Розшифрування каріотипу. Як і навіщо проводять каріотипування для майбутніх мам та тат — механізм обстеження. Як довго виконується аналіз і чому

Один із методів цитогенетичного дослідження, спрямований на вивчення хромосом – це каріотипування. Аналіз має низку показань до проведення, і навіть кілька видів.

Каріотип є набір хромосом людини. У ньому описані всі особливості генів: розмір, кількість, форма. У нормі геном складається з 46 хромосом, з них 44 аутосомні, тобто відповідають за спадкові ознаки (колір волосся та очей, форма вух та інші). Остання пара – це статеві хромосоми, які визначають каріотип: жінки 46ХХ та чоловіки 46ХУ.

У процес діагностики виявляються будь-які порушення геному:

• Зміни кількісного складу.
• Порушення структури.
• Порушення якості.

Як правило, каріотипування проводиться новонародженим визначення генетичних аномалій. Аналіз показаний і для подружніх пар, які планують вагітність. У цьому випадку дослідження дозволяє виявити невідповідність генів, що може спричинити народження дитини зі спадковими патологіями.

Види молекулярного каріотипування:

1. Таргетне

Призначається для підтвердження різних аномалій та синдромів. Дозволяє визначити причини втрати вагітності: завмерлий плід, викидень, переривання за медичними показаннями. Визначає етіологію додаткового набору хромосом при триплоїдії. Аналіз виконується на мікроматриці з 350 тисячами маркерів, зосереджених у клінічно значущих ділянках хромосом. Роздільна здатність даного дослідження від 1 млн. п.н.

1. Стандартне

Виявляє порушення у геномі клінічної значущості. Діагностує мікроделеційні синдроми та патології, пов'язані з аутосомно-домінантними хворобами. Визначає причини хромосомних аномалій при недиференційованих синдромах у пацієнтів з аномаліями розвитку, уродженими вадами, затримкою психомоторного розвитку, аутизмом.

Дозволяє виявити хромосомні аномалії у пренатальній періоді. Методика визначає анеуплоїдії, патологічні мікроделеції у плода. Дослідження проводиться на мікроматриці з 750 тис. маркерів високої щільності, які покривають усі значні ділянки геному. Роздільна здатність стандартного аналізу на каріотип від 200 тис. п.н.

1. Розширене

Дозволяє встановити причини хромосомних аномалій при недиференційованих синдромах у дітей. Виявляє патогенні делеції, тобто зникнення ділянок хромосом та дуплікації – додаткові копії генів. Діагностує ділянки із втратою гетерозиготності, причини аутосомно-рецесивних патологій.

Розширений хромосомний мікроматричний аналіз проводять за допомогою мікроматриці високої густини, яка містить понад 2,6 млн. окремих маркерів високої густини. Роздільна здатність цього дослідження дозволяє покрити весь геном і становить від 50 тис. п.н. Завдяки цьому всі ділянки генного коду вивчаються з граничною точністю, що дає змогу виявити найдрібніші структурні порушення.

Як правило, аналіз на каріотип проводиться за призначенням генетика. Залежно від лікарських показань може бути призначений один із перелічених вище видів. Стандартне дослідження коштує дешевше, але призначається дуже рідко, оскільки не виявляє багатьох хромосомних порушень. Таргетне каріотипування є більш дорогим аналізом, тому призначається за наявності клінічних ознак синдромів та інших аномалій. Розширена діагностика є найдорожчою та найбільш інформативною, оскільки дозволяє повністю вивчити всі 23 набори хромосом.

Де здати аналіз на каріотип?

Хромосомний мікроматричний аналіз складають за призначенням лікаря-генетика. Дослідження спрямоване на вивчення геному пацієнта та виявлення будь-яких аномалій у його будові.

Хромосоми – це нитки ДНК, їх кількість та структура має свою специфіку для кожного виду. У людському організмі міститься 23 пари хромосом. Одна пара визначає статеву приналежність: у жінок 46ХХ хромосоми, а чоловіки 46ХY. Інші гени є аутосомами, тобто нестатевими.

Особливості каріотипування:

• Аналіз проводиться 1 раз, оскільки хромосомний набір не змінюється протягом усього життя.
• Дозволяє встановити причини репродуктивних проблем у подружжя.
• Діагностує множинні вади розвитку у дітей.
• Виявляє генетичні відхилення.

Каріотип здають у спеціалізованій медичній лабораторії чи генетичному центрі. Дослідження проводить кваліфікований лікар. Зазвичай, аналізи готові протягом 1-2 тижнів. Отримані результати розшифровує генетик.

Показання аналізу на каріотип

Процедуру каріотипування призначають новонародженим немовлятам для виявлення генетичних відхилень та спадкових патологій, а також чоловікам та жінкам на етапі планування вагітності. Також існує низка інших показань до проведення аналізу:

• Чоловіче та жіноче безпліддя невстановленого походження.
• Чоловіче безпліддя: олігозооспермія важка та необструктивна, тератозооспермія.
• Мимовільне переривання вагітності: викидні, завмерлий плід, передчасні пологи.
• Первинна аменорея.
• Випадки ранньої смерті немовлят в анамнезі.
• Діти із хромосомними аномаліями.
• Діти з множинними вродженими вадами розвитку.
• Вік батьків понад 35 років.
• Багаторазові невдалі спроби штучного запліднення ЕКЗ.
• Спадкове захворювання в одного з майбутніх батьків.
• Гормональні порушення у жінок.
• Сперматогенез невстановленої етіології.
• Близькоспоріднені шлюби.
• Несприятливе екологічне середовище проживання.
• Тривалий контакт із хімічними речовинами, опромінення.
• Шкідливі звички: куріння, алкоголь, наркотики, медикаментозна залежність.

Каріотипування дітей проводиться у таких випадках:

• Вроджені вади розвитку.
• Розумова відсталість.
• Затримка психомоторного розвитку.
• Мікроаномалії та затримка психомовного розвитку.
• Статеві аномалії.
• Порушення чи затримка статевого розвитку.
• Затримка зростання.
• Прогноз здоров'я дитини.

Який вигляд має аналіз на каріотип?

Сукупність ознак повного набору хромосом – це каріотип. Для систематизації хромосомних аналізів використовується Міжнародна цитогенетична номенклатура, яка ґрунтується на диференціальному фарбуванні геному для детального опису всіх ділянок ниток ДНК.

Дослідження дозволяє виявити:

• Трисомія – у парі є третя зайва хромосома.
• Моносомія – у парі відсутня одна хромосома.
• Інверсія – розворот ділянки геному.
• Транслокація – переміщення ділянок.
• Делеція – втрата ділянки.
• Дуплікація – подвоєння фрагмента.

Результати аналізу записують за такою системою:

1. Загальне число хромосом та набір статевих 46, XX; 46, XY.
2. Вказуються зайві та відсутні хромосоми, наприклад 47, XY + 21; 46, XY-18.
3. Коротке плече геному позначають символом р, а довге q.
4. Транслокація – t, а делеція – del, наприклад 46,XX,del(6)(p12.3)

Готовий аналіз на каріотип виглядає так:

• 46, XX – норма жінка.
• 46, XY - норма чоловік.
• 45, X - синдром Шерешевського-Тернера.
• 47 XXY – синдром Клайнфельтера.
• 47, XXX - трисомія по Х-хромосомі.
• 47, XX (XY), + 21 – синдром Дауна.
• 47, XY (XX), + 18 – синдром Едвардса.
• 47, XX (XY) + 13 - синдром Патау.

Цитогенетичне дослідження виявляє різні аномалії у будові ниток ДНК. Також аналіз діагностує схильність до багатьох захворювань: ендокринні патології, гіпертонія, ураження суглобів, інфаркт міокарда та інші.

, , , , , , ,

Підготовка

Для аналізу на каріотип використовують кров'яні клітини, тому дуже важливо правильно підготуватись до діагностики.

Підготовка до хромосомного дослідження починається за 2 тижні до його здачі та складається з виключення впливу на організм таких факторів:

• Гострі та хронічні захворювання.
• Прийом лікарських засобів.
• Вживання алкоголю та наркотичних речовин, куріння.

Техніка проведення аналізу на каріотип

Геном людини не можна побачити неозброєним оком, хромосоми видно лише під мікроскопом на певних фазах поділу клітин. Для визначення каріотипу використовують одноядерні лейкоцити, фібробласти шкіри або клітини кісткового мозку. Для дослідження підходять клітини у метафазі мітозу. Біологічну рідину поміщають у пробірку з літієм та гепарином. Кров культивують протягом 72 годин.

Потім культура збагачується спеціальними речовинами, які зупиняють розподіл клітин на необхідній для діагностики фазі. З культури роблять препарати на скла, які підлягають дослідженню. Додаткову інформацію про стан геному одержують за допомогою його забарвлення. Кожна хромосома має смугастість, яка чітко видно після фарбування.

При класичному хромосомному дослідженні фарбування проводять різними барвниками та їх сумішами. Барвник по-різному пов'язується з окремими ділянками геному, роблячи забарвлення нерівномірним. Завдяки цьому утворюється комплекс поперечних міток, що відбивають лінійну неоднорідність хромосоми.

Основні методи фарбування:

• Q – дає зображення із високою деталізацією. Даний метод отримав назву фарбування за Касперссоном акрихін-іпритом з діагностикою під флуоресцентним мікроскопом. Застосовується для аналізу генетичної статі, виявлення транслокацій між X та Y, Y та аутосомами, а також для скринінгу мозаїцизму з Y хромосомами.
• G – модифікований метод з Романівського-Гімзи. Має більш високу чутливість у порівнянні з Q. Застосовується як стандартний метод цитогенетичного аналізу. Виявляє невеликі аберації, маркерні хромосоми.
• R – застосовується виявлення гомологічних G і Q негативних ділянок. Обробку геному проводять акридиновим помаранчевим барвником.
• C – аналізує центромірні області хромосом з конститутивним гетерохроматином та веріабельною дистальною частиною Y.
• T – використовується для аналізу тіломірних ділянок ДНК ниток.

Пофарбовані та зафіксовані клітини фотографують під мікроскопом. З одержаного набору фотографій формують нумерований набір пар аутосом, тобто систематизований каріотип. Зображення ниток ДНК орієнтують вертикально, нумерація залежить від розміру, причому пара статевих хромосом закриває набір.

Препарати крові аналізують під мікроскопом по 20-100 метафазних пластинок для виявлення кількісних та структурних аберацій.

• Кількісні аберації – це зміна числа генів. Подібне спостерігається при синдромі Дауна, коли є зайва 21 хромосома.
• Структурні аберації – це зміна самих хромосом. Це може бути випадання ділянки геному, перенесення однієї частини на іншу, поворот на 180 градусів та інше.

Техніка проведення каріотипування є трудомістким процесом. Дослідження проводять спеціалісти високої кваліфікації. Для діагностики геному однієї людини може знадобитися цілий робочий день.

Аналіз на каріотип подружжя

Одружуючись багато пар стикаються з проблемою зачаття. Для вирішення репродуктивних проблем показано цитогенетичний аналіз. Каріотипування подружжя дозволяє виявити аномалії у будові геному, які заважають завести дітей або порушують процес виношування. Змінити каріотип неможливо, але завдяки діагностиці можна встановити справжні причини безпліддя та переривання вагітності, знайти шляхи їх вирішення.

Хромосомний мікроматричний аналіз проводиться для виявлення відхилень структури будови та числа ниток ДНК, які можуть бути причиною спадкових захворювань у майбутньої дитини чи безплідності подружжя. Існують міжнародні стандарти щодо аналізу у майбутніх батьків:

• Хромосомні патології у роді, у ній.
• Невиношування вагітності в анамнезі.
• Вік вагітної старше 35 років.
• Тривалі мутагенні на організм.

На сьогоднішній день використовують такі методи каріотипування:

1. Аналіз хромосом у клітинах крові.

Дозволяє виявити випадки безпліддя, коли шанс завести дитину суттєво знижений або повністю відсутня в одного з подружжя. Також обстеження визначає ризик нестабільності геному. Для лікування відхилень пацієнтам можуть бути призначені антиоксиданти та імуномодулятори, які знижують збої зачаття.

Для дослідження проводять забір венозної крові. З біологічної рідини виділяють лімфоцити, які стимулюють у пробірці, обробляють спеціальною речовиною, фарбують та вивчають. Наприклад, при синдромі Клайнфельтера, який проявляється чоловічим безпліддям, у каріотипі є зайва хромосома 47 ХХ. Також можуть бути виявлені структурні зміни геному: інверсія, делеція, транслокація.

1. Пренатальне дослідження.

Визначає хромосомні патології плода на ранніх термінах вагітності. Таке дослідження необхідне для діагностики генетичних захворювань чи вад розвитку, які призводять до внутрішньоутробної загибелі плода.

Для проведення дослідження можуть бути використані такі методи:

• Неінвазивні – безпечні для матері та плоду. Діагностику проводять за допомогою УЗД дитини та розгорнутого біохімічного аналізу крові жінки.
• Інвазивні – біопсія хоріону, кордоцентез, плацентоцентез, амніоцентез. Для аналізу проводять забір клітин плаценти чи хоріону, навколоплідних вод чи крові з пуповини. Незважаючи на високу точність діагностики, інвазивні методики мають підвищений ризик ускладнень, тому проводяться лише за суворими лікарськими показаннями: виявлені під час УЗД патології плода, породілля старше 35 років, батьки з хромосомними аномаліями, зміна біохімічних маркерів крові.

Для цитогенетичного дослідження можна використовувати як кров, а й еякулят. Даний метод називається Tunel і дозволяє визначити одну з найпоширеніших причин чоловічої безплідності за умови нормального каріотипу - фрагментацію сперматозоїдів ДНК.

При виявленні генних мутацій або хромосомних аберацій в одного з подружжя лікар розповідає про можливі ризики та ймовірність народження дитини з відхиленнями. Оскільки генні патології невиліковні, подальше рішення подружжя приймає самостійно: скористатися донорським матеріалом (сперма, яйцеклітина), ризикнути народити чи залишитися без дітей.

Якщо відхилення в геномі виявлені в процеси виношування, причому як у жінки, так і ембріона, то лікарі рекомендують переривати такі вагітності. Це пов'язано з підвищеним ризиком народження малюка із серйозними, а в деяких випадках і несумісними із життям відхиленнями. Проведенням аналізів та розшифровкою їх результатів займається лікар-генетик.

, , , ,

Аналіз крові на каріотип

Найчастіше каріотипування проводять за аналізом венозної крові за допомогою культивування її клітин. Але для проведення цитогенетичного дослідження може бути використаний і інший біологічний матеріал:

• Клітини із навколоплідних вод.
• Плацента.
• Клітини ембріонів.
• Абортивний матеріал.
• Кістковий мозок.

Те який матеріал буде взято на діагностику, залежить від причини та завдання аналізу. Зразковий алгоритм дослідження крові:

• Невеликий об'єм рідини на 72 години поміщають у живильне середовище при температурі 37С.
• Оскільки хромосоми видно на стадії метафази поділу клітин, то біологічне середовище додають реактив, який зупиняє процес поділу в необхідній фазі.
• Культуру клітин забарвлюють, фіксують та аналізують під мікроскопом.

Аналіз крові на каріотип забезпечує високоточне виявлення будь-яких аномалій у будові ниток ДНК: внутрішньохромосомних та міжхромосомних перебудов, зміни порядку розташування фрагментів геному та інше. Основна мета діагностики полягає у виявленні генетичних захворювань.

, , , , ,

Генетичний аналіз на каріотип

Цитогенетична діагностика, спрямовану вивчення розміру, числа і форми хромосом – це генетичне каріотипування. Аналіз має такі показання до проведення:

• Виявлення уроджених дефектів.
• Ризик народження дитини із спадковими патологіями.
• Підозра на безплідність.
• Порушення спермограми.
• Невиношування вагітності.
• Складання плану лікування деяких видів пухлинних новоутворень.

Також генетичний аналіз на каріотип входить до списку обов'язкових для подружжя, яке планує заводити дітей.

Найчастіше дослідження виявляє такі патології:

1. Анеуплодія – це зміна числа хромосом як у бік збільшення, і зменшення. Порушення балансу призводить до викиднів, народження немовлят з тяжкими вродженими патологіями. Мозаїчна форма анеуплодії викликає синдром Дауна, синдром Едвардса та інші дуже часто несумісні із життям захворювання.
2. Перебудова каріотипу – якщо зміни збалансовані, хромосомний набір не порушений, а просто по-іншому впорядкований. При незбалансованих змінах є загроза генних мутацій, що особливо небезпечно для майбутніх поколінь.
3. Транслокація – це незвичайна структура ниток ДНК, тобто заміщення одного фрагмента геному іншим. Найчастіше передається у спадок.
4. Порушення статевого диференціювання – вкрай рідкісне хромосомне порушення, яке завжди виявляється зовнішніми симптомами. Невідповідність фенотипічній підлозі може бути однією з причин безпліддя.

Аналіз на каріотип виконують у генетичних лабораторіях, кваліфіковані лікарі генетики.

Аналіз на каріотип з абераціями

Аберації – це порушення у будові хромосом, спричинені їх розривами та перерозподілом із втратою чи подвоєнням генетичного матеріалу. Каріотипування з абераціями - це дослідження, спрямоване на виявлення будь-яких змін у будові геному.

Види аберацій:

• Кількісні – порушення числа хромосом.
• Структурні – порушення будови геному.
• Регулярні – визначаються у більшості або у всіх клітинах організму.
• Нерегулярні – виникають через на різних несприятливих чинників (віруси, випромінювання, хімічне вплив).

Аналіз встановлює каріотип, його особливості, ознаки впливу різних негативних чинників. Хромосомне дослідження з абераціями проводиться у таких випадках:

• Безпліддя у шлюбі.
• Мимовільні викидні.
• Випадки мертвонародження в анамнезі.
• Рання дитяча смертність.
• Застигла вагітність.
• Вроджені вади розвитку.
• Порушення статевого диференціювання.
• Підозрі на хромосомні патології.
• Затримка розумового, фізичного розвитку.
• Обстеження перед ЕКЗ, ІКСІ та іншими репродуктивними процедурами.

На відміну від класичного каріотипування, цей аналіз займає більше часу на проведення і коштує дорожче.

Аналіз на каріотип дитині

Згідно з медичною статистикою, уроджені патології займають вагоме значення серед причин смертності дітей раннього віку. Для своєчасного виявлення генетичних аномалій та спадкових захворювань, дитині проводять аналіз на каріотип.

• Найчастіше у дітей діагностують трисомію – синдром Дауна. Дана патологія зустрічається у 1 з 750 малюків і проявляється різноманітних відхилень як у фізичному, так і інтелектуальному розвитку.
• На другому місці за поширеністю синдром Клайнфельтера. Він проявляється затримкою статевого розвитку у підлітковому віці і виникає у 1 із 600 новонароджених чоловічої статі.
• Ще одна генетична патологія, що діагностується у 1 із 2500 дітей жіночої статі – це синдром Шерешевського-Тернера. У дитячому віці дане захворювання дається взнаки підвищеною пігментацією шкірних покривів, набряклістю стоп, кистей рук і гомілок. У період статевого дозрівання спостерігається відсутність менструації, волосяного покриву пахвами та на лобку, також не розвинені молочні залози,

Каріотипування необхідне не тільки для малюків з видимими відхиленнями, тому що це дозволяє запідозрити генетичні проблеми та розпочати їхню корекцію. Аналіз здають у медико-генетичному центрі. Залежно від віку дитини кров може бути взята з п'яти або з вени. При необхідності генетик може вимагати здати аналіз на каріотип та батьків.

Аналіз на каріотип новонародженого

Неонатальний скринінг – перший аналіз, який виконують новонародженим. Дослідження проводять у пологовому будинку на 3-4 день життя, для недоношених малюків на 7 день. Раннє каріотипування дозволяє виявити генетичні відхилення та порушення структури ДНК до появи видимих ​​патологічних симптомів.

Для проведення ранньої діагностики використовують кров із п'яти немовляти. Цитогенетичне дослідження спрямоване на виявлення таких поширених серед малюків патологій, як:

• Фенілкетонурія – спадкове захворювання, що характеризується зниженням активності або відсутністю ферменту, що розщеплює амінокислоту фенілаланін. При прогресуванні призводить до порушень у роботі головного мозку та розумової відсталості.
• Муковісцидоз – вражає залози, що виробляють секрети, травні соки, піт, слину, слиз. Викликає порушення у роботі легень та органів ШКТ. Хвороба передається у спадок.
• Вроджений гіпотиреоз – ураження щитовидної залози з недостатнім виробленням її гормонів. Приводить до затримки фізичного та розумового розвитку.
• Адреногенітальний синдром - патологічний стан при якому кора надниркових залоз продукує недостатню кількість гормонів. Через це порушується розвиток статевих органів.
• Галактезимія – патологія, при якій порушується трансформація галактози в глюкозу. Лікування складається із відмови від молочних продуктів. Без своєчасної діагностики може стати причиною сліпоти та смерті.

Якщо за результатами аналізу на каріотип у новонародженого виявлено будь-які відхилення або аномалії, то проводиться комплекс додаткових досліджень для уточнення діагнозу. Така рання діагностика дозволить своєчасно виявити будь-які проблеми в дитячому організмі та розпочати їх лікування.

, , , , , ,

Скільки робиться аналіз на каріотип?

Тривалість хромосомного дослідження триває від 10 до 21 дня. Те, коли будуть готові результати, залежить від виду аналізу, тобто з абераціями або класичне каріотипування.

Каріотип відбиває хромосомний набір людини. У нормі у людини 46 хромосом чи 23 пари. 23 пара - статеві хромосоми - XX у жінки, XY у чоловіка. Аналіз на каріотиппроводиться дітям та дорослим. Каріотип дитини дозволяє виключити деякі генетичні захворювання. Каріотипування подружжя допомагає виявити генетичну причину безпліддя та невиношування вагітності, а також прогноз здорового потомства.

Що таке каріотип?

Каріотип- Повний набір хромосом у клітинах людини. Нормою вмісту хромосом у соматичних (неембріональних) клітинах людини є 46 хромосом, організованих у 23 пари. Кожна пара складається з однієї хромосоми, отриманої від матері та однієї, отриманої від батька. Для дослідження каріотипу людини береться кров із вени. У Лабораторії ЦІР каріотипування проводять цитогенетичним та молекулярно-генетичним методами. Існує також FISH-аналіз каріотипу, що дозволяє аналізувати хромосоми за допомогою флюоресцентних барвників.

Лабораторії ЦІР проводить такі аналізи каріотипування:

Перші три аналізи виконуються цитогенетичним методом. ХМА – це молекулярно-генетичний аналіз каріотипу.

Розкажемо про цитогенетичний метод виконання аналізу каріотипу.
Зовнішній вигляд хромосом суттєво змінюється протягом клітинного циклу: протягом інтерфази хромосоми локалізовані в ядрі, як правило, деспіралізовані та важкодоступні для спостереження, тому для визначення каріотипу використовуються клітини в одній із стадій їх поділу – метафазі мітозу. Хромосоми у світловому мікроскопі на стадії метафази являють собою молекули ДНК, упаковані за допомогою спеціальних білків у щільні надспіралізовані паличкоподібні структури. Таким чином, велике число хромосом упаковується в маленький об'єм і поміщається відносно невеликому об'ємі ядра клітини. Розташування хромосом, видиме мікроскопі, фотографують і з кількох фотографій збирають систематизований каріотип - нумерований набір хромосомних пар гомологічних хромосом. Зображення хромосом при цьому орієнтують вертикально, короткими плечима вгору, а їх нумерацію виробляють у порядку зменшення розмірів. Пару статевих хромосом (X і Y у чоловіка, X і X у жінки) поміщають наприкінці зображення набору хромосом.

Коли кров здається на каріотип?

Обстеження каріотип є нерутинним аналізом, до проходження якого є свої показання.

Причинами, з яких лікар може запропонувати обстеження, можуть бути:

• народження дитини з генетичною патологією або наявність хромосомної патології у родичів одного з подружжя;
• безпліддя у сім'ї;
• звичне невиношування вагітності та/або мимовільний викидень у перші 12 тижнів вагітності;
• вплив радіації, шкідливе виробництво на роботі та ін.

Який аналіз на каріотип?

Аналіз на каріотип може бути виконаний у двох варіантах: каріотипування без аберацій та каріотипування з абераціями. Перший аналіз показує генетичний набір людини – кількість хромосом та великі зміни у всіх хромосомах, отримані від батьків. Каріотипування з абераціями показує зміни, що виникають у хромосомах у процесі життя під впливом різних шкідливих факторів середовища. Аналіз на каріотип методом ХМА здають у поодиноких випадках при затримці росту у дітей, аутизмі, підозрі на мікроделеційні синдроми.

Аналіз на каріотип подружжя (каріотипування подружжя)

Для виявлення можливої ​​причини безпліддя у сім'ї лікар може призначити каріотипування подружжю. Подружжя може здати аналіз у час, це впливає інтерпретацію. За наявності припущення генетичної природі безплідності аналіз на каріотип може бути призначений одному з подружжя. .

Як здати аналіз на каріотип? Де здати аналіз на каріотип?

Аналіз на каріотип можна здати в лабораторії ЦІР будь-якої з наших клінік. Спеціальна підготовка до аналізу не потрібна. Можна здати не натще. Аналіз каріотипу без аберацій можна здати у час у години роботи клініки. Аналіз з абераціями приймаємо тільки у певні дні та години, з якими прохання ознайомитись на .

Каріотип: ціна аналізу

Дізнайтесь ціну аналізу на каріотип у нашому прайс-листі, .

Аналіз каріотипу: як проводиться дослідження каріотипу людини?

Кожна хромосома складається із спеціалізованих структур - центроміри та двох теломірів. Центромера (cen) або первинна стяжка поділяє хромосому на дві частини - довге (q) та коротке (p) плечі та відповідає за поділ хромосом під час клітинного поділу. На початок клітинного поділу хромосома складається з однієї хроматиди. Після подвоєння ДНК - із двох хроматид, до моменту поділу їх на дві нові клітини.

Для процедури визначення каріотипу цитогенетичним методомможуть бути використані будь-які популяції клітин, що діляться. Для визначення людського каріотипу використовують зазвичай лімфоцити периферичної крові. Для аналізу каріотипу у стерильну пробірку береться кров із вени. Будь-яких умов для здачі аналізу немає, перед відвідуванням лабораторії можна поснідати.

Перехід лімфоцитів від стадії спокою G0 до проліферації провокують додаванням стимулятора поділу клітин – фітогемаглютиніну. Для визначення каріотипу можуть бути використані клітини кісткового мозку або первинна культура фібробластів шкіри. Для збільшення числа клітин на стадії метафази до культури клітин незадовго перед фіксацією додають колхіцин або нокадазол, які блокують утворення мікротрубочок, тим самим перешкоджаючи розбіжності хроматид до полюсів поділу клітини та завершення мітозу.

Після фіксації препарати метафазних хромосом забарвлюють та вивчають під мікроскопом.

Для отримання класичного каріотипу використовується забарвлення хромосом різними барвниками або їх сумішами: в силу відмінностей у зв'язуванні барвника з різними ділянками хромосом фарбування відбувається нерівномірно і утворюється характерна полосчаста структура (комплекс поперечних міток, англ. banding), що відображає лінійну неоднорідність. хромосом та його ділянок (крім поліморфних районів, локалізуються різні алельні варіанти генів). Перший метод забарвлення хромосом, що дозволяє отримати такі високодеталізовані зображення, було розроблено шведським цитологом Касперссоном (Q-фарбування). Використовуються й інші барвники, такі методики отримали загальну назву диференціального фарбування хромосом.

Типи диференціального фарбування хромосом

G-фарбування- модифіковане фарбування по Романівському – Гімзі. Чутливість вища, ніж у Q-фарбування, тому використовується як стандартний метод цитогенетичного аналізу. Застосовується при виявленні невеликих аберацій та маркерних хромосом (сегментованих інакше, ніж нормальні гомологічні хромосоми).

Q-фарбування- фарбування за Касперссоном акрихін-іпритом із дослідженням під флуоресцентним мікроскопом. Найчастіше застосовується для дослідження Y-хромосом (швидке визначення генетичної статі, виявлення транслокацій між X- та Y-хромосомами або між Y-хромосомою та аутосомами, скринінг мозаїцизму за участю Y-хромосом).

R-фарбування- використовується акридиновий помаранчевий та подібні барвники, при цьому фарбуються ділянки хромосом, нечутливі до G-фарбування. Використовується для виявлення деталей гомологічних G або Q негативних ділянок сестринських хроматид або гомологічних хромосом.

C-фарбування- застосовується для аналізу центромірних районів хромосом, що містять конститутивний гетерохроматин та варіабельну дистальну частину Y-хромосоми.

T-фарбування- Застосовують для аналізу тіломірних районів хромосом.

Хромосомний мікроматричний аналіз (ХМА)

Більше сучасна технологія дослідження каріотипу. Аналіз на каріотип виконується молекулярно-генетичним методом aCGH (мікроматрична порівняльна геномна гібридизація), який на відміну від класичного цитогенетичного методу, має високу роздільну здатність, що дозволяє виявити дрібніші структурні зміни каріотипу.

Флюоресцентна гібридизація in situ, анг. Fluorescence in situ hybridization, FISH

Виявлення анеуплоїдії – порушення числа хромосом. На зображенні зелений колір відповідає 13 хромосом, а червоний - 21, що говорить про наявність триплоїдії по 21 хромосомі в даному зразку.

Останнім часом використовується методика так званого спектрального каріотипування (флюоресцентна гібридизація in situ, англ. Fluorescence in situ hybridization, FISH), яка полягає у фарбуванні хромосом набором флуоресцентних барвників, що зв'язуються зі специфічними областями хромосом. В результаті такого фарбування гомологічні пари хромосом набувають ідентичних спектральних характеристик, що не тільки суттєво полегшує виявлення таких пар, але й полегшує виявлення міжхромосомних транслокацій, тобто переміщень ділянок між хромосомами - транслоковані ділянки мають спектр, що відрізняється від спектру іншої хромосоми.

У кожній родині мріють про появу здорового потомства. Однак не завжди дівчина може завагітніти, виносити та народити повноцінну дитину. У багатьох випадках це відбувається через генетичні мутації, про які ніхто їх подружжя навіть не здогадується.

Складність у цьому, що неправильне число хромосом який завжди позначається зовнішньому вигляді. Каріотипування виявляє різноманітні захворювання, які можуть ускладнити процес виношування плода.

Що таке каріотипування?

Сам по собі каріотип - це поєднання хромосом, які містять інформацію про колір очей і волосся, зростання і форму вух людини. Геном містить у собі сорок шість хромосом, їх сорок чотири – аутосоми і одна пара визначає приналежність до підлозі.

Під час запліднення формується новий одноклітинний організм, який матиме сорок шість хромосом. Якщо їх склад та структура відхиляються від норми, у плода можуть бути патології у розвитку

Багатьох пар, які вирішили зачати дитину, цікавить, що таке каріотипування подружжя. За визначенням це метод діагностики сумісності генетично. Він дозволяє:

• виявити набір ниткоподібних структур клітинного ядра у чоловіка та жінки;
• дізнатися причину безплідності подружжя;
• визначити ризик народження немовляти із хромосомними аномаліями.

За допомогою цього аналізу можна визначити відрив частини хромосоми, виявити подвоєння спадкової інформації. До свідчень належать такі випадки:

• порушення рівня гормонів у жінки;
• поганий аналіз еякуляту у чоловіка;
• спадкові хвороби у подружжя або їх рідних;
• вік пари старше тридцяти п'яти років;
• шкідливі звички подружжя;
• шлюб із близьким родичем;
• народження малюка з відхиленнями;
• перебування за умов підвищеної радіації;
• безплідність без явної причини;
• загибель плоду, викидень.

Діагностику проводять один раз, адже набір хромосом протягом життя не змінюється.

Каріотипування - це метод діагностики сумісності генетично

Як проводять дослідження?

Щоб провести дослідження каріотипу подружньої пари, потрібно дочекатися певного стану, у якому відбувається розподіл клітинного ядра. Хромосоми неможливо розрізнити під мікроскопом, коли вони не зібрані у ньому.

Для проведення аналізу беруться клітини крові із вени. Для цього цілком вистачає невеликої пробірки. Спочатку визначають хромосомну карту чоловіка, та був жінки. Так і відбувається каріотипування подружжя.

Лаборант знаходить клітину на стадії метафази та обробляє її спеціальним барвником. Хромосоми фотографують під мікроскопом та розподіляють по порядку, щоб ідентифікувати.

Важливо грамотно підготуватися до процедури з огляду на наступні рекомендації:

1. За чотирнадцять днів до аналізу слід відмовитися від вживання спиртного, куріння та прийому медикаментів. Якщо відмінити препарати не можна, слід попередити лаборанта.
2. Останній прийом їжі має відбутися приблизно дві години до процедури.
3. Перед обстеженням необхідно заповнити спеціальну анкету.
4. Каріотипування переносять, якщо в одного з обстежуваних загострилося інфекційне захворювання.
5. Аналіз не несе жодної небезпеки для людей. Тому не варто хвилюватись перед обстеженням.

Термін дослідження перевищує час виконання нормальних аналізів крові. Справа в тому, що фахівцю потрібно знайти клітини в стані поділу і вручну ретельно фотографувати потрібні хромосоми, становлячи загальну картину.

Помилки у цій процедурі не прийнятні.

Термін проведення каріотипування може тривати кілька тижнів. За аналіз доведеться віддати близько шести тисяч карбованців

Висновок аналізу

Розшифровкою аналізу займається генетик. Залежно кількості нуклеопротеидных структур він визначає наявність патологій:

1. Моносомія. Відсутність однієї парної хромосоми призводить до ранньої смерті ембріона, синдрому Шерешевського-Тернера у дитини.
2. Трісомія. За наявності зайвої хромосоми можуть спостерігатися синдром Дауна, синдром Патау, синдром Едвардса. Подібне порушення провокує викидень у першому триместрі.
3. Деліція. Відсутність великої частини нуклеопротеїдної структури призводить до смерті плода, розвитку захворювань. Делеція у чоловіка є причиною безпліддя.
4. Інверсія. У разі розвороту ділянки хромосоми на 180 градусів відбувається загибель статевих клітин та формування у них неякісного матеріалу. В результаті збільшується ризик викидня та розвитку аномалій у дитини.
5. Транслокація. Перенесення хромосомної частини може призвести до мимовільного аборту, вроджених аномалій ембріона. У деяких випадках вона не виявляється.

За підсумками генетик записує зміни у хромосомній структурі та видає висновок.

Розшифровкою аналізу займається генетик

Якщо виявлено відхилення

Після отримання результатів дослідження фахівець проводить консультацію з подружжям та знайомить їх зі ступенем ймовірності появи на світ дитини з аномаліями у розвитку. Якщо виявлено хорошу сумісність, жодних терапевтичних заходів не потрібно і можна переходити до планування вагітності.

Виявлення зміни будови гена у чоловіка або жінки говорить про ймовірність народження неповноцінної дитини та можливі ризики при вагітності. На жаль, генні мутації не піддаються лікуванню. Подальше рішення залежить від майбутніх батьків. Вони мають кілька варіантів:

1. Використовувати сперму чи яйцеклітину донора.
2. Народити малюка із можливими аномаліями.
3. Чи не заводити дітей.

Якщо хромосомні порушення були виявлені у малюка вже в утробі, лікар зазвичай пропонує зупинити перебіг вагітності. Однак наполягати на цьому не має права!

У деяких випадках фахівець призначає курс препаратів, що зменшують ймовірність розвитку патології у потомства.

Висновок

Дане дослідження є непростою і трудомісткою роботою, яку потрібно довіряти тільки досвідченому лікарю-генетику. Тому важливо переконатися у добрій репутації медичної клініки та самого фахівця. Імовірність помилкового результату становить менше одного відсотка. Тому подружжя може бути впевнене у його достовірності.

Після одруження завданням будь-якої подружньої пари є планування потомства. Для багатьох це мрія: жити довго та щасливо у суспільстві улюблених дітей. Але сумна доля може скластися у деяких людей – їм не вдається завести дитину. Причинами можуть стати різні недуги. Чоловік вважає, що проблеми у дружини, а вона – навпаки. При цьому мало хто дивиться на проблему реально.

Насправді потрібно буде здати аналіз крові на каріотип. Щось змінити в будові хромосом подружжя неможливо. Але якщо знати ворога в обличчя (у нашому випадку першопричину безпліддя), можна позбавитися проблеми. Як альтернативу подружжю пропонується штучне запліднення.

Що таке каріотип, та інформація про аналіз

Каріотип – опис хромосом у соматичних клітинах. Інформація говорить про їх кількість, форму, габарити та особливості будівлі. Що чоловік, що жінка може носити перебудовані хромосоми, не знаючи про це. А ось зіткнутися з цим доведеться під час зачаття. Імовірність того, що дитина народиться здорова або зовсім побачить світ, мінімальна, якщо в одного з батьків є подібні порушення.

Каріотип чоловіка

Щоб провести обстеження, лікарі беруть кров, виділяючи із неї лімфоцити. Потім проводиться стимулювання відібраних лімфоцитів у пробірці. Через кілька діб їх забарвлюють, що зупиняє поділ клітин. Це дозволить показати хромосомну частину.

Аналізом передбачено виготовлення мазків для скла. Надалі цей матеріал і обстежуватиметься під мікроскопом. Лікар зможе розглянути проблеми з хромосомами, чи дружина чи чоловік матиме потомство, чи будуть у дитини дефекти.

При розшифруванні даних лаборант переглядає 11 або 13 клітин набору. Його завдання – знайти невідповідності. Якщо їх немає, то можна сміливо готуватись – кожна дитина буде здоровою.

Що покаже аналіз?

Зовнішньо міцна і здорова людина може мати певні структурні зміни на рівні хромосом. Тому аналізи показано здавати навіть тим, хто не скаржиться на проблеми із недугами, але мати дітей чомусь не може. Якщо цього не зробити, то в спробах завагітніти можна зіткнутися зі складнощами, аж до викиднів. А це справа часта.

Завдяки аналізам можна знайти патологію в дитини. Лікарі найчастіше пропонують подружжю зробити переривання вагітності.

Виявити шляхом аналізу можна таке:

1. Можливі генні реверсії. Всі вони впливають на тромбоутворення в судинах, а це призводить до порушень кровотоку, зокрема в пуповині. У результаті можливий викидень.
2. Ймовірні зміни генетично хромосоми Y в спермі чоловіка.
3. Можливу реверсію генів, які відповідають за детоксикацію. Це спричинить те, що організм жінки зможе деактивувати токсини при вагітності. В результаті можна втратити плід.

Вивчення каріотипу дозволить провести діагностику спадкової схильності до захворювань, подібних до інфаркту міокарда та цукрового діабету.

Показання до проведення аналізу

Кожна пара, яка планує немовля, має пройти процедуру каріотипування. Але багатьох може налякати вартість дослідження. Є й обхідні шляхи. Багато клінік пропонують пацієнтам провести хромосомні тести на каріотип комплексно. А це в рази зменшує вартість процедури, що робить її бажанішою для майбутніх батьків. Після хромосомних тестів можна уникнути аномалій вагітності та здоров'я майбутнього новонародженого.

Імовірність змін хромосомного типу зростає з кожним роком. Тому жінкам, які хочуть завагітніти після 35 років, рекомендується пройти аналіз каріотипу заздалегідь.

Зверніть увагу! На 380 здорових дітей на світ з'являється один із явними відхиленнями, у чому винна хромосомна аномалія.

Генетичні збої каріотипів можуть призвести до несприятливих наслідків, наприклад безпліддя. Завжди є ризик незакінченої вагітності – викидня. Тому при нерідких мимовільних абортах потрібно визначити каріотип подружжя. До свідчень, щоб складати аналіз, відносяться:

• часті зупинки розвитку плода в утробі;
• нездатність та тривалий термін зачаття;
• коли у сім'ї діти із затримкою у розвитку;
• наявність невтішного генофонду (хтось із родичів хворий на недуги, які передаються спадково або має зміни в наборі хромосом).

Каріотипування: як проводиться підготовка до аналізу

Щоб вивчити набір хромосом, потрібні клітини крові людини. Для цього береться венозна кров. Щоб результати аналізу каріотипу з лімфоцитів були успішними, потрібно провести підготовку. Вона має бути завчасною. Полягає період підготовки наступного:

• за 14 днів до обстеження припинити приймати спиртні напої, наркотики та позбутися куріння;
• виключається прийом медичних препаратів за 2 тижні до походу до клініки;
• якщо стан пацієнта погіршився внаслідок недуги будь-якої етіології, обстеження відкласти до повного одужання.

Зверніть увагу! Під час підготовки до обстеження оцінити свій стан. Будь-які нездужання можуть призвести до невірних результатів!

Якщо передбачається збирання крові у вагітної, то вибрати неінвазивний метод. Він безпечний для жінки та плоду. Найбільш точним рішенням буде інвазивна технологія. Матеріали для аналізу отримують шляхом уведення в матку спеціального інструменту. Проводиться обстеження у перший триместр виношування плода.

Аналіз на каріотип – що це та як здається?

Де здати аналіз на каріотип і як він проводиться? Це основні питання людей, які зіткнулися із проблемою. Здають аналіз у лабораторіях ЦІР. Вона є практично у кожній сучасній поліклініці. Обстеження проводиться за попереднім записом, тому отримати результати день у день не вдасться.

Для подружжя пройти обстеження можна двома доступними способами. Перший – каріотипування без аберації, а другий передбачає аберацію. Що показує кожен із них? У першому випадку буде показано генетичний набір жінки чи чоловіка. Це означає, що пара отримає інформацію про кількість хромосом, великі зміни в них. У другому варіанті є інформація про зміни, які торкнулися хромосом протягом життєвого циклу людини до моменту здачі аналізу.

Кожен із подружжя може пройти обстеження у різні проміжки часу. Розшифровка аналізу та результати при цьому не постраждають. Тому здаєте ви аналіз окремо або разом - рішення подружжя. Як здавати аналіз, ми розповіли – настав час вивчити типи фарбування хромосом.

Типи диференціального фарбування

Хромосомний аналіз потребує фарбування хромосом. Він проводиться одним із наступних способів:

1. G-фарбування. Модифікований варіант процедури. Створено на основі робіт Романовського-Гімзе. Відрізняється високою чутливістю та ефективність. Застосовується як стандартна технологія каріотипування. Лікарі проводять процедуру при виявленні несуттєвих аберацій та маркерних хромосом.
2. Q-фарбування. В основу процедури покладено роботи Касперсона. Фарбуються акрихін-іпритоми, що досліджуються під мікроскопом. Найчастіше цей спосіб застосовується для аналізу Y-хромосом.
3. R-фарбування. Аналіз на аномальний каріотип, для якого застосовується акридиновий помаранчевий барвник. Як альтернатива можуть використовуватися і його варіації. Такий метод використовується, коли технологія G-фарбування недоступна або пацієнт нечутливий. Основне завдання такого фарбування полягає у визначенні G-або Q-негативних зон гомологічних хромосом.
4. C-фарбування. Знайшов застосування у сфері діагностики, спрямованої на аналіз центромірних зон хромосом. Ці ділянки містять констритутивний гетерохроматин. C-фарбування застосовується для обстеження варіабельної дистальної ділянки Y-хромосоми.
5. T-фарбування. Використовується як каріологічний тест. Дозволяє проводити обстеження тіломірних областей хромосом.

Порушення нормального каріотипу

Виявляються ще ранніх етапах розвитку. Організм у цей час ще не зміцнів, не сформувався, а тому легко піддається впливу. Якщо вони мають місце у процесі злиття статевих клітин майбутніх батьків, то дитині загрожує те саме. Далі поділ порушеної зиготи призведе до розвитку ембріона з аномальним каріотипом. При цьому всі клітини організму будуть однакові порушення.

При цьому порушення в каріотипі мають можливість з'явитися навіть на ранніх стадіях дроблення зиготи. В організмі, який відтворено із зиготи з аномалією, буде кілька клітинних клонів. У медицині вони називаються лініями клітин, що мають різні каріотипи. Це призвело до поняття мозаїцизму (від слова «мозаїка»), що означає різноманіття каріотипів в організмі або окремих його органах.

Історія медицини свідчить, що порушення у цьому плані сприяють виникненню комплексних вад. Більшість недуг не є сумісними із нормальною життєдіяльністю чи життям взагалі. Трапляються викидні, особливо на ранній стадії вагітності. Близько 2,5% плодів доношуються до логічного завершення вагітності. Тому існує ймовірність, що дитина з'явиться на світ, хоч і буде не пристосована до нормального життя.

Термін дослідження збільшено до 21 дня.

Каріотипування (цитогенетичне обстеження) - це аналіз виявлення порушень хромосомного набору людини. При каріотипуванні виявляється кількість та будова хромосом, що дозволяє виявити хромосомні аномалії, які можуть стати причиною безпліддя, невиношування вагітності, іншої спадкової хвороби та народження хворої дитини.

Кожен організм характеризується певним набором хромосом, що називається каріотипом. Каріотип людини складається з 46 хромосом - 22 пари аутосом та дві статеві хромосоми.У жінки це дві X хромосоми (каріотип: 46, ХХ), а у чоловіків одна Х хромосома, а інша - Y (каріотип: 46, ХY). У кожній хромосомі є гени, відповідальні за спадковість. Дослідження каріотипу проводиться за допомогою цитогенетичних та молекулярно-цитогенетичних методів.
Поза процесом розподілу клітини хромосоми в її ядрі розташовані у вигляді «розпакованої» молекули ДНК, і вони важко доступні для огляду у світловому мікроскопі. Для того, щоб хромосоми та їх структура стали добре видно використовують спеціальні барвники, що дозволяють виявляти гетерогенні (неоднорідні) ділянки хромосом та проводити їх аналіз – визначати каріотип. Хромосоми у світловому мікроскопі на стадії метафази є молекулами ДНК, упаковані в щільні паличкоподібні структури. Таким чином, велике число хромосом упаковується в маленький об'єм і поміщається відносно невеликому об'ємі ядра клітини. Розташування хромосом, видиме мікроскопі, фотографують і з кількох фотографій збирають систематизований каріотип - нумерований набір хромосомних пар гомологічних хромосом. Зображення хромосом при цьому орієнтують вертикально, короткими плечима вгору, а їх нумерацію виробляють у порядку зменшення розмірів. Пару статевих хромосом поміщають наприкінці зображення набору хромосом.
Сучасні методи каріотипування забезпечують детальне виявлення хромосомних аберацій (внутрішньохромосомних та міжхромосомних перебудов), порушення порядку розташування фрагментів хромосом – делеції, дуплікації, інверсії, транслокації. Таке дослідження каріотипу дозволяє діагностувати ряд хромосомних захворювань, спричинених як грубими порушеннями каріотипів (порушення числа хромосом), так і порушенням хромосомної структури або множинністю каріотипів клітин в організмі. Порушення нормального каріотипу у людини виникають ранніх стадіях розвитку організму. Якщо це відбувається у статевих клітин майбутніх батьків, то каріотип зиготи, що утворилася при злитті батьківських клітин, також виявляється порушеним. При подальшому розподілі такої зиготи всі клітини ембріона і організму, що розвинувся з нього, виявляться з однаково аномальним каріотипом. Однак порушення каріотипу можуть виникнути і на ранніх стадіях дроблення зиготи. Розвинений з такої зиготи організм містить кілька ліній клітин (клітинних клонів) з різними каріотипами. Таке різноманіття каріотипів у всьому організмі або лише в деяких його органах називають мозаїцизмом.
Як правило, порушення каріотипу у людини супроводжуються різними, у тому числі комплексними, вадами розвитку, і більшість таких аномалій несумісні з життям. Це призводить до мимовільних абортів на ранніх стадіях вагітності. Проте досить багато плодів (~2,5%) з аномальними каріотипами доношивают до закінчення вагітності. Хромосомні аномалії у новонароджених є причиною 45-50% множинних вроджених вад розвитку, близько 35% випадків розумової відсталості та 50% відсутності менструації у жінок. У дорослих хромосомні аномалії клінічно можуть не виявлятися взагалі, або мати місце у стертих формах. Часто людина вважає себе абсолютно здоровою і не підозрює про будь-які генетичні порушення. Але вона не може мати дітей. Тому Дослідження каріотипу лімфоцитів крові рекомендується обов'язково робити всім безплідним парам.

Показання до призначення дослідження

Підготовка до дослідження