Лейкоцитарная формула крови: о чем вам могут сказать результаты анализа. Лейкоциты, их количество и основные группы. Методы определения количества лейкоцитов. Лейкоформула и ее значение Методика определения лейкоцитов в крови

Роль лейкоцитов в организме

Лейкоциты крови выполняют в организме различные функции – защитную, трофическую, тригерную. Нейтрофилы благодаря фагоцитарной активности и богатству гидролитическими и другими ферментами осуществляют бактерицидную, вируцидную, кандидоцидную и дезинтоксицирующую функции. Способность нейтрофилов к фагоцитозу реализуется в микроциркуляторном русле (в капиллярах) при краевом стоянии, особенно после выхода в ткань, при этом лейкоциты активно движутся к участкам воспаления и тканевого распада, где находятся вредоносные агенты. Однако участие нейтрофилов в воспалении не ограничивается фагоцитозом возбудителя. В настоящее время известно, что нейтрофилы, содержащие в своих гранулах набор биологически активных веществ (энзимной и неэнзимной природы), прямо или опосредовано (путем взаимодействия с плазменными и тканевыми факторами) участвуют в развертывании всех этапов воспаления. Нейтрофильным гранулоцитам принадлежит также ведущая роль в образовании активных эндогенных пирогенов и формировании лихорадочной реакции. Излияние гидролитических ферментов из нейтрофилов в межклеточную среду (экзоцитоз) с последующим забором деградированного материала (эндоцитоз) имеет немаловажное значение для жизнедеятельности соединительной ткани. Эозинофилы (благодаря содержанию лактопероксидазы и других ферментов) обладают дезинтоксицирующим свойством (их находят в большом количестве в тканевых жидкостях, подслизистой оболочке кишечника, дыхательном аппарате и коже). Кроме того, они участвуют в образовании плазминогена. Эозинофилия характерна для аллергических состояний и объясняется, очевидно, адсорбированием ими гистаминных продуктов. Базофилы содержат в своих гранулах гепарин, обладающий противосвертывающим и антигиалуронидазным свойством, а также гистамин, что позволяет им (наряду с тучными клетками) принимать участие в воспалительных и аллергических реакциях. Моноциты способны к амебоидному движению и фагоцитозу. Особенно активно они фагоцитируют остатки клеток, чужеродные мелкие тела, малярийные плазмодии, микобактерии туберкулеза и могут захватывать даже крупные клетки. Лимфоциты играют важную роль в процессах иммунитета. С точки зрения современной иммунологии циркулирующие в крови лимфоциты неоднородны по своему функциональному значению. Большую их часть составляют так называемые Т-лимфоциты (тимусзависимые, прошедшие в развитии через тимус), меньшую – В-лимфоциты (образующиеся непосредственно из стволовых клеток, минуя тимус). Т-лимфоцитам приписывают участие в клеточном иммунитете. В-лимфоцитам – в антителообразовании, то есть гуморальном иммунитете. Круглоклеточная инфильтрация, нередко наблюдающаяся при воспалительных процессах (например, туберкулезе), позволяет думать об участии лимфоцитов в борьбе с инфекцией. Кроме того, лимфоциты осуществляют трофическую (репаративную) функцию на местах тканевой деструкции и воспаления.
Продолжительность жизни лейкоцитов неодинакова. Полный цикл жизни гранулоцитов составляет 9-13 дней, при этом на незрелые костномозговые стадии приходится 5-6 дней Внутрисосудистый период жизни короткий – от нескольких часов до 2 дней, так как лейкоциты быстро уходят в ткани, где и осуществляются в основном их функции, например, защитная (поэтому в тканях их примерно в 40-50 раз больше, чем в кровяном русле). Лимфоциты делятся на коротко живущие (которые, видимо, обладают свойством репродукции себе подобных) и длительно живущие – до 200-300 дней (формы, сохраняющие иммунологическую «память»). В отличие от нейтрофилов, которые после ухода в ткань, по-видимому, обратно в кровяное русло не возвращаются, лимфоциты обладают способностью к рециркуляции.

Клиническое значение

Общее число лейкоцитов в среднем в 760 раз меньше числа эритроцитов. В норме в 1 мкл крови взрослого человека содержится от 4000 до 9000 лейкоцитов. У новорожденного количество лейкоцитов равно 12000-15000 в 1 мкл, к 5 годам оно снижается до 10000, а с 10 лет устанавливается на том же уровне, что и у взрослого.
Численность количества лейкоцитов в крови колеблется в течении дня, достигая максимума в вечерние часы. Увеличение количества лейкоцитов в крови называается лейкоцитозом, а уменьшение - лейкопенией. Изменение количества лейкоцитов имеет значение тогда, когда оно значительно и обнаруживается повторно.
В основе лейкоцитоза могут лежать различные патофизиологические механизмы, связанные с продукцией, созреванием и выселением лейкоцитов из кроветворных органов, а также с их перераспределением в кровяном русле. Все эти факторы могут комбинироваться или выявляться в отдельности. Различают абсолютный и относительный (перераспределительный) лейкоцитоз.
Лейкоцитоз может наблюдаться у здоровых людей в зависимости от некоторых физиологических моментов. Например:

1. после приема пищи, особенно богатой белком (при "пищеварительном" лейкоцитозе число лейкоцитов обычно не превышает 10000-12000 в 1 мкл крови и через 3-4 часа возвращается к норме),
2. после мышечной работы ("миогенный" лейкоцитоз может иногда достигать 20000),
3. горячих и холодных ванн в периоде реактивного расширения сосудов кожи,
4. беременности,
5. сильных эмоций (симпатико-вегетативные влияния).
Во всех этих случаях лейкоцитоз является распределительным, то есть возникает в результате сосудистых реакций с выселением лейкоцитов из кровяных депо (однако в основе их нередко лежит накопление в крови химических продуктов, например, молочной кислоты). Лейкоцитоз может возникать при введении некоторых фармакологических препаратов, например адреналина, а также кортикостероидов и АКТГ. При этом общее количество лейкоцитов повышается до 15000-20000, что объясняется миелотропным действием указанных гормонов. Это действие проявляется в ускоренном созревании костномозговых клеток и выходом в кровь зрелых лейкоцитов.

Лейкоцитоз характерен для следующих патологических состояний:

1. острых и хронических лейкозов, когда число лейкоцитов в 1 мкл крови может достигать 500000-600000 и более за счет выплывания из органов кроветворения патологически незрелых клеток;
2. острых инфекционных заболеваний (за исключением брюшного тифа, бруцеллеза), большинства вирусных инфекций; воспалительных заболеваний (перикардит, крупозная пневмания, экссудативный плеврит) и гнойных процессов (сепсиса, рожи, менингита, перитонита). При острых инфекционных и воспалительных заболеваниях количество лейкоцитов достигает 20-30 тысяч и больше. При гнойных процессах - до 30-40 тысяч в 1 мкл. Причиной лейкоцитоза в данных случаях является стимуляция лейкопоэтической функции кроветворных органов в результате действия специфических возбудителей и факторов воспаления. Подобная реакция носит временный функциональный характер и обычно исчезает вместе с ликвидацией инфекционного агента и воспалительного очага. Этим инфекционные лейкоцитозы (лейкемоидные реакции) отличаются от лейкемий.
3. инфаркта миокарда, обширных ожогов, злокачественных опухолей и уремии. При инфаркте миокарда лейкоцитоз не более 20000, во всех остальных случаях до 30000. В этих случаях лейкощг оз является следствием реактивного возбуждения лейкопоэза в ответ на тканевой распад и эндогенную интоксикацию.
4. воздействий экзогенных токсических веществ - мышьяковистого водорода, нитробензола, угарного газа, а также действия ионизирующй радиации в ее первой стадии. Лейкоцитоз в этих случаях может быть разной степени выраженности, но чаще не более 20000.
5. значительных кровопотерь - ранений, внутренних кровотечений - лейкоцитоз достигает значений 12-15 тысяч и называется постгеморрагическим.
6. шоковых, послеоперационных состояний и эпилепсии. Эти лейкоцитозы называются нейро-гуморальными и относятся к кровораспределительным лейкоцитозам.

Возникновение лейкопений может быть связано с нарушением (торможением, угнетением) продукции созревания и выселения лейкоцитов из органов кроветворения, а также с их перераспределением в кровяном русле.

Наклонность к лейкопении (постоянной или циклической) отмечается у некоторых здоровых людей и носит нередко наследственно-семейный характер, но может зависеть от нейро-вегетативных (парасимпатических) влияний и воздействий внешней среды (например, солнечной радиации). Понижение количества лейкоцитов отмечается также
при голодании, упадке общего тонуса, во время глубокого сна.

Лейкопения характерна для следующих состояний:

1. бактериальных инфекций - брюшного тифа, бруцеллеза, затяжного септического эндокардита, вирусных заболеваний (грипп, корь, краснуха, болезнь Боткина). Количество лейкоцитов снижается до 3000 в 1 мкл крови, и зависит от угнетающего действия некоторых токсинов на лейкопоэз. Появление лейкопении при инфекционных заболеваниях, для которых характерен лейкоцитоз, свидетельствует о пониженной иммунной сопротивляемости организма, что отмечается у стариков и истощенных лиц, а также в случаях тяжелого течения заболевания.
2. различных спленомегалий с картиной гиперспленизма. "Гиперспленизм" - функциональное понятие, которое отражает тормозящее действие увеличенной повышенно функционирующей селезенки на костномозговое кроветворение. Оно проявляется в задержке выхождения из костного мозга гранулоцитов, что создает картину селезеночной гранулоцитопении, но может характеризоваться также тромбоцитопенией, анемией, а при их сочетании - панцитопенией.
3. системной красной волчанкой и некоторых других аутоиммунных состояний. Число лейкоцитов в активную фазу болезни колеблется от 4000 до 1000 в 1 мкл. Данная лейкопения связана с образованием антител к собственным лейкоцитам.
4. различных типов агранулоцитоза. Агранулоцитоз - это клинико-гематологический синдром, характеризующийся исчезновением нейтрофильных лейкоцитов в крови. Существуют агранулоцитозы медикаментозные, токсические и алиментарно- токсические (употребление в пищу испорченных перезимовавших зерновых).
5. гипопластических и апластических состояний кроветворения - врожденных и приобретенных форм, характеризующихся жировым перерождением костного мозга с частичной или тотальной редукцией кроветворения.
6. некоторых гемобластозов - алейкемических вариантов острого лейкоза. Последние три группы лейкопений относятся к органическим и характеризуются снижением количества лейкоцитов до 1000-800 и ниже в 1 мкл крови.

Способы определения количества лейкоцитов

1. Метод подсчета в камере Горяева. Взятие и разведение крови осуществляют пробирочным методом. В пробирку вносят 0,4 мл разводящей жидкости и 0,02 мл капиллярной крови. Полученное разведение 1:21 можно практически считать равным 1:20. В качестве разводящей жидкости обычно употребляют 3-5% раствор уксусной кислоты, подкрашенной метиленовым синим (уксусная кислота лизирует эритроциты, метиленовый синий окрашивает ядра лейкоцитов). Перед заполнением камеры Горяева пробирку с разведенной кровью тщательно встряхивают. Камеру заполняют так, же как для подсчета эритроцитов. Подсчет производят в 100 больших квадратах (неразграфленных). Расчет числа лейкоцитов осуществляется по формуле: В х 4000 х 20/ 1600, где В – количество лейкоцитов подсчитанных в камере. Практически для получения действительного содержания лейкоцитов в 1 мкл достаточно полученную при подсчете сумму разделить пополам и приписать два нуля. При определении количества лейкоцитов камерным методом ошибка составляет в среднем +7%.
2. Электронно-автоматический метод. Этот метод является более точным. Ошибка не превышает обычно 2-3%. Кроме этого этот метод обеспечивает более масштабное исследование.

Подсчет количества лейкоцитов крови может быть произведен в счетной камере Бюркера с сеткой Горяева или в электронно-автоматических анализаторах («Целлоскоп», «Культер», «Техникан»).

Методика подсчета в камере Бюркера с сеткой Горяева

Принцип метода: аналогичен таковому подсчету эритроцитов, суть его состоит в точном отмеривании крови и ее разведении в определенном объеме жидкости с последующим подсчетом клеточных элементов в счетной камере и пересчете полученного результата на 1 крови.

Оборудование и реактивы:

смесители или пробирки для подсчета лейкоцитов;

3% раствор уксусной кислоты, к которому прибавлено несколько капель метилвиолета или метиленового синего;

счетная камера;

микроскоп.

Смеситель для лейкоцитов отличается от такового для эритроцитов тем, что имеет более широкий просвет капилляра и меньший по величине резервуар. На смеситель нанесены три метки: 0,5, 1,0 и 11. Это позволяет развести кровь в 10 либо в 20 раз (чаще разводят в 20 раз).

Ход исследования: при взятии крови для подсчета лейкоцитов с кожи предварительно удаляют ватным тампоном остатки крови и, слегка сдавливая палец, выпускают свежую каплю крови. При работе со смесителями кровь набирают до метки 0,5, затем разводят 3 % раствором уксусной кислоты до метки 11. Энергично встряхивают в течение 3 мин, после чего сливают 1-2 капли и заполняют счетную камеру. При работе с пробирками для подсчета лейкоцитов наливают 0,4 мл 3% раствора уксусной кисло ты и в нее выпускают 0,02 мл крови, отмеренной пипеткой от гемометра Сали. Тщательно встряхивают пробирки, затем в жидкость опускают пипетку и, набрав содержимое, заполняют счетную камеру. Так как лейкоцитов гораздо меньше, чем эритроцитов, то для получения достоверного и точного результата подсчет производят в 100 больших (неразграфленных) квадратах. Обычно в одном большом квадрате находится 1-2 лейкоцита. Число лейкоцитов в 1 мкл крови рассчитывается аналогично расчету числа эритроцитов по формуле

X = (А х 4000 х В)/Б,

где X - количество лейкоцитов в 1 мкл крови; А - количество лейкоцитов, сосчитанных в 1600 малых квадратах; Б - количество сосчитанных малых квадратов (1600); 4000 - величина, умножая на которую, мы получаем количество клеток в 1 мкл.

Интерпретация полученных данных. Нормальное количество лейкоцитов: 4.0 – 9.0 х 10 9 /л. Уменьшение их числа в крови называется лейкопенией, увеличение - лейкоцитозом.

Лейкоцитоз может быть абсолютным (истинным) и относительным (перераспределительным).

Абсолютный лейкоцитоз – наблюдается при острых воспалительных процессах, некрозе тканей, острых бактериальных инфекциях (за исключением брюшного тифа, бруцеллеза, туляремии и др.), аллергических состояниях, злокачественных опухолях (с деструкцией тканей), закрытых травмах черепа и кровоизлияниях в мозг, диабетической и уремической коме, шоке, острой кровопотере, как первичная реакция – при лучевой болезни. Значительное повышение количество лейкоцитов встречается при лейкозах.

Относительный (перераспределительный) является следствием поступления лейкоцитов в ток крови из органов, служащих для нее депо. Это происходит после приема пищи (пищевой лейкоцитоз), горячих и холодных ванн, сильных эмоций (вегетососудистый лейкоцитоз), интенсивной мышечной работы (миогенный лейкоцитоз) и т.д.

Лейкопения. Лейкопения рассматривается как показатель угнетения функциональной способности костного мозга в результате воздействия токсических веществ (мышьяк, бензол и т.п.), некоторых медикаментов (сульфаниламиды, левомицетин, бутадион, иммуран, циклофосфан и т.п.), вирусов (гриппа, вирусного гепатита, кори и т.п.), микробов (брюшного тифа, бруцеллеза и т.п.), ионизирующей радиации, рентгеновского излучения и гиперспленизма (увеличение функции селезенки).

Лейкоцитоз и лейкопения редко характеризуются пропорциональным увеличением (снижением) суммарного числа лейкоцитов всех видов (например лейкоцитоз при сгущении крови); в большинстве случаев имеется увеличение (уменьшение) числа какого-либо одного типа клеток, поэтому применяют термины «нейтрофилез», «нейтропения», «лимфоцитоз», «лимфопения», «эозинофилия», «эозинопения», «моноцитоз», «моноцитопения», «базофилия».

При клинической оценке изменения количества лейкоцитов большое значение придается процентному соотношению отдельных форм лейкоцитов, то есть лейкоцитарной формуле.

Лейкоцитарная формула крови здорового человека:

Относительное количество Абсолютное количество

Базофилы……………………….0-1% 0-0,0650 х 10 9 /л

Эозинофилы…………………….0.5-5% 0,02-0,30 х 10 9 /л

Нейтрофилы: - миелоциты…………0% отсутствуют

Метамиелоциты……0% отсутствуют

Палочкоядерные…...1-6% 0,040-0,300 х 10 9 /л

Сегментоядерные….47-72% 2,0-5,5 х 10 9 /л

Лимфоциты……………………….19-37% 1,2-3,0 х 10 9 /л

Моноциты………………………….3-11% 0,09-0,6 х 10 9 /л

Подсчет лейкоцитарной формулы производят в окрашенных мазках периферической крови. Для правильной интерпрепатации результатов исследования лейкоцитарной формулы рекомендуется производить подсчет в абсолютных количествах, а не в относительных. Наиболее распространены методы окраски мазков по Романовскому-Гимзе, по Паппенгейму. Под иммерсией считают не менее 200 клеток, а затем выводят процентное соотношение отдельных видов лейкоцитов. Анализ лейкограммы с учетом других показателей крови и клинической картины является ценным методом обследования, помогает в постановке диагноза и определении прогноза заболевания.

Основные причины нейтрофилеза.

Острые бактериальные инфекции – локализированные и генерализованные.

Воспаление или некроз ткани.

Миелопролиферативные заболевания.

Интоксикация.

Лекарственные воздействия (кортикостероиды).

Острые кровотечения.

Основные причины нейтропении.

Инфекции – бактериальные (брюшной тиф, бруцеллез, туляремия, паратифы) и вирусные (инфекционный гепатит, корь, грипп, краснуха и другие).

Миелотоксические влияния и супрессия гранулоцитопоэза (ионизирующая радиация; химические агенты – бензол, анилин, ДДТ; лекарственные воздействия – цитостатики и иммунодепрессанты; витамин-В 12 -фолиеводефицитная анемия, острый алейкемический лейкоз, апластическая анемия).

Воздействие антител (иммунные формы) – гиперчувтвительность к медикаментам, аутоиммунные заболевания (СКВ, ревматоидный артрит, хронический лимфолейкоз), изоиммунные проявления (гемолитическая болезнь новорожденных).

Перераспределение и депонирование в органах – шоковые состояния, заболевания со спленомегалией и гиперспленизмом.

Наследственные формы (семейная доброкачественная хроническая нейтропения).

Основные причины эозинофилии.

Аллергические заболевания.

Хронические поражения кожи - псориаз, пузырчатка, экзема.

Опухоли (эозинофильные варианты лейкоза).

Другие заболевания – фибропластический эндокардит Леффлера, скарлатина.

В фазе выздоровления при инфекциях и воспалительных заболеваниях (благоприятный прогностический признак).

Причины эозинопении (анэозинофилии).

Повышенная адренокортикостероидная активность в организме.

Брюшной тиф.

Основные причины базофилии:

Хронический миелолейкоз и эритремия.

Основные причины моноцитоза.

Подострые и хронические бактериальные инфекции.

Гемобластозы – моноцитарный лейкоз, лимфогранулематоз, лимфомы.

Другие состояния – СКВ, саркоидоз, ревматоидный артрит, инфекционный моноцитоз; в период выздоровления от инфекций, при выходе из агранулоцитоза, после спленэктомии.

Снижение числа моноцитов имеет значение главным образом при оценке лимфоцитарно-моноцитарного соотношения при легочном туберкулезе.

Основные причины лимфоцитоза.

Инфекции – острые вирусные (инфекционный мононуклеоз, корь, краснуха, ветряная оспа), хронические бактериальные (туберкулез, сифилис, бруцеллез), протозойные (токсоплазмоз).

Гемобластозы (лимфолейкоз, лимфомы).

Другие заболевания - гипертиреоз, аддисонова болезнь, витамин-В 12 -фолиево-дефицитная анемия, гипо- и апластические анемии.

Лимфоцитопения наблюдается при СКВ, лимфогранулематозе, распространенном туберкулезе лимфоузлов, в терминальной стадии почечной недостаточности, острой лучевой болезни, иммунодефицитных состояниях, приеме глюкокортикоидов.

Увеличение или уменьшение числа отдельных видов лейкоцитов в крови может быть относительным или абсолютным. Если изменяется только процентное содержание того или иного вида лейкоцитов, то имеет место относительная нейтрофилия, относительная эозинопения и т.д. Увеличение или уменьшение абсолютного содержания какого-либо вида лейкоцитов, то есть количества данных клеток в единице объема крови, называют абсолютной нейтрофилией, абсолютной эозинопенией и т.д.

Сдвиг формулы влево (увеличение количества молодых форм нейтрофилов) – признак воспаления или некротического процесса в организме.

Сдвиг лейкоцитарной формулы вправо характерен для лучевой болезни и витамин-В 12 -фолиеводефицитной анемии.

Отсутствие или значительное снижение числа всех видов зернистых лейкоцитов – гранулоцитов (нейтрофилов, эозинофилов, базофилов) обозначают термином агранулоцитоз. В зависимости от механизма возникновения различают миелотоксический (воздействие ионизирующего излучения, прием цитостатиков) и иммунный (гаптеновый и аутоиммунный агранулоцитоз).

Методика подсчета в камере Бюркера с сеткой Горяева

Оборудование и реактивы:

смесители или пробирки для подсчета лейкоцитов;

3% раствор уксусной кислоты, к которому прибавлено несколько капель метилвиолета или метиленового синего;

счетная камера;

микроскоп.

X = (А х 4000 х В)/Б,

Лейкоцитоз может быть абсолютным (истинным) и относительным (перераспределительным).

Лейкоцитарная формула крови здорового человека:

Относительное количество Абсолютное количество

Базофилы……………………….0-1% 0-0,0650 х 10 9 /л

Эозинофилы…………………….0.5-5% 0,02-0,30 х 10 9 /л

Нейтрофилы: - миелоциты…………0% отсутствуют

Метамиелоциты……0% отсутствуют

Палочкоядерные…...1-6% 0,040-0,300 х 10 9 /л

Сегментоядерные….47-72% 2,0-5,5 х 10 9 /л

Лимфоциты……………………….19-37% 1,2-3,0 х 10 9 /л

Моноциты………………………….3-11% 0,09-0,6 х 10 9 /л

Основные причины нейтрофилеза.

Острые бактериальные инфекции – локализированные и генерализованные.

Воспаление или некроз ткани.

Миелопролиферативные заболевания.

Интоксикация.

Лекарственные воздействия (кортикостероиды).

Острые кровотечения.

Основные причины нейтропении.

Наследственные формы (семейная доброкачественная хроническая нейтропения).

Основные причины эозинофилии.

Аллергические заболевания.

Хронические поражения кожи - псориаз, пузырчатка, экзема.

Опухоли (эозинофильные варианты лейкоза).

Другие заболевания – фибропластический эндокардит Леффлера, скарлатина.

В фазе выздоровления при инфекциях и воспалительных заболеваниях (благоприятный прогностический признак).

Причины эозинопении (анэозинофилии).

Повышенная адренокортикостероидная активность в организме.

Брюшной тиф.

Основные причины базофилии:

Хронический миелолейкоз и эритремия.

Основные причины моноцитоза.

Подострые и хронические бактериальные инфекции.

Гемобластозы – моноцитарный лейкоз, лимфогранулематоз, лимфомы.

Основные причины лимфоцитоза.

Гемобластозы (лимфолейкоз, лимфомы).

Сдвиг лейкоцитарной формулы вправо характерен для лучевой болезни и витамин-В 12 -фолиеводефицитной анемии.

Количество лейкоцитов в крови зависит как от скорости их образования, так и от мобилизации их из костного мозга, а также от их утилизации и миграции в ткани (в очаги повреждения), захвата легкими и селезенкой. На эти процессы, в свою очередь, влияет ряд физиологических факторов, и поэтому число лейкоцитов в крови здорового человека подвержено колебаниям: оно повышается к концу дня, при физической нагрузке, эмоциональном напряжении, приеме белковой пищи, резкой смене температуры окружающей среды.

Количественное определение лейкоцитов

Лейкоциты подсчитываются с использованием камеры Горяева и с помощью автоматических счетчиков.

Подсчет лейкоцитов с помощью камеры Горяева

При пробирочном методе взятия крови для подсчета лейкоцитов:

в пробирку наливают 0,4 мл раствора 3–5% уксусной кислоты, подкрашенной метиленовой синью. Капиллярной пипеткой набирают из свежей капли 20 мкл крови (разведение в 20 раз), осторожно выдувают ее в пробирку с реактивом и ополаскивают пипетку. Смесь хорошо перемешивают;
чистое и сухое покровное стекло притирают к камере так, чтобы в месте соприкосновения образовались радужные кольца;
кровь, разведенную в пробирке, хорошо перемешивают. Концом круглой стеклянной палочки отбирают каплю крови и подносят к краю шлифованного стекла камеры;
после заполнения камеры ее оставляют на 1 мин в покое для оседания лейкоцитов;
считают лейкоциты при малом увеличении (объектив ×8 или ×9, окуляр ×10 или ×15) при затемненном поле зрения (при опущенном конденсоре или суженной диафрагме);
для получения удовлетворительных результатов подсчитывают лейкоциты в 100 больших квадратах.

Зная объем большого квадрата и степень разведения крови, находят количество лейкоцитов в 1 мкл и 1 л крови. Сторона большого квадрата равна 1/5 мм, площадь - 1/25 мм2, объем пространства над этим квадратом - 1/250 мм3.

Формула для подсчета лейкоцитов:

где В - количество лейкоцитов в 100 больших квадратах;
П - степень разведения (20).

Количественное содержание лейкоцитов

Норма: 4,0–9,0 × 10 9 /Л

Увеличение количества лейкоцитов выше 9,0 × 10 9 /л называется
лейкоцитозом, уменьшение их числа ниже 4,0 × 10 9 /л - лейкопенией. Однако даже 3,5 × 10 9 в 1 л лейкоцитов для ряда лиц может являться нормой. По данным литературы, у таких людей повышена иммунная сопротивляемость и они реже болеют, что, по-видимому, объясняется необходимостью для осуществления иммунных реакций наличия резерва лейкоцитов в тканях, где их в 50–60 раз больше, чем в кровяном русле. Очевидно, именно у здоровых лиц с низким содержанием лейкоцитов в периферической крови соответственно увеличены резервы их в тканях. Объясняют этот феномен наследственно-семейным характером или повышением влияния парасимпатической нервной системы.

Лейкопения может быть функциональной и органической.
Функциональная лейкопения связана с нарушением регуляции кроветворения и наблюдается:

при некоторых бактериальных и вирусных инфекциях (брюшной тиф, грипп, оспа, краснуха, болезнь Боткина, корь);
при действии лекарственных препаратов (сульфаниламидов, анальгетиков, противосудорожных, антитиреоидных, цитостатических и других препаратов);
при мышечной работе, введении чужеродного белка, нервных и температурных влияниях, голодании, гипотонических состояниях;
ложная лейкоцитопения может быть связана с агрегацией лейкоцитов во время длительного хранения крови при комнатной температуре (более 4 ч).

Органическая лейкопения, возникающая в результате аплазии костного мозга и замещения его жировой тканью, бывает при:

апластической анемии;
агранулоцитозе;
лейкопенической форме лейкоза;
некоторых формах лимфогранулематоза;
ионизирующем облучении;
гиперспленизме (первичном и вторичном);
коллагенозах.

Лейкоцитоз

Лейкоцитоз - это реакция кроветворной системы на воздействие
экзогенных и эндогенных факторов. Различают физиологический и патологический лейкоцитоз.

Физиологический лейкоцитоз бывает:

пищеварительный - после приема пищи, в особенности богатой белками; число лейкоцитов не превышает 10,0–12,0 × 10 9 /л и через 3–4 часа возвращается к норме;
при эмоциональном напряжении (выделение адреналина), тяжелой физической нагрузке, охлаждении, чрезмерном пребывании на солнце (солнечные ожоги), введении ряда гормонов (катехоламинов, глюкокортикостероидов и др.), во второй половине беременности, во время менструаций и обусловлен неравномерным распределением лейкоцитов в кровяном русле.

Патологический лейкоцитоз делится на абсолютный и относительный.

Абсолютный лейкоцитоз - повышение числа лейкоцитов в крови до нескольких сотен тысяч (100,0–600,0 × 10 9 /л и более).

Наиболее часто наблюдается при лейкозах: при хроническом лейкозе - в 98–100 % случаев, при острых лейкозах - в 50–60 %. Изменение соотношения клеток лейкоцитарного ряда в пунктате костного мозга и в крови служит основой диагностики лейкозов.

Относительный лейкоцитоз наблюдается:

при острых воспалительных и инфекционных процессах, исключение составляют брюшной тиф, грипп, оспа, краснуха, бо лезнь Боткина, корь. Наибольший лейкоцитоз (до 70,0–80,0 × 10 9 /л) отмечается при сепсисе;
под влиянием токсических веществ (ядов насекомых, эндотоксинов), ионизирующей радиации (сразу после облучения);
в результате действия кортикостероидов, адреналина, гистамина, ацетилхолина, препаратов наперстянки;
при распаде ткани (некрозе), инфаркте миокарда, тромбозе периферических артерий с развитием гангрены, ожогах, экссудативном плеврите, перикардите, уремии, печеночной коме;
значительных кровопотерях при ранениях, внутренних, гинекологических и других кровотечениях.

Повышение числа лейкоцитов при инфекционных заболеваниях в большинстве случаев сопровождается сдвигом лейкоцитарной формулы влево