жінки є два хроматини різного походження: один від матері, інший від батька. При ін-активуванні, що відбувається далі, воно стосується в одних клітинах Хт, в інших Хр (Z-paternel). Таким чином, в організмі жінки, навіть серед близьких до клітин, виникає стан своєрідної мозаїки активних Хт- і Хр-хромосом. Внаслідок інактивування єдиної хромосоми.

Визначення статевого хроматину

Для отримання безпомилкових результатів визначення статевого хроматину в ряді лабораторій вдаються до складнішої методики забарвлення, використовуючи розчин тіоніну. За такої більш тривалої і кропіткої роботи виходять хороші результати. Хромосоми X у ряді клітин зародка з каріотипом 45/Х0, що відповідає так званому синдрому Шерешевського – Тернера (Turner) ці клітини втрачають життєздатність, і відмирання частини їх під час зародкового життя призводить до виникнення соматостатевих аномалій (що часто спостерігаються при цьому зростання, крилоподібні складки на шиї та ін.).

Вплив хромосом на підлогу дитини

Знайдена цими авторами у клітинних ядрах самок ціанофільна глибка хроматину , що відрізнялася за величиною і щільністю від інших зернят останнього, була названа статевим хроматином. У той час як у самок ця глибка має вигляд прилеглого до ядерної оболонки плосковипуклого утворення, у самців хроматин майже ніколи не визначається, тому що він поступово розподілений по всьому клітинному ядру. Так само і у жінок у ядрах більшості клітин епітелію ротової порожнини, а також ряду інших областей, вдалося пізніше виявити наявність статевого хроматину у вигляді одного тільця; у чоловіків найчастіше статевої хроматин відсутня чи зустрічається зрідка.

Рисунок 1. Приклад нормального запліднення та детермінації жіночої та чоловічої статі

Для теоретичного пояснення цих фактів Lyon запропонувала гіпотезу, зміст якої стисло зводиться до наступного. Якщо в ранньому періоді розвитку жіночого зародка є дві активні статеві Х-хромосоми, то близько 16-го дня ембріонального життя одна з них інактивується і набуває вигляду глибок гетерохроматину. Слід мати на увазі, що в організмі жінки є два хроматини різного походження: один від матері, інший від батька. При інактивуванні, що відбувається далі, воно стосується в одних клітинах Хт, в інших Хр (Z-paternel). Таким чином, в організмі жінки, навіть серед близьких до клітин, виникає стан своєрідної мозаїки активних Хт- і Хр-хромосом. Внаслідок інактивування єдиної хромосоми.

Визначення статевого хроматину в клініці

Найбільш простим і широко використовується методом є цитологічне дослідження статевого хроматину в клітинах епітелію порожнини рота. Взявши металевим шпателем зішкріб зі слизової оболонки ротової порожнини, з отриманого матеріалу готують мазок, який фіксують у спирті або в суміші спирту з ефіром. Препарат фарбують гематоксиліном та еозином та переглядають під мікроскопом за допомогою імерсійного об'єктива. У препаратах мазків з ротової порожнини чоловіків статевий хроматин зустрічається тільки в 0,5-0,7% клітинних ядер; у жінок цей відсоток дорівнює 40-60.

Мал. 3. Механізм запліднення та детермінації статі за Е.Тетером.а – детермінація жіночої статі; б – детермінація чоловічої статі; 1 – яйцеклітина; 2 - зародки жіночої та чоловічої статі; 3 - наявність статевого хроматину (рис. о) та відсутність його (рис. б)

Для отримання безпомилкових результатів визначення статевого хроматину в ряді лабораторій вдаються до складнішої методики забарвлення, використовуючи розчин тіоніну. За такої більш тривалої і кропіткої роботи виходять хороші результати. Хромосоми X у ряді клітин зародка з каріотипом 45/Х0, що відповідає так званому синдрому Шерешевського - Тернера (Turner) ці клітини втрачають життєздатність, і відмирання частини їх під час зародкового життя призводить до виникнення соматостатевих аномалій (що часто спостерігаються при цьому зростання, крилоподібні складки на шиї та ін.).

Висушений мазок забарвлюють реактивом Май-Грюнвальда або фарбою Гімза; потім, промив водою, його висушують при кімнатній температурі. Препарати вивчають за допомогою імерсії при 750-1500-кратному збільшенні.

Для встановлення статевого хроматину необхідно переглянути 500 нейтрофілів; у чоловіків не більше ніж 6 лейкоцитів мають додаткові часточки (завбільшки до 1,5 мкм), пов'язані з рештою маси клітинного ядра ниточкою каріоплазми. У осіб генетично жіночої статі на 250 переглянутих лейкоцитів виявляється принаймні 6 або значно більше клітин з додатковими часточками, що нагадують «барабанні палички».

Форми ядерних відростків, які у нейтрофильных лейкоцитах, прийнято ділити втричі групи (рис. 5).

Мал. 5. Різні картини статевого хроматину в мазках, взятих із ротової порожнини.Мал. 5. Різні локалізації "барабанних паличок" у ядрах нейтрофільних лейкоцитів (за Е. Тетером).

Група А - «барабанні палички», що мають вигляд маленьких грушоподібних відростків, прикріплених до одного з сегментів ядра лейкоциту топкою, але чітко вираженою ниточкою. Вони мають постійну величину і форму і характерні в основному для генетично жіночої статі. Група відрізняється мінливістю форми відростків, відшнурованих від ядра нейтрофілу; Іноді їх буває дещо в одному лейкоциті і зовні вони менш схожі на типові «барабанні палички». Хоча ця група зустрічається в осіб обох статей, вона найчастіше виявляється у особин чоловічої статі. Група С – «псевдобарабанні палички» – мають округлу або овальну форму, нерівномірно забарвлюються; поверхня їх нерідко складчаста, вони з'єднуються з масою лейкоциту товстою ніжкою. Група С зустрічається в осіб обох статей, частіше у чоловіків. Справжній жіночий хроматин є набряклою глибкою, сполученою з одним із сегментів лейкоциту дуже тонкою ніжкою. Встановлена наявність статевого хроматину загалом вважається ознакою жіночої статі.

Аномалії

В даний час тільця Барра розглядаються як результат спіралізації однієї з двох Х-хромосом, властивих жінці. Ця спіралізація, що відбувається в клітинах поза мітозом, веде до генетичної інактивації статевої хромосоми. Оскільки єдина у чоловіків Х-хромосома не спіралізується, вони зазвичай тільця Барра відсутні. Вони відсутні також у жінок із патологічним набором хромосом ХО.

Однак спостерігаються вроджені аномалії статі, які характеризуються відсутністю у жінок статевого хроматину, але наявністю в ядрах клітин мозаїки, коли частина ядер клітин містить лише одну Х-хромосому, інша має ХУ-хромосоми. Припускають, що така мозаїка є наслідком втрати У-хромосоми однією з клітин чоловічого зародка на ранніх стадіях його розвитку. У подібних випадках, хоча зовнішні та внутрішні статеві органи побудовані за жіночим типом, при чревосіченні на одній стороні виявляють рудименти гонади, а на іншій - неповноцінний яєчник, в якому при скупченні клітин Лейдіга відсутня сперматогенез. Наявність піхви, матки, яйцеводів свідчить про те, що єдина гонада-насінник - не виділяла достатньої кількості індукторів, які могли б забезпечити повну регресію дериватів мюллерових каналів та маскулінізацію статевих шляхів, внаслідок чого розвинулася жіноча статева система.

Колишній погляд, згідно з яким для утворення статевого хроматину необхідні дві хромосоми X, переглянувся і не знайшов підтвердження. У жінок з каріотипом 47/XXX при дослідженні статевого хроматину було виявлено два тільця Барра; при хромосомному наборі 48/ХХХ було встановлено наявність трьох глибок статевого хроматину. У світлі цих даних в даний час прийнято за правило, що кількість тілець Барра, що знаходиться в кожній клітині, визначається за правилом п - 1, тобто дорівнює кількості знайдених у ньому статевих хромосом мінус 1 (рис. 6).

Слід пам'ятати, що особи чоловічої статі можуть мати хромосоми ХХУ, і в таких випадках у клітинах їх тканин можливе визначення статевого хроматину, що ще не дозволяє розглядати їх як представників жіночої статі. У той самий час відсутність статевого хроматину ще є доказом наявності статевих хромосом чоловічого типу (XY) оскільки при дисгенезії гонад склад хромосом то, можливо ХО, і тоді клітинах тканин немає жіночого ядерного хроматину (рис. 7, а, б). Тому нині застосовується така термінологія:

У обстежуваної особи є позитивний тип ядерного хроматину (тобто у клітинах його тканин виявляються характерні тільця Барра);
У особи, що обстежується, негативний.

Іноді вдається диференціювати хромосоми, морфологічне відокремлення яких інколи дуже важко. Слід також згадати про електронно-мікроскопічному вивченні хромосом людини. Зважаючи на величезне збільшення числа досліджень з використанням вищевказаних технічних методів та значної кількості індивідуальних номенклатур ряду авторів стала необхідною розробка єдиної номенклатури хромосомного набору, що було зроблено на конференції цитогенетиків у Денвері.

Мал. 7 Патологічний результат запліднення, зумовлений явищем нероздільності. 1- на прикладі синдрому Шерешевського – Тернера; б - на прикладі синдрому Клейнфельтера

Тип ядерного хроматину (якщо принаймні 40-60% клітин його тканин немає тілець Барра). Не слід, проте, забувати, як і в осіб із чоловічим типом статевих хромосом можлива наявність статевого хроматину в 0,5-0,7% випадків.

Серед новонароджених хлопчиків число хроматин-позитивних становить у середньому 1,7 на 1000. Кількість хроматин-негативних дівчаток становить 0,3 на 1000. На 1000 новонароджених жіночої статі припадає один випадок із каріотипом 47 XXX (так звані наджінки).

Генетичний механізм визначення та диференціації статі не викликає сумніву.

Однак основна проблема, яким чином діють гени та генні продукти на диференціацію спеціалізованих тканин організму в ембріогенезі і, зокрема, формування генеративної тканини, залишається відкритою. Намічаються лише перші кроки цієї таємничої області.

У кожній соматичній клітині нащадка є по половині хромосом кожного з батьків. Однак іноді, у людини та тварин число статевих хромосом виявляється збільшеним. У людини для нормального розвитку чоловічої статі достатньо однієї Х-хромосоми у присутності Y-хромосоми; при цьому число Х-хромосом може бути подвоєне, потрійне, вчетверо, і все ж таки з такої зиготи розвивається особина чоловічої статі. У особин жіночої статі набір Х-хромосом може коливатися від однієї до чотирьох і більше. Порушення диплоїдного набору статевих хромосом веде до різноманітних аномалій у розвитку організму, появі інтерсексів і гермафродитів. Такі організми з порушеним числом хромосом можуть бути, очевидно, використані вивчення дії генів.

Очевидно, у клітині існують певні регуляторні механізми, які однак керують дією генів і станом самих хромосом у процесі онтогенезу.

У 1949 р. М. Барр і Ч. Бертрам, вивчаючи нейрони у кішки, звернули увагу на те, що в інтерфазному ядрі клітини міститься тільце, що інтенсивно фарбується деякими барвниками. Причому тільце присутнє в ядрах клітин самок і відсутнє у самців. Виявилося, що воно зустрічається у багатьох тварин і завжди пов'язане зі статтю. Ця структура в ядрі клітини отримала назву статевого хроматину, або « тільця Барра».

Підлоговий хроматин знаходиться найчастіше під оболонкою ядра. Помічено, що залежно від зміни функціонального стану тканини статевий хроматин в інтерфазному ядрі змінює місцезнаходження. Статевий хроматин містить ДНК та РНК. Він виявлений у різних тканинах (нервовий, гладкі м'язи, епітеліальний) і органах (печінка, серце, шкіра, різні залози) хребетних тварин (ссавці, птиці), у тому числі і у людини, у безхребетних і навіть у рослин. Показано, що у ряду хребетних з'являється в онтогенезі не раніше стадії гаструли, але раніше закладення гонад. Така сама картина спостерігається і в ембріогенезі людини.

На локалізацію, форму та структуру статевого хроматину не впливають статеві гормони: це вказує на те, що він не є вторинною статевою ознакою. Передбачається, що за своєю природою він має хромосомне походження і споріднений з статевими Х-хромосомами, проявляється тільки у жіночої статі незалежно від його гетерогаметності (метелика, птиці) і числа Х-хромосом.

Дослідженнями на людині було показано, що в клітинах аномальних жінок Х0 не виявляється статевого хроматину так само, як у нормальних XY чоловіків; нормальні жінки XX та аномальні чоловіки XX Y мають по одному тільцю; жінки XXX та чоловіки XXX Y мають два тільця, особини з ХХХХ та XXXX Y – по три тільця. Інакше кажучи, число тілець статевого хроматину дорівнює числу Х-хромосом, яке порушує співвідношення 2A + X. Отже, між числом тілець статевого хроматину і числом Х-хромосом в ядрі є прямий зв'язок.

Методом радіографії було встановлено, що одна з Х-хромосом диплоїдного жіночого організму подвоюється в інтерфазі пізніше, ніж усі інші хромосоми. У чоловічих клітинах Х-хромосома не запізнюється з подвоєнням, і статевого хроматину в них немає.

Число пізно репродукуються Х-хромосом відповідає числу тілець статевого хроматину. На підставі такого збігу та інших показників цитогенетиками було зроблено висновок про те, що утворення статевого хроматину пов'язане з Х-хромосомами. Усі зазначені зміни статевого хроматину пояснюють активністю статевих хромосом у процесі диференціювання статі.

Таким чином, з відкриттям статевого хроматину стало можливим:

дослідити статеве диференціювання на клітинному рівні;
діагностувати стать ембріона ще до статевого диференціювання;
визначати первинне співвідношення статей при зародженні та вирішити низку інших питань.

Якщо ви знайшли помилку, будь ласка, виділіть фрагмент тексту та натисніть Ctrl+Enter.

Вконтакте

Однокласники

Попередня12345678Наступна

Підлоговий хроматин – це невелике дископодібне тільце. Воно виявляється в ядрах клітин ссавців. У жінок статевий хромаїн зустрічається у 60-70%, а у чоловіків 3-5%. Статевий хроматин є спіралізованою Х хромосому. У каріотипі нормальної жінки є два Х хромосоми і одна з них утворює тільце Бара.

Готується мазок - відбиток зі слизової оболонки ротової порожнини. Фарбують за Романівським Гімзом. Після змиття та висушування Вивчають препарат під малим збільшенням мікроскопа (об'єктив х20, окуляр х10). Знаходять скупчення клітин та переводять на імерсійне збільшення (об'єктив х90, окуляр х10). Вважають інтерфазні ядра і відзначають, скільки їх містять тільця Барра Підраховують 100 клітин. Для аналізу необхідно відбирати неушкоджені клітини з круглими або овальними ядрами, з рівною ядерною оболонкою та ніжною хроматиновою структурою. Підлоговий хроматин розташований під ядерною оболонкою, має форму півмісяця чи трикутника. У жінок – 28% усіх ядер епітеліальних клітин містять статевий хроматин, а у чоловіків – 0-1%.

35. Реактивність організму- це його здатність відповідати змінами життєдіяльності на вплив внутрішнього та зовнішнього середовища.

Види реактивності.

1. Видова реактивність - це реактивність, характерна для певного виду тварин, іншими словами, видові особливості реагування на зовнішні впливи, що залежать головним чином від спадкових анатомо-фізіологічних особливостей представників даного виду.

Прикладами видової реактивності можуть бути сезонна поведінка тварин (зимова сплячка, перельоти птахів, міграція риб тощо)

2. Групова реактивність -це реактивність окремих груп людей (чи тварин), об'єднаних якимось загальним ознакою, від якого залежить особливості реагування всіх представників цієї групи на впливу зовнішніх чинників.До таких ознак належать: вік, стать, конституційний тип, належність до певної раси, група крові.

3. Індивідуальна реактивність.Кожна людина (або тварина), маючи видові та групові особливості реагування, як правило, певним, властивим тільки їй чином відповідає змінами своєї життєдіяльності на дію факторів навколишнього середовища.

4.Фізіологічна реактивність - це зміни життєдіяльності організму, певні форми реагування на дію факторів навколишнього середовища, що не порушують його гомеостаз; це реактивність здорової людини (або тварини) на непатогенні подразники (наприклад, адаптація до помірного фізичного навантаження

5. Патологічна реактивністьпроявляється при дії на організм хвороботворних факторів, що викликають в організмі пошкодження та порушення його гомеостазу.

6.Специфічна реактивність

36. Специфічна реактивність- Це здатність організму відповідати на дію антигену виробленням антитіл або комплексом клітинних реакцій, специфічних по відношенню до цього антигену, тобто. це реактивність імунної системи (імунологічна реактивність).

Її види: активний специфічний імунітет, алергія, аутоімунні захворювання, імунодефіцитні та імунодепресивні стани, імунопроліферативні захворювання.

Неспецифічна реактивність.Всі зміни в організмі, що виникають у відповідь на дію зовнішніх факторів і не пов'язані з імунною відповіддю, є ознакою неспецифічної реактивності.

Наприклад, зміни в організмі при гіповолемічному або травматичному шоці, гіпоксії, дії прискорень і перевантажень - ознаки лише неспецифічної реактивності. При інфекційних, алергічних, аутоімунних захворюваннях включаються механізми як специфічної (вироблення антитіл), так і неспецифічної реактивності (запалення, лихоманка, лейкоцитоз, зміни функції пошкоджених органів і систем тощо).

37. Найбільш потужним фактором гуморальногоімунітету є антитіла, значимість яких для імунопатології тим більше велика, що за певних умов вони із захисників організму можуть перетворюватися на патогенетичний фактор, що зумовлює розвиток аутоімунних процесів. За своєю хімічною структурою антитіла є глобулінами. Антитіла секретуються плазматичними клітинами, які утворюються внаслідок диференціювання В-лімфоцитів.

— IgM.Дані антитіла першими синтезуються у відповідь антигенне роздратування. Вони ефективні у процесах зв'язування та аглютинації мікробів.

— IgG.Антитіла цього класу з'являються за антитілами класу IgM. Вони, зокрема, зв'язуються із рецепторами фагоцитів.

— IgA.Ці антитіла містяться в слині, поті, сечі, легенях і кишечнику. Вони захищають тканини від проникнення антигенів із зовнішніх поверхонь.

— IgE.Ці антитіла зв'язуються з опасистими клітинами і викликають їхню дегрануляцію.

— IgD.Вони зв'язуються з B-лімфоцитами та регулюють їх функцію.

Механізми імунітету. Формування імунітету до різних інфекційних агентів визначається поєднанням різних механізмів імунної системи. Вони можуть бути неспецифічними та специфічними:
1. Неспецифічні механізми протиінфекційного захисту не розпізнають та не запам'ятовують особливості будови чужорідних антигенів; ці механізми включаються при впливі на організм будь-якого інфекційного агента, забезпечуючи ранній та достатньо надійний захист організму;
2. Антиген-специфічні реакції імунної системи – спрямовані проти конкретного збудника, забезпечуючи несприйнятливість до цього захворювання протягом тривалого часу, іноді все життя.

І неспецифічні, і антиген-специфічні механізми протиінфекційного захисту організму можуть бути:
1. гуморальними (водорозчинними) факторами - білками, що містяться в крові та рідинах організму. Вони забезпечують так званий гуморальний імунітет;
2. різними клітинами імунної системи, що забезпечують клітинний імунітет
38.Мутації-розуміють зміну структури гена, хромосоми чи їх числа. В результаті мутацій утворюється аномальний ген із зміненим кодом.

Класифікація

1. З причин:

Спонтанні-виникають в умовах природного фону навколишнього та внутрішнього середовища організму, без спеціальних впливів.

Індуковані-викликаються цілеспрямованим впливом (експеримент).

2. По виду клітин, пошкоджених мутацією:

Соматичні, що виникають у клітинах тіла,

Гаметні мутації - у статевих клітинах.

3. На кінець організм:

а)негативні:

Летальні (несумісні з життям)

Напівлетальні (знижують життєздатність організму)

Нейтральні (не впливають на процеси життєдіяльності)

б)позитивні-підвищують життєздатність.

4. За обсягом генетичного матеріалу:

Генні/точкові (зміни в межах одного гена, порушується послідовність або склад нуклеотидів)

Хромосомні абберації чи перебудови, що змінюють структуру окремих хромосом.

а) делеція (нестача) – випадають окремі ділянки та відповідні гени хромосоми (с-м «котячого крику»)

б) дуплікація – ділянка хромосоми та відповідний блок генів подвоюється.

в) інверсія - ділянка хромосоми повертається на 180 °

г) транслокація -переміщення ділянки хромосоми на інше місце тієї ж чи іншої хромосоми (лімфома Беркітта, мієлоцитарний лейкоз)

Геномні мутації, що характеризуються зміною числа хромосом.

Причини:

Генетична схильність

Вплив внутрішніх факторів

Вплив фізичні та хімічні фактори

39. Ознаки, успадковані через статеві X-і Y-хромосоми, отримали назву зчеплених із підлогою. У людини ознаки, які успадковуються через Y-хромосому, можуть бути тільки в осіб чоловічої статі, а успадковані через X-хромосому, - в осіб як однієї, так і іншої статі.

ПІДЛОМИЙ ХРОМАТИН

Особина жіночої статі може бути як гомо-, так і гетерозиготною за генами, локалізованими в X-хромосомі. А рецесивні алелі генів у неї виявляються лише у гомозиготному стані. Оскільки в особин чоловічої статі лише одна X-хромосома, всі локалізовані в ній гени, навіть рецесивні, одразу виявляються у фенотипі. Такий організм часто називають гомозиготним.

У людини деякі патологічні стани зчеплені зі статтю. До них відноситься, наприклад, гемофілія-це генне спадкове захворювання пов'язане з Х хромосомою. При цьому відбувається мутації в Х хромосомі, внаслідок чого порушується синтез у печінці 8 го фактора згортання крові. За відсутності даного фактора порушується згортання крові і при поранення проявляється кровотечами, що довго не проходять.

Аналогічним чином успадковується дальтонізм, тобто така аномалія зору, коли людина плутає кольори, найчастіше червона із зеленим. Нормальне сприйняття кольору обумовлено домінантним алелем, локалізованим в X-хромосомі. Його рецесивна алельна пара в гомо-і гетерозиготному стані призводить до розвитку дальтонізму.

Звідси зрозуміло, чому дальтонізм частіше зустрічається у чоловіків, ніж у жінок: у чоловіків лише одна X-хромосома, і якщо в ній знаходиться рецесивний аллель, який детермінує дальтонізм, він обов'язково проявляється. У жінки дві X хромосоми: вона може бути як гетерозиготною, так і гомозиготною за цим геном, але в останньому випадку страждатиме на дальтонізм.

40. Трісомії

1. хвороба Дауна.

Причина трисомії по 21 хромосомі – каріотип 47(21+)

Попередня12345678Наступна

Визначення Х- та Y-хроматину

1234567Наступна ⇒

Для виявлення чоловічого Y-статевого хроматину (F-тельце) мазки фарбують акрихіном і переглядають за допомогою люмінісцентного мікроскопа. Y-хроматин виявляють у вигляді крапки, що сильно світиться, за величиною і інтенсивністю світіння відрізняється від інших хромоцентрів. Він виявляється у ядрах клітин чоловічого організму. Визначення Х- та Y-хроматину - скринінговий метод, остаточний діагноз хромосомної хвороби ставлять тільки після дослідження каріотипу.

Каріотипування, або цитогенетичне дослідження дозволяє виявити відхилення у структурі та числі хромосом, які можуть стати причиною безпліддя, іншої спадкової хвороби та народження хворої дитини.

Кожен організм характеризується певним набором хромосом, що називається каріотипом. Каріотип людини складається з 46 хромосом – 22 пари аутосом та дві статеві хромосоми. У жінки це дві X-хромосоми (каріотип: 46, ХХ), а у чоловіків одна Х-хромосома, а інша – Y (каріотип: 46, ХY). У кожній хромосомі знаходяться гени, відповідальні за спадковість. Каріотипування дозволяє виявити спадкові захворювання, пов'язані зі зміною кількості хромосом, їх форми, дефектом окремих генів. До таких хвороб належать синдроми Дауна, Едвардса та Патау; синдром "котячого крику", різноманітні ферментопатії (хвороби обміну речовин) та багато інших.

Існує два основні типи цього дослідження:
вивчення хромосом клітин крові пацієнтів та
пренатальне каріотипування, тобто дослідження хромосом плода.

Метод визначення статевого хроматину.

Визначення Х- та Y-хроматину

Визначення Х- та Y-хроматину часто називають методом експрес-діагностики статі. Досліджують клітини слизової оболонки ротової порожнини вагінального епітелію або волосяної цибулини. У ядрах клітин жінок у диплоїдному наборі присутні дві хромосоми X, одна з яких повністю інактивована (спіралізована, щільно упакована) вже на ранніх етапах ембріонального розвитку і видно у вигляді глибки гетерохроматину, прикріпленого до оболонки ядра. Інактивована хромосома X називається статевим хроматином або тільцем Барра. Для виявлення статевого Х-хроматину (тільця Барра) в ядрах клітин мазки забарвлюють ацетарсеїном і препарати переглядають за допомогою звичайного світлового мікроскопа. У нормі в жінок виявляють одну глибку Х-хроматину, а чоловіки її немає.

Статевий хроматин X

Визначення Х- та Y-хроматину - скринінговий метод, остаточний діагноз хромосомної хвороби ставлять тільки після дослідження каріотипу.

Хромосомні хвороби людини, зумовлені зміною числа хромосом. Причини виникнення.

1234567Наступна ⇒

Схожа інформація:

Аналіз взаємозв'язку між технологічними змінними, визначення основних вимог до ведення процесів, формулювання критеріїв якості та цілей управління
Ангіни: 1) визначення, етіологія та патогенез 2) класифікація 3) патологічна анатомія та диференціальна діагностика різних форм 4) місцеві ускладнення 5) загальні ускладнення
Апеляція до хадису про те, як Адам виправдався приреченням
Бактеріальний шок: 1) визначення, етіологія, клінічні прояви; 2) найбільш характерні вхідні ворота; 3) фактори прориву; 4) патологічна анатомія; 5) причини смерті.
Питання 136. Що є вказівкою на приречення, пов'язане з усім життям людини в цілому і має відношення до перших етапів перебування насіння в утробі?
Питання 142. Які є вказівки на четверту ступінь віри в приречення, яка пов'язана з творінням?
Питання 145. Яке місце у релігії посідає віра у призначення?
Питання (визначення та основні завдання бух обліку на сучасному етапі)
Запалення. Визначення поняття. Причини. Основні ознаки запалення. Механізм їхнього розвитку. Значення запалення для організму
Запалення: 1) визначення та етіологія 2) термінологія та класифікація 3) фази та їх морфологія 4) регуляція запалення 5) результати
Витривалість як фізична якість (визначення, різновиди). Чинники, що визначають прояв витривалості
Гангрена та інфаркт. 1) визначення та причини гангрени 2) морфологія видів гангрени 3) визначення та причини інфарктів 4) морфологія видів інфарктів 5) результати гангрени та інфарктів

Пошук на сайті:

Статевий хроматин. Його роль, метод визначення

Що таке статевий хроматин

При заплідненні яйцеклітини сперматозоїдом з Х-хромосомою народжується дівчинка, в клітинах якої міститься два набори з 22 аутосом плюс 2 Х-хромосоми, тобто всього 46 хромосом. При злитті яйцеклітини зі сперматозоїдом, що містить У-хромосому, народжується хлопчик, в ядрах клітин якого містяться два набори аутосом плюс дві статеві хромосоми. F-хромосома, беручи участь у детермінації статі, сприяє формуванню чоловічої особини.

Визначення статевого хроматину

Для отримання безпомилкових результатів визначення статевого хроматину в ряді лабораторій вдаються до складнішої методики забарвлення, використовуючи розчин тіоніну. За такої більш тривалої і кропіткої роботи виходять хороші результати. Хромосоми X у ряді клітин зародка з каріотипом 45/Х0, що відповідає так званому синдрому Шерешевського – Тернера (Turner) ці клітини втрачають життєздатність, і відмирання частини їх під час зародкового життя призводить до виникнення соматостатевих аномалій (що часто спостерігаються при цьому зростання, крилоподібні складки на шиї та ін.).