1. Общий анализ крови при бактериальных пневмониях выявляет нейтрофильный лейкоцитоз со сдвигом лейкоцитар­ной формулы влево, увеличение СОЭ. Степень этих измене­ний определяет тяжесть процесса.

При долевой (крупозной) пневмонии лейкоцитоз достига­ет 20 - 30 Ю 9 /л со сдвигом лейкоформулы влево до юных форм. Выявляется выраженная токсическая зернистость нейт- рофилов (ММ), в тяжелых случаях - эозинопения.

При очаговой пневмонии лейкоцитоз крови достигает 10 -12 Ю 9 /л со сдвигом лейкоформулы влево до 10 - 15% па- лочкоядерных форм, отмечается умеренная токсическая зер­нистость нейтрофилов (++).

Для вирусных и хламидийных пневмоний характерна лей­копения (4 Ю 9 /л) при небольшом повышении СОЭ. При ми- коплазменной пневмонии нормальное содержание лейкоцитов или небольшой лейкоцитоз сопровождаются заметным увели­чением СОЭ.

Появление лейкопении у больных бактериальной пневмони­ей является неблагоприятным признаком, так как свидетельст­вует о токсическом угнетении лейкопоэза и указывает на сни­жение иммунитета и общей сопротивляемости организма.

2. Биохимический анализ крови выявляет повышение со­держания белков острой фазы воспаления (а 2 - глобулинов, фибриногена, церулоплазмина,

появление С- реактивного белка) и гликопротеидов (сиаловых кислот, серомукоида). При тяжелых пневмониях определяются признаки гиперкоа­гуляции крови - уровень фибриногена возрастает в 2-3 раза.

При разрешении воспалительного процесса возрастает фибринолитическая активность крови.

При затяжном течении пневмонии увеличивается содержа­ние у-глобулинов.

3. Анализ мокроты . Для долевой (крупозной) пневмонии в стадии красного опеченения характерна «ржавая» мокрота или мокрота с прожилками крови, в стадии серого опеченения - гнойная мокрота, в стадии разрешения - слизисто-гнойная, а затем слизистая. Для начальной стадии очаговой пневмонии характерна скудная слизистая мокрота. В стадии активного воспалительного процесса мокрота становится слизисто-гнойной или гнойной и имеет желтоватый или зеленоватый оттенок.

При микроскопии мокроты можно обнаружить нейтрофилы в большом количестве (при бактериальных пневмониях), эритроциты (при крупозной, фридлендеровской, гриппозной пневмониях), альвеолярные макрофаги. Появление в мокроте эластических волокон свидетельствует о деструкции легочной ткани и формировании абсцесса легкого.

Микробиологическое исследование мокроты проводят для определения вида бактериального возбудителя и его чувстви­тельности к антибиотикам. Следует отметить, что в клиниче­ской практике в условиях стационара идентифицировать воз­будителя пневмонии удается не чаще, чем в 60 - 70% случа­ев, а в амбулаторных условиях - лишь в 10%. Информатив­ность микробиологического метода повышается при исследо­вании жидкости, полученной с помощью бронхоальвеолярного лаважа при фибробронхоскопии (ФБС). Атипичные возбу­дители в мокроте не выявляются.

4. Рентгенологическое исследование органов грудной клетки является наиболее информативным диагностическим методом, позволяющим

установить наличие и распространен­ность пневмонии. Как правило, используется крупнокадровая флюрография и рентгенография легких в трех проекциях (прямой и боковых).

При долевой (крупозной) пневмонии определяется интен­сивное гомогенное затемнение легочной ткани в пределах до­ли или сегмента. На стороне поражения отмечается расшире­ние корня легкого, который теряет свою структурность (рис.4, 5, 6). При неосложненном течении пневмококковой пневмонии инфильтрация рассасывается в течение 2 - 3-х недель.

Долевое поражение (чаще верхней доли) характерно так же для фридлендеровской пневмонии, а сегментарное - для стафилококковой. Двум последним вариантам пневмонии свойственно быстрое развитие множественных очагов дест­рукции легочной ткани (абсцедирование).

При очаговой пневмонии выявляются очаги инфильтрации различных размеров и интенсивности чаще в нижних долях легких (рис. 7,8). Отмечается небольшое расширение корня легкого. Иногда очаги инфильтрации сливаются (очагово- сливная пневмония), занимая сегмент или долю легкого. При адекватном лечении очаговая пневмония разрешается через 10 - 14 дней.

Для «атипичных» пневмоний характерно усиление легоч­ного рисунка за счет интерстициального компонента.

5. Спирография отражает состояние функции внешнего дыхания больных. Схематическое изображение нормальной спирограммы приведено на рис. 9.

Основные легочные объемы:

ДО - дыхательный объем,

ЖЕЛ - жизненная емкость легких,

ФЖЕЛ - форсированная жизненная емкость легких,

ОФВ1 - объем форсированного вы­доха за 1-ю секунду,

МВЛ - максимальная вентиляция легких.

При долевой или сегментарной пневмонии спирография выявляет нарушения функции внешнего дыхания по рестриктивному типу, проявляющиеся снижением показателей ми­нутного объема дыхания (МОД), ЖЕЛ и МВЛ.

При очаговой пневмонии, развившейся на фоне хроничес­кого обструктивного бронхита, возможны нарушения функ­ции внешнего дыхания по обструктивному типу, о чем сви­детельствует снижение показателей ОФВ1 и пробы Тиффно (ОФВ1/ ФЖЕЛ). В этих случаях чаще определяются наруше­ния функции внешнего дыхания по смешанному типу.

6. Серологические исследования проводят для идентифи­кации микоплазменной, риккетсиозной, легионеллезной, орнитозной и вирусной пневмоний. Определяется титр специфи­ческих антител к предполагаемому возбудителю в сыворотке крови больного (ИФА). Достоверное значение имеет повыше­ние титра в 4 раза и более. Методом полимеразной цепной ре­акции (ПЦР) определяют ДНК вирусов, микоплазмы, хламидий и др.

При тяжелом или атипичном течении пневмонии возника­ет необходимость применения более сложных методов обсле­дования, таких как бронхоскопия, компьютерная томография легких, исследование плевральной жидкости, УЗИ органов грудной клетки и брюшной полости.

По показаниям проводятся консультации фтизиатра и онко­лога для исключения туберкулеза и новообразования легких.

«Золотой» диагностический стандарт ранней диагности­ки пневмонии уже на амбулаторном этапе включает следую­щие признаки (А.Г.Чучалин, 2000):

1. Острое начало болезни с лихорадкой и интоксикацией.

2. Появление кашля сухого или с мокротой, болей в груд­ной клетке.

3. Притупление перкуторного звука, появление аускультативных признаков пневмонии (крепитация, мелкопузырчатые влажные хрипы).

4. Лейкоцитоз или реже лейкопения со сдвигом влево.

5. Выявление инфильтрата в легком при рентгенологичес­ком исследовании.

По степени тяжести все пневмонии условно делятся на три группы:

1 . Пневмонии с легким течением, не требующие госпита­лизации больных, которые могут лечиться в амбулаторных условиях под наблюдением врача или в дневном стационаре поликлиники.

2. Пневмонии среднетяжелые, требующие госпитализа­ции больных в стационар. К этой группе относятся пневмо­нии, имеющие выраженные клинические симптомы или про­текающие на фоне хронических заболеваний внутренних ор­ганов.

Прямыми показаниями к госпитализации больных пнев­монией являются: возраст старше 70 лет, сопутствующие бронхообструктивные заболевания, хронические болезни вну­тренних органов, сахарный диабет, плевральная боль, нару­шения сознания, тахикардия (ЧСС более 125 в 1 мин), выра­женная одышка (более 30 дыханий в 1 мин), цианоз, артери­альная гипотония (90/60 мм рт. ст. и ниже), невозможность оказания эффективной помощи в амбулаторных условиях или отсутствие эффекта от лечения в течение трех дней, появле­ние осложнений болезни, таких как экссудативный плеврит, абсцедирование.

3. Пневмонии с тяжелым течением, требующие госпита­лизации больных в отделение интенсивной терапии и реа­нимации. Летальность больных достигает 40 - 50%.

Показаниями к интенсивной терапии больных пневмо­нией являются: острая дыхательная недостаточность (гипоксемия, необходимость искусственной вентиляции легких), нестабильная гемодинамика (шок, потребность в вазопрессо- рах более 4 часов, диурез менее 20 мл / час), острая почеч­ная недостаточность, требующая гемодиализа, ДВС-синдром, менингит, кома.

Дифференциальный диагноз пневмонии проводится:

1. С инфильтративным туберкулезом легких, для которо­го характерно постепенное начало, отсутствие выраженной лихорадки и интоксикации, скудность физикальных данных, отсутствие эффекта от обычной антибактериальной терапии, неблагополучный социальный статус больного (бомж и др.). В стадии распада туберкулезного инфильтрата появляется кро­вохарканье или легочное кровотечение. При общем анализе крови определяются нейтрофильный лейкоцитоз со сдвигом

влево, лимфопения и моноцитоз. Рентгенологически выяв­ляется крупноочаговая негомо­генная инфильтрация легочной ткани, обычно в плохо венти­лируемых верхних долях, с «дорожкой» к корню (лимфангиит) и очагами отсева в сосед­них с инфильтратом сегментах легкого (рис. 10, 11). В мокроте при исследовании

Рис. 12. Периферический рак правого легкого.

методом флотации можно выявить бак­терии Коха (ВК). Диагностике туберкулеза помогают положи­тельная реакция Манту и по­вышенный титр антител к микобактериям туберкулеза (ИФА).

онкозаболеваний (длительное курение, отягощенная наследственность, неблагоприятные экологические и профес­сиональные условия), раннее появление сухого кашля, усили­вающегося в горизонтальном положении больного, кровохар­канье, боли в груди, похудание. Для уточнения диагноза ис­пользуют фибробронхоскопию с биопсией, послойную томо­графию и компьютерную томографию легких.

С экссудативным плевритом. В нижних отделах пора­женной стороны грудной клетки выявляются ослабление голосового дрожания, перкуторная тупость с верхней границей по линии Дамуазо, отсутствие дыхательных шумов. При рент­генологическом исследовании выявляется гомогенное затем­нение на стороне поражения с характерной верхней косой границей (рис. 17). Органы средостения смещаются в здоро­вую сторону. Решающее диагностическое значение имеют результаты плевральной пункции.

4. С инфарктной пневмонией при тромбоэмболии легоч­ной артерии (ТЭЛА)- преимущественно мелких и средних ее ветвей. Характерно внезапное появление одышки и сухого ка­шля с резкой болью в груди, а через 2-3 дня - повышение температуры тела и появление кровохарканья при отсутствии симптомов интоксикации. Физикальные данные скудные. Вы­являются клинические и ЭКГ- признаки острой перегрузки правых отделов сердца (Р-рulmonale, инверсия зубца Т в пра­вых грудных отведениях, блокада правой ножки пучка Гиса). Важную диагностическую роль играет рентгенологическая картина органов грудной клетки - выбухание легочного кону­са и регионарное исчезновение легочного рисунка с последу­ющим появлением затемнения легочной ткани в форме треу­гольника с вершиной, направленной к корню легкого. Общий анализ крови неспецифичен. Постановке диагноза помогает выявление факторов риска ТЭЛА: периферические флеботромбозы, длительная иммобилизация, оперативные вмеша­тельства в брюшной полости, переломы костей, внутривенное употребление наркотиков и др.

Осложнения пневмонии (легочные и вне легочные):

1. Дыхательная недостаточность I - III степени.

2. Острый респираторный дистресс-синдром - некардиогенный отек легких, связанный с повышением проницаемости альвеоло-капиллярной мембраны под воздействием токсинов инфекционных микроорганизмов и эндогенных медиаторов воспаления.

3. Парапневмонический плевральный выпот, реже - эмпи­ема плевры.

4. Абсцесс легкого.

5. Бронхоспастический синдром.

6. Инфекционо-токсический шок (ИТШ) с явлениями ос­трой сосудистой, сердечной и почечной недостаточности, с развитием диссеминированного внутрисосудистого свертыва­ния крови, изъязвлений слизистой оболочки пищеварительно­го тракта и желудочно-кишечных кровотечений.

7. Сепсис.

8. Инфекционно-аллергический миокардит.

9. Интоксикационные психозы.

10 . Инфекционно-токсическая почка.

Возможно также развитие токсического гепатита, инфек­ционного эндокардита, перикардита, менингита или менинго- энцефалита.

Дата добавления: 2015-09-18 | Просмотры: 1778 | Нарушение авторских прав

Пневмония – это воспалительный процесс преимущественно инфекционной этиологии, поражающий все структурные элементы легочных тканей. В пульмонологической практике это заболевание встречается у людей любого возраста: от грудничков до взрослых и пожилых людей, и является крайне опасным. Пульмонологи классифицируют пневмонию по различным признакам на несколько форм и видов, каждый из которых требует назначения определенной терапии.

Диагностика пневмонии начинается с осмотра и опроса пациента, сбора анамнеза, и включает ряд лабораторных и инструментальных методов обследования. Диагностические мероприятия необходимы для определения этиологии и выраженности патологического процесса, оценки вероятности развития осложнений, а также для дифференцирования пневмонии от других видов поражения легких.

Кому назначается обследование

Заподозрить тяжелое легочное заболевание каждый может самостоятельно. Для пневмонии характерно быстрое развитие лихорадочных явлений, кашля, признаков интоксикации, рост температуры до значений 38 градусов и выше. Необходимо обратиться к терапевту или пульмонологу и пройти обследование с целью диагностирования пневмонии, если присутствуют следующее симптомы:

• затрудненное дыхание, одышка;
• боли в области грудной клетки;
• сильная потливость;
• снижение общего тонуса, выраженная слабость;
• отсутствие аппетита;
• цианоз кожных покровов;
• малопродуктивный кашель с отделением небольшого количества мокроты слизистого, гнойного характера, иногда с вкраплениями крови.

Для клиники пневмонии характерна сильнейшая интоксикация, которая может проявляться тахикардией, аритмией, тошнотой и рвотой, абдоминальными болями.

Способы диагностировать пневмонию

На первом этапе врач опрашивает пациента, анализирует его жалобы. Также он выясняет, были ли в последнее время переохлаждения, вирусные респираторные заболевания, присутствует ли в жизни пациента влияние профессиональных и иных вредностей, которые могут спровоцировать воспаление легких.

После этого проводится клинический осмотр пациента. Подозрение на пневмонию дает цианоз кожных покровов, особенно в области носогубного треугольника, западение межреберных промежутков.

Также осмотр включает перкуссию и аускультацию (выслушивание легких). Перкуссией называется метод простукивания участка тела и анализ возникающих при этом звуков. Доктор постукивает пальцами по грудной клетке в проекции легких и слушает звуки, определяя размеры и формы парного органа, выявляя патологические участки.

Аускультация предполагает прослушивание дыхания при помощи стетоскопа. При пневмонии наблюдаются такие признаки, как ослабление альвеолярного дыхания, прослушивается бронхиальное дыхание на участках, где его в норме неслышно, а также выслушиваются мелкопузырчатые влажные хрипы.

Если первичная диагностика позволяет предположить воспалительный процесс в легких, то пациенту назначаются:

• общеклинический анализ крови для выявления признаков воспаления и оценки состояния пациента;
• бактериоскопия мокроты (изучение мокроты под микроскопом);
• бактериологический посев мокроты (для оценки количественного показателя возбудителя, определения его типа и чувствительности к антибиотикам);
• рентген легких в передней и боковой проекции.

Эти методы обследования являются обязательными. В некоторых случаях, чтобы правильно поставить диагноз, врачу могут потребоваться данные и других диагностических исследований. По показаниям могут быть назначены:

• исследование функции внешнего дыхания (если у пациента нарушена вентиляция легких);
• анализ газового состава и кислотно-основного состояния крови (в случаях выявления тяжелой дыхательной недостаточности);
• серологические анализы (при атипичных формах пневмонии);
• томография легких (если врач подозревает развитие деструкции или опухолевого процесса в легких);
• бронхоскопия – исследование бронхолегочной системы при помощи оптоволоконного аппарата (назначается, если у пациента присутствует кровь в мокроте, есть основания подозревать развитие опухолевого процесса, а также при затяжном или осложненном течении болезни);
• исследование плевральной жидкости, получаемой методом пункции (при выявлении распространения патологического процесса на полость плевры);
• биохимический анализ крови (назначается пожилым пациентам при тяжелом, длительно осложненном протекании воспалительного процесса);
• сцинтиграфия легких – один из методов лучевой диагностики для оценки функциональности легочных тканей (назначается при подозрении на тромбоэмболию легочной артерии).

Показатели, свидетельствующие о пневмонии

В общем анализе крови выявляется повышение скорости оседания эритроцитов до 20-25 мм/час при очаговой пневмонии, при тяжелом крупозном поражении – до 50-60 мм/час. Критерием пневмонии в анализе крови считается повышение числа лейкоцитов (в основном за счет увеличения незрелых палочко-ядерных нейтрофилов), увеличение содержания в формуле крови лимфоцитов, эозинофилов и базофилов.

При микроскопическом исследовании мокроты оценивают её цвет и характер (желтовато-зеленая гнойная мокрота, иногда с примесями крови), консистенцию (при крупозной форме – вязкая, если развивается отек легкого – жидкая). Если у мокроты присутствует неприятный запах, это свидетельствует о развитии деструкции, гнойного процесса в легких. Мокроту высевают на специальные питательные среды, чтобы определить возбудителя воспалительного процесса.

Рентгенологическое исследование – наиболее информативный метод для постановки диагноза. Он позволяет установить:

• наличие и локализацию очага патологического процесса (на рентгенограмме он выглядит как более светлое пятно);
• структурные изменения легочной ткани;
• распространенность воспаления;
• наличие поражения плевральной полости;
• изменения корней легких;
• наличие или отсутствие деструктивных изменений.

При очаговой пневмонии на снимке видны группы небольших очагов воспаления, иногда сливающихся, усиление рисунка легких, расширение корня пораженного легкого. При крупозной пневмонии на снимке видно затемнение пораженной доли легкого.

Также рентген позволяет провести дифференциальную диагностику пневмонии. Очень важно определить, какой процесс спровоцировал симптоматику легочного поражения. Пневмонию дифференцируют от полостных раковых опухолей, туберкулеза.

Компьютерная томография – самый информативный на сегодняшний день диагностический метод, позволяющий выявить локализацию даже очень маленьких очагов воспалительного процесса, выяснить детали патологии. Применение КТ ограничено лишь высокой стоимостью таких исследований, отсутствием томографов в большинстве обычных медицинских учреждений.

Диагноз «пневмония» формулируется с указанием следующих критериев:

• этиология заболевания;
• локализация и распространение воспалительного процесса (какой сегмент или доля поражены, левостороннее, правостороннее или двустороннее течение);
• тяжесть заболевания;
• наличие или отсутствие осложнений;
• этап развития патологического процесса (начальный, развернутый, реконвалесценция);
• наличие или отсутствие дополнительных патологий.

Пневмония – тяжелое и опасное заболевание, требующее всесторонней и полной диагностики для назначения адекватного эффективного лечения. При выявлении воспалительного процесса в легких пациенту требуется госпитализация, в домашних условиях не удастся провести необходимую действенную терапию.

Государственное санитарно-эпидемиологическое нормирование
Российской Федерации

МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Лабораторная диагностика
внебольничных пневмоний

Методические указания
МУК 4.2.3115-13

Издание официальное

4.2. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. БИОЛОГИЧЕСКИЕ И
МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Лабораторная диагностика внебольничных пневмоний

1. Область применения

1.1. Настоящие методические указания обосновывают и определяют методические основы и алгоритмы лабораторной диагностики пневмоний при осуществлении эпидемиологического надзора в отношении внебольничных пневмоний.

1.2. Методические указания предназначены для специалистов органов и учреждений Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, а также могут быть использованы специалистами медицинских организаций и других заинтересованных организаций.

1.3. Методические указания являются обязательными при осуществлении эпидемиологического надзора в отношении внебольничных пневмоний, в ходе проведения противоэпидемических мероприятий и при эпидемиологическом расследовании возможных эпидемических вспышек внебольничных пневмоний.

2. Термины и сокращения

ВОЗ - Всемирная организация здравоохранения.

ВП - внебольничная пневмония.

ЛПО - лечебно-профилактическая организация.

МКБ-10 - международная классификация болезней.

ОРВИ - острая респираторная вирусная инфекция.

ПЦР - полимеразная цепная реакция.

ПЦР-РВ - полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.

РИФ - реакция иммунофлюоресценция.

ИФА - иммуноферментный анализ.

ИХА - иммунохроматографический анализ.

АБТ - антибактериальная терапия.

ОРИТ - отделение реанимации и интенсивной терапии.

БАЛ - бронхоальвеолярный лаваж.

3. Общие сведения о внебольничных пневмониях

Пневмонии - группа различных по этиологии, патогенезу, морфологической характеристике острых инфекционных заболеваний, характеризующихся очаговым поражением респираторных отделов легких с обязательным наличием внутриальвеолярной экссудации. В Международной классификации болезней, травм и причин смерти 10-го пересмотра (МКБ-10, 1992 г.) пневмонии четко обособлены от других очаговых воспалительных заболеваний легких неинфекционного происхождения. Современная классификация пневмоний учитывает прежде всего эпидемиологические условия развития заболевания, особенности инфицирования легочной ткани и состояние иммунологической реактивности организма пациента. По характеру приобретения выделяют внебольничную пневмонию (ВП) и нозокомиальную (внутрибольничную) пневмонию. В последнее время помимо термина «нозокомиальные пневмонии» используют термин более широкого значения - «пневмонии, связанные с оказанием медицинской помощи» (healthcare-associated pneumonia ). К этой категории помимо нозокомиальных относятся пневмонии у лиц, находящихся в домах престарелых или других учреждениях длительного ухода. Следует подчеркнуть, что такое подразделение никак не связано с тяжестью течения заболевания, основным критерием разграничения являются эпидемиологические условия и окружение, при которых развилась пневмония. Однако они, как правило, отличаются от ВП по этиологической структуре возбудителей и профилем антибиотикорезистентности.

Под ВП следует понимать острое заболевание, возникшее во внебольничных условиях - то есть вне стационара или позднее 4 недель после выписки из него, или диагностированное в первые 48 ч от момента госпитализации, или развившееся у пациента, не находившегося в домах сестринского ухода/отделениях длительного медицинского наблюдения 14 или более суток, - сопровождающееся симптомами инфекции нижних отделов дыхательных путей (лихорадка, кашель, выделение мокроты, возможно гнойной, боль в грудной клетке, одышка) и рентгенологическими признаками «свежих» очагово-инфильтративных изменений в легких при отсутствии очевидной диагностической альтернативы.

Современная классификация ВП, учитывающая состояние иммунологической реактивности организма пациента, позволяет выделить 2 основные группы, предполагающие различия в этиологической структуре пневмоний:

Типичная ВП (у пациентов с отсутствием выраженных нарушений иммунитета);

ВП у пациентов с выраженными нарушениями иммунитета (синдром приобретенного иммунодефицита; прочие заболевания или патологические состояния).

4. Современные представления об этиологической структуре внебольничных пневмоний

Абсолютное значение этиологической роли того или иного возбудителя ВП можно определить лишь по отношению к конкретному региону, эпидемическому очагу или эпидемиологической ситуации. Более широкие обобщения позволяют выявить основную тенденцию, определяющую значение данного возбудителя в инфекционной патологии человека на основании соответствующего уровня стандартизации и частоты применения методов лабораторной диагностики, а также примерное соотношение ВП, вызываемых основным возбудителем пневмоний - пневмококком и другими возбудителями.

По данным отечественных и зарубежных исследователей S. pneumoniae является доминирующим этиологическим агентом пневмоний, вызывая от 30 до 80 % ВП у лиц всех возрастных групп (Покровский В.И. с соавт., 1995; Зубков М.Н., 2002, Cuhna В.А., 2003, Чучалин А.Г., 2006).

На фоне увеличения контингентов с тяжелыми дефектами иммунитета (ВИЧ-инфекция, врожденный иммунодефицит, онкогематологические заболевания и др.) за последние годы выросло этиологическое значение таких оппортунистических возбудителей ВП, как Pneumocystis juroveci , цитомегаловирус. С учетом высокого уровня носительства этих возбудителей диагностику соответствующей нозологии следует осуществлять только у контингентов групп риска с использованием современных алгоритмов лабораторных исследований.

Понятие «вирусная пневмония» до настоящего времени не нашло широкого применения при постановке диагноза ВП, однако в МКБ-10 выделяют пневмонии, вызванные вирусами гриппа, парагриппа, аденовирусами и другими из группы возбудителей инфекции дыхательных путей. Вместе с тем вирусно-бактериальная этиология ВП достаточно широко известна и описана на фоне эпидемий гриппа и ОРЗ. В отечественный стандарт специализированной медицинской помощи при пневмонии тяжелой степени тяжести с осложнениями включены в качестве нозологических единиц - J10.0 «Грипп с пневмонией» (вирус гриппа идентифицирован) и J11.0 «Грипп с пневмонией» (вирус гриппа не идентифицирован).

Вирусные инфекции дыхательных путей тяжелее протекают у детей до 5 лет и пожилых людей (старше 65 лет), что отражается в высоком уровне госпитализаций по поводу пневмоний и летальности среди лиц указанного возраста. В этих возрастных группах чаще регистрируются вирусные и вирусно-бактериальные пневмонии.

Во время эпидемий гриппа риск развития пневмонии может увеличиваться для тех возрастных групп, у которых уровень анамнестических антител к циркулирующему в конкретный эпидемический сезон антигенному варианту вируса гриппа ниже защитного, как например, это наблюдалось в случае пандемического гриппа A/H1N1pdm2009 для лиц от 30 до 60 лет. К группам риска развития пневмонии при гриппе также следует относить лиц, страдающих хроническими заболеваниями сердечно-сосудистой системы, нарушениями обмена веществ (ожирение, сахарный диабет), хроническими заболеваниями бронхолегочной системы, и беременных женщин.

Этиологическая структура ВП у детей существенно отличается от этиологии ВП у взрослых и варьируется в зависимости от возраста ребенка и тяжести заболевания, что должно учитываться в алгоритме диагностики пневмоний у детей. Группы риска тяжелой пневмонии составляют дети до 5 лет, часто болеющие дети и особенно рожденные на 24 - 28 неделе гестации.

Бактериальные возбудители пневмонии обнаруживаются у 2 - 50 % детей, чаще у госпитализированных детей, по сравнению с детьми, находящимися на амбулаторном лечении. Наиболее частыми бактериальными возбудителями внебольничных пневмоний у детей старше года считают S. pneumoniae , реже выделяют Н. Influenzae тип b, S. pneumoniae является причиной одной трети пневмоний с рентгенологическим подтверждением у детей до 2 лет. В случаях тяжелого течения пневмоний, требующих интенсивной терапии, следуют предполагать инфекцию, вызванную стрептококками группы А или S. aureus , которые обнаруживаются в 3 - 7 % случаев. Moraxella catarrhalis обнаруживается от 1,5 до 3,0 % случаев пневмонии у детей. Смешанные вирусно-бактериальные пневмонии диагностируют у детей по разным данным в 8,2 - 33,0 % случаев, а при учете всех смешанных: бактериальных или вирусно-бактериальных пневмоний у детей, их частота колеблется то 8 до 40 %. Среди пневмококковых пневмоний у детей сочетание с вирусными инфекциями отмечается в 62 % случаев.

При ВП у детей необходимо учитывать возможность смешанной бактериально-вирусной инфекции, этиологическое значение хорошо известных и недавно открытых респираторных вирусов: респираторно-синцитиального, метапневмовируса, бокавируса и риновирусов. Различные вирусные возбудители респираторных инфекций обнаруживаются в 30 - 67 % случаев пневмонии у детей, причем их доля выше у детей младшего возраста (до 80 % случаев от 3 месяцев до 2 лет), и значительно реже встречаются у детей старше 10 лет. М. pneumoniae и С. pneumoniae преимущественно вызывают пневмонии у детей школьного возраста, и не характерны для детей от 1 года до 5 лет. Данные возбудители чаще обнаруживаются во время эпидемических подъемов заболеваемости в очагах инфекции.

В эндемичных регионах и по эпидемиологическим показателям при этиологической диагностике ВП необходимо учитывать возможность возникновения зоонозных инфекций, для которых характерны воспалительные процессы в легких (лихорадка Ку, орнитоз, туляремия и др.). Важным элементом обследования больных ВП является исключение этиологической роли возбудителя туберкулеза и других микобактерий.

5. Материально-техническое обеспечение лабораторных исследований

1. Ламинарный бокс 2-го класса биологической безопасности.

2. Микроскоп бинокулярный с осветителем, набором объективов и окуляров.

3. Термостаты электрические для выращивания бактерий, поддерживающие температуру в камере в пределах (37 ± 1) °С.

4. CO 2 -инкубатор, поддерживающий температуру в камере в пределах (37 ± 1) °С, содержание CO 2 на уровне 3 - 7 % или анаэростат.

5. Дистиллятор.

6. Автоклав электрический.

7. Холодильник, поддерживающий температуру 4 - 6 °С для хранения культур, биологических субстратов и реагентов.

8. Спиртовки и газовые горелки.

9. Счетчики колоний автоматические и полуавтоматические для подсчета колоний.

10. Одноразовые стерильные контейнеры для сбора и транспортирования мокроты, плевральной жидкости, трахеального аспирата, БАЛ с устойчивым основанием, изготовленные из прозрачного материала (желательно пластика с целью предотвращения поломки, облегчения дезинфекции и утилизации контейнера); крышка должна герметично закрывать контейнеры и легко открываться; контейнер не должен содержать химические вещества, негативно влияющие на жизнеспособность находящихся в мокроте бактерий.

11. Набор реагентов для окраски микропрепаратов по Граму.

12. Питательные среды для культивирования S. pneumoniae (например, кровяной агар, CNA-агар).

13. Питательные среды для культивирования бактерий рода Haemophilus (например, шоколадный агар), грамотрицательных бактерий и S. aureus (агар Эндо, МакКонки, желточно-солевой агар).

14. Чашки бактериологические (Петри) для выращивания микробиологических культур.

15. Стекла предметные и покровные стандартных размеров для микропрепаратов.

16. Штативы и подносы для пробирок и контейнеров, транспортирования чашек Петри, кюветы и штативы-рельсы для фиксации и окрашивания мазков.

17. Петли бактериологические.

18. Дозаторы переменного объема полуавтоматические.

19. Наконечники стерильные для дозаторов переменного объема.

20. Шпатели Дригальского стерильные.

21. Посуда мерная лабораторная стеклянная.

22. Пипетки пластиковые пастеровские для стандартизации объема и переноса жидкостей.

23. Стандарт мутности по МакФарланду или прибор для определения концентрации бактериальных клеток.

24. Диски с антибиотиками (оптохин, оксациллин, цефокситин и др.).

25. Иммуноферментный анализатор в комплекте.

26. Люминесцентный микроскоп в комплекте.

27. Оборудование для ПЦР-лаборатории, укомплектованной в соответствии с МУ 1.3.2569-09

28. Диагностические наборы реагентов (тест-системы) для выявления антигенов и ДНК/РНК возбудителей пневмоний, а также специфических антител к возбудителям пневмоний, разрешенные к применению в Российской Федерации в установленном порядке.

6. Диагностика внебольничных пневмоний

6.1. Диагностика пневмококковой пневмонии

Streptococcus pneumoniae (S. pneumoniae ) является самым частым бактериальным возбудителем ВП. Пневмококковые пневмонии регистрируются у пациентов любого возраста, встречаются как в амбулаторной практике, так и в стационаре (в т.ч. среди госпитализированных в ОРИТ). Рост заболеваемости ВП пневмококковой этиологии в Северном полушарии отмечается в зимнее время года; пневмококковая пневмония чаще регистрируется среди пациентов с сопутствующими хроническими заболеваниями - хроническая обструктивная болезнь легких, сахарный диабет, алкоголизм, аспления, иммунодефицит, нередко протекает с бактериемией (до 25 - 30 %).

Для пневмококковой ВП, как правило, характерны острое начало, высокая лихорадка, боли в грудной клетке. Однако клинико-лабораторные и рентгенологические проявления ВП, вызванной S. pneumoniae , недостаточно специфичны и не могут считаться адекватным предиктором этиологии заболевания.

Для диагностики пневмококковой ВП наиболее часто используют культуральные методы исследования. Клиническим материалом для исследования является мокрота, венозная кровь, реже - инвазивные респираторные образцы (БАЛ, материал, полученный при бронхоскопии, защищенной браш-биопсии и др.) и плевральная жидкость.

При исследовании мокроты особое внимание следует обратить на необходимость оценки качества доставленного образца. Проведение анализа необходимо начать с приготовления мазка, так как результаты микроскопии влияют не только на оценку пригодности материала, но и на дальнейшее направление бактериологического исследования. Критериями пригодности мокроты для бактериологического исследования является наличие более 25 сегментоядерных лейкоцитов и не более 10 эпителиальных клеток в поле зрения при просмотре, как минимум, 20 полей зрения мазка, окрашенного по Граму (под увеличением × 100). При микроскопии мазка, окрашенного по Граму (под увеличением × 1 000 при использовании иммерсионного объектива), обнаруживаются грамположительные кокки (чаще - ланцетовидные диплококки) диаметром 0,5 - 1,25 мкм, не имеющие спор и жгутиков; большинство имеет полисахаридную капсулу.

Исследование плевральной жидкости предусматривает бактериоскопию мазка, окрашенного по Граму с последующим культуральным исследованием. Оно выполняется при наличии плеврального выпота и условий безопасного проведения плевральной пункции (визуализация на латерограмме свободно смещаемой жидкости с толщиной слоя > 1,0 см). Культуральное исследование инвазивных респираторных образцов при ВП рекомендуется проводить пациентам с иммунодефицитом, данный метод может использоваться в отдельных случаях при тяжелой ВП, а также неэффективности стартовой антибактериальной терапии (АБТ).

Клинически значимыми при остром воспалительном процессе считаются микроорганизмы, выделенные из БАЛ в количестве ≥ 10 4 КОЕ/мл, из биоптата, полученного с помощью защищенных щеток - ≥ 10 3 КОЕ/мл, мокроты - ≥ 10 5 КОЕ/мл.

Для выделения S. pneumoniae из клинического материала необходимо использовать питательные среды, обогащенные дефибринированной кровью животных (барана, лошади или козла) в концентрации 5 %. Несколько худшие результаты даёт применение дефибринированной крови человека. В связи с дефицитностью дефибринированной крови в практических лабораториях и небольшим сроком её хранения следует помнить о возможности использования для выделения пневмококков коммерчески приготовленного шоколадного агара, который параллельно применяется для выделения гемофилов. Еще одно условие культивирования S. pneumoniae - инкубация в атмосфере с повышенным до 3 - 7 % содержанием СO 2 , так как он является факультативным анаэробом. Вероятность выделения S. pneumoniae из респираторных образцов увеличивается при использовании селективных сред, содержащих добавки, ингибирующие рост сапрофитных и грамотрицательных микроорганизмов (колистин, налидиксовая кислота, гентамицин).

Ключевым тестом дифференциации пневмококков от других α-гемолитических стрептококков является чувствительность к оптохину (тест основан на способности оптохина селективно подавлять рост пневмококка в отличие от других зеленящих стрептококков). Однако среди S. pneumoniae растет число оптохинорезистентных штаммов, что требует использования альтернативных методов идентификации возбудителя (лизис в присутствии солей желчных кислот, тест Нейфельда, агглютинация с диагностическими пневмококковыми сыворотками).

Информативность культурального исследования респираторных образцов и крови в значительной степени зависит от соблюдения общепринятых правил их сбора, хранения и транспортирования (см. прилож.). Кроме того, вероятность выявления St. pneumoniae значительно снижается при получении клинических образцов на фоне системной АБТ. Для культурального исследования крови предпочтительно использовать коммерческие флаконы с питательными средами.

Среди некультуральных методов диагностики пневмококковой пневмонии наибольшее распространение в последние годы получил иммунохроматографический тест, предусматривающий выявление пневмококкового клеточного полисахаридного антигена в моче. Основное его преимущество - возможность использования «у постели больного» в связи с простотой выполнения и быстрым получением результата. Пневмококковый экспресс-тест демонстрирует приемлемую чувствительность (50 - 80 %) и достаточно высокую специфичность (> 90 %) при ВП у взрослых по сравнению с традиционными методами. К недостаткам теста относятся возможность получения ложноположительных результатов при пневмококковом носительстве (тест не рекомендуется проводить у детей младше 6 лет) и у лиц, недавно перенесших ВП.

Разработаны методы выявления St. pneumoniae в клиническом материале с помощью ПЦР. В качестве мишеней для амплификации используются гены аутолизина (lytA ), пневмококкового поверхностного антигена (psaA ) и пневмолизина (ply ) и другие гены мишени. Однако данные методы не получили широкого распространения в клинической практике и их место в этиологической диагностике ВП требует уточнения.

6.2. Диагностика других бактериальных пневмоний

Важным клинически значимым бактериальным возбудителем ВП является Haemophilus influenzae (H. influenzae ). Внебольничную пневмонию, как правило, вызывают нетипируемые штаммы Н. influenzae . По данным ряда исследований, H. influenzae чаще встречается у пациентов с сопутствующей ХОБЛ и активных курильщиков, частота инфицирования данным возбудителем выше у пациентов с нетяжелой ВП.

Представители семейства Enterobacteriaceae (Klebsiella pneumoniae , Escherichia coli и др.) и Pseudomonas aeruginosa (P. aeruginosa ) выявляются менее чем у 5 % пациентов с ВП и относятся к категории редких возбудителей. Однако значимость данных микроорганизмов может возрастать у пациентов с тяжелой ВП, а инфицирование в несколько раз увеличивает вероятность неблагоприятного прогноза.

Как показывают эпидемиологические исследования, частота встречаемости энтеробактерий выше у пациентов с хроническими сопутствующими заболеваниями, у лиц, злоупотребляющих алкоголем, при аспирации, в случае недавней госпитализации и предшествующей АБТ. Дополнительными факторами риска инфицирования P. aeruginosa являются хронические бронхолегочные заболевания (тяжелая ХОБЛ, брон-хоэктазы), длительный прием системных стероидов, цитостатиков.

Еще один бактериальный возбудитель - Staphylococcus aureus (S. aureus ) - редко встречается среди амбулаторных пациентов с ВП, в то же время у лиц с тяжелым течением заболевания его удельный вес может возрастать до 10 % и более. К инфицированию S. aureus предрасполагают многие факторы - пожилой возраст, проживание в домах престарелых, наркомания, злоупотребление алкоголем. Известно, что актуальность S. aureus как возбудителя ВП значительно возрастает во время эпидемий гриппа.

Каких-то специфических клинических, лабораторных или рентгенологических признаков, типичных для ВП, вызванной данными возбудителями, и позволяющих отличить ее от пневмоний другой этиологии, не существует. В отдельных случаях, преимущественно у лиц с иммуносупрессией или злоупотребляющих алкоголем, К. pneumoniae может вызывать долевую пневмонию с локализацией поражения в верхней доле легкого, быстрым прогрессированием симптомов заболевания и высокой летальностью.

Для этиологической диагностики ВП, вызванной данными возбудителями, основное значение имеет культуральный метод исследования. Н. influenzae , как и пневмококк, относится к категории «прихотливых» микроорганизмов, требующих для культивирования наличия в питательных средах факторов X, V и 5 - 7 % CO 2 в атмосфере инкубации. Для выделения Н. influenzae из клинического материала обычно используется шоколадный агар или селективный агар для выделения бактерий рода Haemophilus . Посев клинического материала с целью выявления представителей семейства Enterobacteriaceae и P. aeruginosa осуществляется на селективные среды для выделения грамотрицательных бактерий (агар Эндо, МакКонки и др.), S. aureus - на желточно-солевой агар, маннитол-солевой агар и др.

Клиническим материалом для исследования может являться мокрота, венозная кровь, инвазивные респираторные образцы и плевральная жидкость. При исследовании мокроты, как и для выявления пневмококков, важное значение имеет оценка качества собранного образца. Исследование плевральной жидкости выполняется при наличии плеврального выпота и условий безопасного проведения плевральной пункции, инвазивных респираторных образцов - только по отдельным показаниям.

Следует отметить, что нетипируемые штаммы H. influenzae и S. aureus входят в состав нормальной микрофлоры верхних дыхательных путей (ВДП), причем частота бессимптомного носительства может быть достаточно высокой. С возрастом, при наличии хронических сопутствующих заболеваний, а также недавней системной АБТ возрастает частота колонизации полости рта и ВДП энтеробакгериями. Этот факт необходимо учитывать при клинической интерпретации результатов бактериологического исследования респираторных образцов, особенно мокроты.

Информативность культурального исследования респираторных образцов и крови в значительной степени зависит от соблюдения общепринятых правил их сбора, хранения и транспортирования. Идентификация основана на определении питательных потребностей возбудителей и результатах биохимических тестов. Для идентификации всех указанных микроорганизмов разработаны коммерческие биохимические панели и наборы реагентов, могут использоваться автоматизированные микробиологические анализаторы, которые уменьшают трудоемкость культурального исследования.

При подозрении на ВП, вызванную S. aureus , важное значение приобретает не только выделение и идентификация возбудителя, но и определение его чувствительности к оксациллину. Несмотря на отсутствие документированных фактов выявления метициллинорезистентного S. aureus у пациентов с ВП на территории Российской Федерации опасность их появления и распространения является вполне реальной. Среди фенотипических методов детекции метициллинорезистентности наиболее часто используются тестирование диско-диффузионным методом с диском, содержащим 30 мкг цефокситина или 1 мг оксациллина, или скрининг на агаре Мюллера-Хинтон с добавлением 4 %-й NaCl и оксациллина в концентрации 6 мг/л. Для подтверждения инфицирования метициллинорезистентным S. aureus разработаны коммерческие тест-системы, основанные на выявлении в клиническом материале гена mecA методом ПЦР.

6.3. Диагностика пневмонии, вызванной Mycoplasma pneumoniae

Возбудителем респираторного микоплазмоза является Mycoplasma pneumoniae - представитель класса Mollicutes , объединяющего бесстеночные, способные к автономному существованию бактерии, по уровню структурной организации занимающие промежуточное положение между бактериями и вирусами.

Респираторный микоплазмоз - распространенное антропогенное заболевание. Особенностью респираторного микоплазмоза является периодичность эпидемий с интервалами, по данным разных источников, варьирующими от 3 до 7 лет. Распространению инфекции способствует частота и длительность контактов среди лиц, пребывающих в закрытых и полузакрытых коллективах (военнослужащие, школы-интернаты), особенно при их формировании.

В 3 - 10 % случаев микоплазменной инфекции рентгенологически диагностируется пневмония. При пневмонии, вызванной М. pneumoniae , другие бактериальные или вирусные возбудители, как правило, не обнаруживаются, однако в редких случаях также выделяется S. pneumoniae . В 1 - 5 % случаев заболеваний респираторным микоплазмозом требуется госпитализация.

Микоплазменная пневмония сопровождается частым мучительным и продолжительным кашлем со скудной вязкой мокротой, которая плохо эвакуируется, отмечаются боли в грудной клетке, может развиться обструкция бронхов. Интоксикация нерезко выражена. Физикальные изменения в лёгких отсутствуют или слабо выражены. Рентгенологическая картина весьма вариабельна. В большинстве случаев выявляются поражения интерстиция, у части больных пневмония протекает по типу очаговой или сегментарной, иногда воспалительные изменения носят смешанный характер. Явления лёгочной недостаточности нехарактерны для микоплазменной пневмонии. Микоплазменная пневмония обычно имеет благоприятное течение, в редких случаях течение очень тяжёлое.

Диагностика микоплазменной пневмонии только на основании клинических или рентгенологических данных невозможна, поскольку не имеет патогномонических черт. Основная роль в подтверждении микоплазменной этиологии пневмонии отводится лабораторной этиологической диагностике. Для этиологической диагностики микоплазменной пневмонии применяют:

Обнаружение ДНК М. pneumoniae методом полимеразной цепной реакции (ПЦР), основным методом для прямого выявления ДНК М. pneumoniae является на настоящий момент стандартная полимеразная цепная реакция (ПЦР) с детекцией методом электрофоретического разделения ДНК, однако наибольшей специфичностью и чувствительностью обладает ПЦР с детекцией в режиме реального времени (ПЦР-РВ);

Выявление антигена микоплазм в реакции прямой иммунофлуоресценции (РИФ);

Серологические исследования по обнаружению специфических антител класса IgM и IgG к M. pneumoniae в сыворотках крови методом иммуноферментного анализа (ИФА).

Mycoplasma pneumoniae относится к трудно культивируемым микроорганизмам; процесс выделения занимает 3 - 5 недель, поэтому культуральный метод не может быть рекомендован для использования диагностическими лабораториями.

С целью быстрой этиологической диагностики пневмонии рекомендуется использовать ПЦР при исследовании биологического материала, полученного из нижних дыхательных путей (мокрота при глубоком откашливании, аспираты из трахеи, мокрота, полученная в результате индукции посредством ингаляции гипертонического раствора натрия хлорида, жидкость бронхоальвеолярного лаважа (БАЛ), получаемая с помощью фибробронхоскопии).

При получении положительного результата ПЦР при исследовании биологического материала, полученного из нижних дыхательных путей, этиология пневмонии считается установленной. При невозможности получения биологического материала из нижних дыхательных путей для ПЦР допустимо использовать мазки из верхних дыхательных путей (объединенный мазок из носоглотки и задней стенки глотки), и при получении положительного результата следует считать этиологию пневмонии предположительно установленной. Однако получение отрицательного результата ПЦР при исследовании мазков из верхних дыхательных путей не может свидетельствовать об отсутствии микоплазменной инфекции. В этом случае рекомендуется серологическая диагностика с учетом совокупности результатов по обнаружению специфических антител классов IgM и IgG в парных сыворотках, исследуемых одновременно.

С целью ретроспективной диагностики, когда больной уже находится в стадии реконвалесценции, необходимо использовать серологические исследования.

Первичный иммунный ответ характеризуется синтезом IgM-антител через 1 - 3 недели с момента заражения, обнаружение которых свидетельствует об острой фазе инфекции. Иммуноглобулины классов G появляются к концу 3 - 4 недели. Диагноз микоплазменной респираторной инфекции подтверждает 4-кратная сероконверсия специфических антител в парных сыворотках крови.

Непосредственное обнаружение антигенов М. pneumoniae в различных биосубстратах (мазки из носоглотки, лаважная жидкость, биоптаты), полученных от больных с респираторной патологией, до настоящего времени в отдельных диагностических лабораториях проводят с использованием РИФ. Этот метод в сочетании с выявлением специфических антител к микоплазме в ИФА дает возможность подтвердить заболевание, вызванное Mycoplasma pneumoniae . Следует учитывать, что гуморальные антитела сохраняются несколько лет.

Для достоверной и окончательной этиологической диагностики микоплазменной пневмонии с учетом возможности персистенции данного возбудителя в организме человека без выраженных клинических проявлений рекомендуется дополнительное подтверждение установленного диагноза каким-либо из перечисленных выше методов.

6.4. Диагностика пневмонии, вызванной Chlamydophila pneumoniae

С. pneumoniae вызывает пневмонии различной тяжести, длительно протекающие бронхиты, фарингиты, синуситы. Пневмония, вызванная С. pneumoniae обычно имеет благоприятное течение, в редких случаях течение очень тяжёлое.

Микст-инфекция, например сочетание с пневмококком или наличие тяжелых сопутствующих заболеваний, особенно у пожилых лиц, осложняет течение заболевания и увеличивает риск летального исхода. Нередко инфекция протекает малосимптомно.

В группу риска попадают все возраста, но частота заболеваемости хламидийной пневмонией выше у детей школьного возраста. Заболеваемость среди мужчин выше, чем среди женщин. Эпидемические вспышки происходят каждые 4 - 10 лет. Описаны эпидемиологические вспышки в изолированных и полуизолированных коллективах, случаи внутрисемейной передачи хламидийной инфекции.

Ни один из известных в настоящее время методов диагностики хламидийной пневмонии не обеспечивает 100 %-ю надежность выявления возбудителя, что диктует необходимость сочетания не менее двух методов.

Микробиологическое выделение С. pneumoniae имеет ограниченное применение ввиду того, что является длительным и трудоемким процессом, характеризуется низкой чувствительностью и доступно только специализированным лабораториям. Однако в случае выделения жизнеспособного возбудителя диагноз может быть поставлен с наибольшей достоверностью без необходимости применения подтверждающих тестов. Культуральное выделение указывает на активный инфекционный процесс, так как при персистентной инфекции возбудитель переходит в некультивируемое состояние.

Наиболее специфичным и чувствительным методом выявления возбудителя является ПЦР-диагностика. Высокая чувствительность и отсутствие ложноположительных результатов могут быть обеспечены использованием только лицензированных наборов для эффективного выделения ДНК из клинического материала и наборов для постановки ПЦР современного поколения на основе ПЦР в реальном времени (ПЦР-РВ). Метод не дает возможность дифференцировать острую и хроническую инфекцию.

С целью быстрой этиологической диагностики пневмонии рекомендуется использовать ПЦР при исследовании биологического материала, полученного из нижних дыхательных путей (мокрота при глубоком откашливании, аспираты из трахеи, мокрота, полученная в результате индукции посредством ингаляции гипертонического раствора натрия хлорида, жидкость бронхоальвеолярного лаважа (БАЛ), получаемая с помощью фибробронхоскопии). Серологические тесты применяют для ретроспективной диагностики и ретроспективного анализа природы эпидемических вспышек.

При получении положительного результата ПЦР при исследовании биологического материала, полученного из нижних дыхательных путей, этиология пневмонии считается установленной. Однако при пневмониях, вызванных Chlamydophila (Chlamydia ) pneumoniae , кашель часто бывает непродуктивным, в таких случаях для ПЦР рекомендуется использовать мазки из верхних дыхательных путей (объединенный мазок из носоглотки и задней стенки глотки), и при получении положительного результата следует считать этиологию пневмонии предположительно установленной.

При получении отрицательного результата ПЦР при исследовании мазков из верхних дыхательных путей при подозрении на инфекцию, вызванную С. pneumoniae , на основании эпидемиологических или клинических данных рекомендуется серологическая диагностика с учетом совокупности результатов по обнаружению специфических антител классов IgM и IgG в парных сыворотках, исследуемых одновременно.

С целью ретроспективной диагностики, когда больной находится в стадии реконвалесценции, необходимо использовать серологические исследования.

В настоящее время для обнаружения специфических IgM-, и IgG-антител к С. pneumoniae используют метод иммуноферментного анализа (ИФА) или реакцию иммунофлюоресценции (РИФ). Определены серологические критерии острой С. pneumoniae - инфекции: 4-кратное нарастание титров IgG-антител в парных сыворотках или однократное выявление IgM-антител в титре ≥ 1:16.

Для достоверной и окончательной этиологической диагностики хламидийной пневмонии с учетом возможности персистенции данного возбудителя в организме человека без выраженных клинических проявлений рекомендуется дополнительное подтверждение установленного диагноза каким-либо из перечисленных выше методов.

6.5. Диагностика пневмонии, вызванной Legionella pneumonia

В связи со сходством клинических проявлений и симптоматики легионеллезной и пневмококковой пневмонии быстрая и эффективная лабораторная диагностика приобретает решающее значение для выбора тактики этиотропной терапии больных. В 1999 г. ВОЗ и в 2002 г. Европейской рабочей группой по легионеллезу в качестве диагностических критериев приняты стандарты, в соответствии с которыми диагноз легионеллеза в случае острой инфекции нижних дыхательных путей (клинически и рентгенологически подтвержденной) считается установленным:

1) при выделении культуры легионелл из отделяемого респираторного тракта или легочной ткани;

2) при 4-кратном или более нарастании титра специфических антител к Legionella pneumophila серогруппа 1 в реакции непрямой иммунофлюоресценции;

3) при определении растворимого антигена Legionella pneumophila серогруппа 1 в моче иммуноферментным (ИФА) или иммунохроматографическим методом (ИХА).

При отсутствии сыворотки крови, взятой в ранние сроки болезни, выявление достоверно высокого уровня антител к Legionella pneumophila серогруппа 1 (1:128 и выше) в одиночной сыворотке методом непрямой иммунофлюоресценции позволяет считать диагноз легионеллеза предположительно установленным. Аналогичным образом интерпретируются результаты, полученные на основании выявления возбудителя или его ДНК в респираторном секрете или легочной ткани с помощью прямой иммунофлюоресценции или ПЦР.

Пункты 2 и 3 стандартов лабораторной диагностики в настоящее время распространяется только на антитела и антиген, определяемые для Legionella pneumophila серогруппы 1. Для других серогрупп Legionella pneumophila результаты, получаемые по определению антител или выявлению антигена в моче, позволяют установить лишь предполагаемый диагноз. Выделение культуры возбудителя остается единственным методом стандартов, устанавливающим окончательный диагноз в случае инфекции, вызываемой другими серогруппами Legionella pneumophila или видами Legionella spp . В то же время следует отметить, что более 80 % спорадических и групповых случаев легионеллеза вызваны штаммами Legionella pneumophila серогруппа 1, а при эпидемических вспышках внебольничных пневмоний этиологическое значение штаммов L. pneumophila серогруппа 1 подтверждено в 96 % случаев.

Основным методом стандартов, позволяющим осуществлять в настоящее время своевременную диагностику и мониторинг легионеллезной инфекции, является определение легионеллезного антигена в моче иммунохроматофафическим или иммуноферементным методом. Метод позволяет окончательно подтвердить диагноз в течении 1 - 2 ч. Превосходство данного метода над другими, включенными в стандарт, методами состоит прежде всего в сроках исследования и доступности клинического материала.

Бактериологический метод занимает не менее 4 - 5 суток, причем требуются инвазивные процедуры для получения материала бронхоскопии, биопсии, так как из мокроты, особенно после начала этиотропной терапии, возбудитель удается выделить далеко не всегда. Выявление диагностического нарастания титров антител в реакции непрямой иммунофлюоресценции возможно лишь на 3-й неделе заболевания, когда проведен курс антибиотикотерапии и исход заболевания обычно ясен. Необходимость исследования парных сывороток определяет ретроспективный характер диагностики легионеллеза данным методом.

Метод ПЦР может быть рекомендован прежде всего для исследования БАЛ или биопсии при подозрении на легионеллезную пневмонию у иммунокомпрометированных больных. Если у данной категории больных инфекция вызвана штаммами L. pneumophila , не принадлежащими к серогруппе 1, то данный метод является единственным, позволяющим быстро установить диагноз.

6.6. Диагностика пневмонии, вызванной Pneumocystis jiroveci

Пневмоцистоз, как правило, протекает в виде острых респираторных заболеваний, обострений хронических бронхолегочных заболеваний, обструктивного бронхита, ларингита, а также по типу пневмоний с нарушениями газообмена (интерстициальных пневмоний).

Типичная рентгенологическая картина при пневмоцистной пневмонии представлена двусторонней прикорневой интерстициальной инфильтрацией легочной ткани с нарастающей интенсивностью и большим объемом поражения в прямой зависимости с прогрессированием болезни. Реже встречаются единичные и множественные уплотнения легочной ткани, верхнедолевые инфильтраты и пневмоторакс. Плеврит и увеличение внутригрудных лимфатических узлов встречаются достаточно редко. При отсутствии патологии на рентгенограммах, КТ высокого разрешения может обнаруживать изменения по типу матового стекла или ячеистой деформации легочного рисунка.

У взрослых пневмоцистная пневмония, как правило, развивается на фоне вторичного иммунодефицита. Инкубационный период краткий - от 2 до 5 суток, начало - острое. Пневмоцистная пневмония может развиться у больных, получающих иммуносупрессивную терапию (кортикостероиды). При медикаментозной иммуносупрессии это заболевание проявляется на фоне снижения дозы кортикостероидов. Продромальный период обычно продолжается 1 - 2 недели; у больных СПИД - 10 дней.

Пневмоцистная пневмония при СПИД, как правило, характеризуется вялым хроническим процессом. Первоначально аускультативная симптоматика не выявляется. К летальному исходу приводит дыхательная недостаточность, связанная с резким нарушением вентиляции легких и газообмена. Возможны также абсцессы, спонтанный пневмоторакс и экссудативный плеврит.

Пневмоцистоз у детей развивается обычно на 4 - 6-м месяце жизни, когда иммунная система новорожденного еще полностью не сформировалась. Наиболее подвержены этому заболеванию недоношенные, больные рахитом, с гипотрофией и поражениями ЦНС.

У детей раннего возраста пневмоцистоз протекает как классическая интерстициальная пневмония с четкими стадиями патологических процессов.

На основании морфологических изменений при манифестном течении заболевания выделяют три стадии пораженного легкого:

Отечная (7 - 10 дней);

Ателектатическая (до 4 недель);

Эмфизематозная (ее продолжительность вариабельна).

Группами риска в отношении инфицированности Pneumocystis jiroveci являются:

Дети недоношенные, ослабленные новорожденные и дети раннего возраста с гипогаммаглобулинемией, гипотрофией и рахитом;

Больные лейкозом, онкологические больные, реципиенты органов, получающие иммунодепрессанты;

Больные туберкулезом, цитомегалией и другими инфекциями;

ВИЧ-инфицированные.

Наиболее универсальным для выявления цист, трофозоитов и спорозоитов является метод Романовского - Гимза. Витальная окраска нейтральным красным также позволяет выявить возбудителя в активной фазе.

Все перечисленные методы окраски требуют высокой квалификации исследователя для точной идентификации Pneumocystis jiroveci ; к тому же эти методы служат лишь для индикации и направлены на общие грибные полисахариды оболочки цист.

Иммунофлюоресцентный метод (РИФ) для выявления цист и трофозоитов с использованием моноклональных или поликлональных антител в лаважной жидкости обладает более высокой специфичностью и чувствительностью, нежели гистохимическое окрашивание препаратов.

Иммунологический метод, выявляющий специфические антитела классов IgG и IgM (ИФА), также играет значительную роль в диагностике пневмоцистоза, особенно при диагностике, когда у больного невозможно взять лаважную жидкость или мокроту. Антитела класса G среди здорового населения выявляют достаточно часто (60 - 80 %). Поэтому исследование антител должно происходить в динамике при обязательном титровании сыворотки. Выявление 4-кратного нарастания IgG и/или определение антител IgM против Pneumocystis jiroveci говорит об остром инфекционном процессе, вызванном этим возбудителем.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) является одним из высокочувствительных методов диагностики, позволяющим выявлять единичные клетки или фрагменты ДНК возбудителя Pneumocystis jiroveci в мокроте или бронхоальвеолярном лаваже.

6.7. Диагностика вирусных и вирусно-бактериальных пневмоний

Вирусную или вирусно-бактериальную этиологию пневмонии у взрослых можно подозревать во время подъема заболеваемости гриппом и ОРВИ, а также при возникновении групповых случаев заболевания в течение месяца после формирования закрытых и полузакрытых коллективов. В группу риска тяжелого течения вирусных пневмоний входят лица, страдающие сердечной недостаточностью и хроническими заболеваниями бронхолегочной системы. Сопутствующей патологией при тяжелом течении гриппа являются также ожирение, сахарный диабет, состояние беременности, особенно в третьем триместре.

Основными возбудителями вирусных и вирусно-бактериальных пневмоний у иммунокомпетентных взрослых считают вирусы гриппа А и В, аденовирусы, PC-вирус, вирусы парагриппа; реже обнаруживается метапневмовирус. У взрослых больных гриппом в 10 - 15 % случаев развиваются осложнения, причем 80 % из них приходится на пневмонию.

Важна диагностика вирусных инфекций при ВП у детей в этиологической структуре которых вирусные инфекции играют существенную роль.

Современные методы этиологической диагностики острых вирусных инфекций дыхательных путей основаны прежде всего: на выявлении РНК/ДНК возбудителей методами амплификации нуклеиновых кислот, в частности, с помощью наиболее широко используемой ПЦР; на обнаружении антигенов методами иммунохроматографии (ИХА), иммуноферментного анализа (ИФА), иммунофлюоресценции (РИФ). Сохраняют значение в основном для ретроспективной диагностики методы по обнаружению специфических антител в сыворотке крови (реакция связывания комплемента (РСК), реакция нейтрализации (PH), реакция торможения гемагглютиниции (РТГА), реакция непрямой гемагглютинации (РНГА), иммуноферментный анализ (ИФА)). Культивирование возможно для вирусов гриппа А и В, респираторно-синцитиального вируса, вирусов парагриппа 1 - 3-го типов, метапневмовируса человека и аденовирусов.

Культуральные исследования отличаются трудоемкостью и продолжительностью, в рутинной практике используется только при мониторинге гриппа, при этом первоначальное обнаружение положительных образцов проводится в ПЦР, далее проводится выделение в культуре.

Реакции иммунофлюоресценции позволяют обнаруживать антигены вирусов гриппа, респираторно-синцитиального вируса, вирусов парагриппа 1 - 3 и аденовирусов. Материал для исследований методом иммунофлуоресценции необходимо собирать не позднее трех дней от начала респираторной инфекции (в острой фазе заболевания, поскольку метод наиболее эффективен, когда внутриклеточное содержание вирусных антигенов бывает наиболее высоким), что делает данный метод малоинформативным для этиологической диагностики пневмоний. Помимо этого метод отличается субъективностью при интерпретации результатов анализа.

Серологические тесты обнаруживают антитела к респираторносинцитиальному вирусу (PH, РСК, РНГА, ИФА), вирусам парагриппа 1 - 4 (РТГА, РСК, ИФА), аденовирусам (ИФА), риновирусам (РСК); исследование, как правило, носит ретроспективный характер. По сравнению с РСК ИФА отличается большей чувствительностью. При интерпретации оценивают изменение титра специфических антител в динамике в парных сыворотках (полученных с интервалом в 2 недели), и их результаты в значительной степени зависят от состояния иммунной системы пациента.

Признанным доказательством первично вирусной пневмонии (или смешанной вирусно-бактериальной пневмонии) согласно международным критериям (ESCMID 2011, BTS, 2009 - 2011), служит обнаружение нуклеиновых кислот вируса гриппа или другого респираторного вируса методом ПЦР. Чаще для диагностики используются мазки из носоглотки и с задней стенки глотки, при этом наибольшей чувствительности вследствие большего содержания вирусов в исследуемом образце удается добиться при комбинации мазков из обоих локусов. С этой целью, мазки у пациента берут двумя разными зондами со слизистой нижнего носового хода, а затем с задней стенки ротоглотки, при этом тампоны с обоих зондов после взятия мазков последовательно отламываются в одну пробирку.

Однако, в случае вирусов гриппа, реплицирующихся в ткани легких (A/H5N1, A/H1N1pdm2009) на второй неделе пневмонии концентрация вируса в мазках уже может быть недостаточной для его обнаружения, особенно при неадекватном заборе материала. Кроме того, с целью одновременного обнаружения как вирусных, так и бактериальных агентов, целесообразно использовать материал нижних дыхательных путей (мокрота при глубоком откашливании, мокрота, полученная в результате индукции посредством ингаляции гипертонического раствора натрия хлорида, аспираты из трахеи, жидкость бронхоальвеолярного лаважа (БАЛ), получаемая с помощью фибробронхоскопии).

Для идентификации наиболее значимых возбудителей острых респираторных вирусных инфекций: вирусы гриппа А и В, PC-вирус, метапневмовирус, вирусы парагриппа 1 - 4, коронавирусы (229Е, ОС43, NL63, HKUI), риновирусы, аденовирусы (В, С, Е), бокавирус доступны наборы реагентов для ПЦР в форматах с электрофоретической детекцией, детекцией по конечной точке флуоресценции, а также с детекцией накопления продуктов амплификации в режиме «реального времени» (ПЦР-РВ). Максимального уровня специфичности и чувствительности достигают тесты на основе ПЦР в режиме реального времени, преимуществом обладают тесты с одновременным определением нескольких возбудителей. Использование в качестве мишеней специфичных консервативных участков генома вирусов обусловливает высокие показатели диагностической чувствительности и специфичности ПЦР, приближающиеся к 100 %, по сравнению с культуральным исследованием. При диагностике гриппа реализуется возможность определения субтипа вирусов гриппа А, в том числе - высокопатогенного вируса гриппа птиц A/H5N1 и нового пандемического варианта A/H1N1pdm2009, так называемого вируса гриппа свиней.

Полимеразная цепная реакция в формате электрофоретической детекции требует особых мер предотвращения контаминации (ложноположительных результатов), достигаемых проведением специальных мероприятий и соблюдением особых правил организации лаборатории согласно МУ 1.3.2569-09 «Организация работы лабораторий, использующих методы амплификации нуклеиновых кислот при работе с материалом, содержащим микроорганизмы I - IV групп патогенности».

Этиологию «пневмонии, вызванной вирусом гриппа», следует считать установленной в случае обнаружения методом ПЦР РНК вируса гриппа (или в сочетании с другими вирусами) в материале нижних дыхательных путей при отрицательном результате бактериологического исследования крови (или при отсутствии ДНК бактериальных возбудителей пневмоний в крови по результатам ПЦР, или при обнаружении незначимых концентраций ДНК в материале нижних дыхательных путей в количественной ПЦР). При невозможности получения материала нижних дыхательных путей гриппозная этиология пневмонии с большой долей вероятности может быть доказана в случае обнаружения РНК вируса гриппа в мазках из носоглотки и ротоглотки.

Этиология пневмонии, вызванной другими респираторными вирусами, считается установленной в случае обнаружения методом ПЦР РНК/ДНК одного респираторного вируса (или одновременно нескольких вирусов) в материале нижних дыхательных путей при отрицательном результате бактериологического исследования крови (или при отсутствии ДНК бактериальных возбудителей пневмоний в крови по результатам ПЦР, или при обнаружении незначимых концентраций ДНК в материале нижних дыхательных путей в количественной ПЦР).

Вирусная этиология пневмонии считается предположительно установленной в случае обнаружения методом ПЦР РНК/ДНК одного респираторного вируса (или одновременно нескольких вирусов) в мазках из носоглотки и ротоглотки при отрицательном результате бактериологического исследования крови (или при отсутствии ДНК бактериальных возбудителей пневмоний в крови по результатам ПЦР, или при обнаружении незначимых концентраций ДНК в материале нижних дыхательных путей в количественной ПЦР), а также если бактериологические исследования не проводились.

Вирусная этиология пневмонии считается предположительно установленной в случае обнаружения методом РИФ антигенов одного респираторного вируса (или одновременно нескольких вирусов) при отрицательном результате бактериологического исследования крови (или при отсутствии ДНК бактериальных возбудителей пневмоний в крови по результатам ПЦР, или при обнаружении незначимых концентраций ДНК в материале нижних дыхательных путей в количественной ПЦР), а также если бактериологические исследования не проводились.

Вирусно-бактериальная этиология пневмонии считается установленной в случае обнаружения методом ПЦР РНК/ДНК одного вируса (или одновременно нескольких вирусов) в материале нижних дыхательных путей при положительном результате бактериологического исследования крови (или обнаружении ДНК значимых концентраций в крови или в материале нижних дыхательных путей в количественной ПЦР).

Вирусно-бактериальная этиология пневмонии считается предположительно установленной в случае обнаружения методом РИФ или ИХА антигенов одного респираторного вируса (или одновременно нескольких вирусов) при положительном результате бактериологического исследования крови (или обнаружении ДНК значимых концентраций в крови или в материале нижних дыхательных путей в количественной ПЦР).

Результаты серологических исследований позволяют судить о наличии или отсутствии вирусной инфекции, на фоне которой развилась пневмония.

6.8. Дифференциальная диагностика с зоонозными заболеваниями, вызывающими поражения легких, и туберкулезом

Дифференциальная диагностика с зоонозными заболеваниями, вызывающими поражения легких (орнитоз, лихорадка Ку, туляремия и др.) проводится по эпидемиологическим показателям и в эндемичных для данных возбудителей регионах в соответствии с санитарными правилами «Профилактика орнитоза», «Профилактика лихорадки Ку», «Профилактика туляремии». Дифференциальная диагностика с туберкулезом является также важным и необходимым компонентом обследования больных тяжелыми пневмониями.

7. Алгоритм диагностики внебольничных пневмоний

Алгоритм лабораторной диагностики типичной ВП (у пациентов с отсутствием выраженных нарушений иммунитета) различен для пневмоний тяжелого и нетяжелого течения, для пациентов с выраженными нарушениями иммунитета и детей. Своевременная этиологическая диагностика ВП особенно важна при пневмониях тяжелого течения у пациентов, госпитализированных в ОРИТ.

При тяжелых пневмониях в первую очередь необходимо провести бактериологическое исследование на пневмококк и другие бактериальные этиологические агенты с учетом спектра их чувствительности к антибиотикам, а также исключить легионеллезную этиологию с помощью экспресс-теста на определение антигена легионелл в моче пациентов. Во время подъема заболеваемости гриппом и ОРВИ достаточно высока вероятность тяжелых пневмоний вирусной или вирусно-бактериальной природы. В этом случае алгоритм диагностики тяжелых пневмоний должен учитывать возможность бактериальной, вирусной или вирусно-бактериальной этиологии. Недооценка на этапе лабораторной диагностики любого из вышеупомянутых этиологических вариантов тяжелых пневмоний у пациентов ОРИТ может привести к летальным исходам. Летальность при тяжелых ВП может составлять 25 - 50 %.

Термин «нетяжелая пневмония» используется для пневмоний, лечение которых проводится амбулаторно или в условиях стационара, но не требует госпитализации в ОРИТ. При отсутствии адекватной своевременной терапии нетяжелая пневмония может привести к серьезным осложнениям и хроническим заболеваниям бронхолегочной системы. Летальность при этом может составлять от 1 до 10 %. Наряду с бактериологическим исследованием на пневмококк и другие бактериальные этиологические агенты, с учетом спектра их чувствительности к антибиотикам, диагностика нетяжелых пневмоний должна учитывать возможность микоплазменной или хламидийной этиологии. Во время подъема заболеваемости гриппом и ОРВИ высока вероятность нетяжелых пневмоний вирусной, а также микст-инфекции упомянутых вирусов с бактериями, хламидиями или микоплазмами.

Требует расширенного анализа этиологической структуры ВП у пациентов с выраженными нарушениями иммунитета (синдром приобретенного иммунодефицита, прочие заболевания или патологические состояния). Помимо бактериологического исследования на пневмококк, другие бактериальные этиологические агенты, с учетом спектра их чувствительности к антибиотикам, и легионеллы для данной группы пациентов высока вероятность развития пневмонии, вызванной «оппортунистическими этиологическими агентами», прежде всего Pneumocystis jiroveci , а также цитомегаловирусом, грибами, вирусом герпеса. Дифференциальная диагностика с туберкулезом и другими микобактериозами является также важным и необходимым компонентом обследования пациентов с ВП, имеющими выраженные нарушениями иммунитета. Для исключения легионеллезной этиологии пневмоний у иммунокомпрометированных больных проводится исследование бронхоальвеолярного лаважа или биопсии с помощью бактериологического метода, или ПЦР на L. pneumophila серогруппы 2 - 15 и Legionella spp .

При ВП у детей наиболее выражена полиэтиологичность, что необходимо учитывать в процессе лабораторной диагностики. Наряду с бактериологическим исследованием на пневмококк и другие бактериальные этиологические агенты, с учетом спектра их чувствительности к антибиотикам, диагностика пневмоний у детей должна учитывать широкий спектр респираторных вирусов, причем не только во время эпидемических подъемов заболеваемости гриппом и ОРВИ (вирусы гриппа, РС-вирус, метапневмовирус, вирусы парагриппа, аденовирусы, коронавирусы, бокавирус, риновирусы), а также этиологическую роль микоплазм и хламидий. При ВП у детей высока вероятность смешанной бактериально-вирусной инфекции, включая смешанную инфекцию с хламидиями и микоплазмами.

8. Контроль качества лабораторных исследований

Обязательным компонентом современной лабораторной диагностики является система качества лабораторных исследований и обеспечение ее функционирования. Система качества включает внутренний контроль на этапах лабораторного исследования и внешний контроль.

Внутренний контроль качества микробиологических исследований - комплекс выполняемых лабораторией мероприятий и процедур, направленных на предупреждение неблагоприятного воздействия факторов, возникающих в процессе подготовки, выполнения и оценки результатов анализа, способных повлиять на достоверность результата.

Внутренний контроль качества включает:

1. Контроль за соблюдением требований к условиям проведения анализа: (лабораторные помещения, воздушная среда, температурные режимы инкубации и хранения, режимы дезинфекции и стерилизации и т.д.).

2. Выполнение процедуры ведения эталонных бактериальных культур.

3. Контроль качества питательных сред.

4. Контроль качества тест-систем и реагентов.

5. Контроль качества дистиллированной воды.

Структура организации внутреннего контроля качества, периодичность и частота выполняемых процедур устанавливается действующей в лаборатории системой менеджмента качества в соответствии с ГОСТ ИСО/МЭК 17025 и ГОСТ Р ИСО 15189 .

Документальное оформление результатов проведенных контрольных процедур осуществляется по утвержденным действующей системой менеджмента качества формам. Регистрация и хранение контрольных результатов могут осуществляться на электронных носителях.

Обязательным разделом внутреннего контроля качества является проведение периодического, но не реже 1 раза в год, анализа результатов выполненных контрольных процедур, с учетом которого осуществляется корректировка руководства по качеству испытательной лаборатории .

Обеспечение внутреннего контроля качества молекулярно-генетических (ПЦР) исследований дополнительно проводят в соответствии с МУ 1.3.2569-09 «Организация работы лабораторий, использующих методы амплификации нуклеиновых кислот при работе с материалом, содержащим микроорганизмы I - IV групп патогенности».

Внешний контроль качества осуществляется в соответствии с требованиями ГОСТ ИСО/МЭК 17025 и ГОСТ Р ИСО 15189 в форме участия в межлабораторных сравнительных испытаниях (МСИ) и/или программах проверки квалификации по показателям и с периодичностью в соответствии с установленными требованиями и потребностью лабораторий.

9. Требования безопасности

Исследования биологического (клинического) материала проводят в соответствии с действующими нормативными правовыми и методическими документами в отношении работы с микроорганизмами III - IV и I - II групп патогенности в зависимости от вида предполагаемого возбудителя.

Приложение

С целью выяснения этиологического агента (агентов) инфекции нижних дыхательных путей при подозрении на ВП исследуется мокрота при глубоком откашливании, мокрота, полученная при индукции ингаляцией стерильного 5 %-го раствора натрия хлорида через небулайзер, мокрота, полученная аспирацией из трахеи с помощью хирургического вакуумного или электрического отсоса, бронхоальвеолярный лаваж (БАЛ), получаемый с помощью фибробронхоскопии, а также кровь и плевральная жидкость.

В случае невозможности получения материала из нижних дыхательных путей при исследовании на респираторные вирусы, микоплазму и хламидию допустимо использование мазков из верхних дыхательных путей (из нижнего носового хода и с задней стенки глотки), которые берут у пациента как можно раньше от момента появления симптомов ОРЗ в одну пробирку и исследуют как один образец.

У госпитализированных пациентов материал для исследования следует собирать как можно раньше при поступлении (не позднее вторых суток), поскольку в более поздние сроки не исключена возможность суперинфекции при контакте с другими пациентами. Сбор биологического материала для бактериологического исследования следует проводить до назначения антибиотиков.

В случае летального исхода исследуется посмертный (аутопсийный) материал.

Правила получения свободно отделяемой мокроты для бактериологического и ПЦР-исследования

Для сбора мокроты необходимо использовать стерильные герметично закрывающиеся пластиковые контейнеры. Перед сбором мокроты необходимо попросить пациента тщательно прополоскать рот кипяченой водой. Сбор мокроты осуществляется натощак или не ранее 2 ч после еды.

Пациента просят сделать несколько глубоких вдохов с задержкой дыхания на несколько секунд, затем с силой выдохнуть, что способствует появлению продуктивного кашля и очищению верхних дыхательных путей от мокроты. Затем пациента просят хорошо откашляться и собрать отделяемое из нижних дыхательных путей (не слюну!) в стерильный контейнер. Объем образца мокроты должен быть не менее 3 мл для взрослых и около 1 мл для детей.

Следует хранить в холодильнике при температуре 4 - 8 °С. Продолжительность хранения мокроты при комнатной температуре не должна превышать 2 ч.

Для исследования методом ПЦР допускается хранение образца мокроты в течение 1 суток при температуре от 2 до 8 ° С, более длительно - при температуре не выше - 16 °С.

Правила получения венозной крови для бактериологического исследования

Для сбора крови с целью бактериологического исследования используются коммерческие герметично закрывающиеся стеклянные флаконы или флаконы из ударопрочного автоклавируемого пластика двух видов (содержащие питательную среду для выделения аэробов и анаэробов). Забор крови производится шприцем, кровь асептически переносится во флакон с транспортной средой непосредственно через резиновую пробку.

Забираются 2 образца венозной крови с интервалом 20 - 30 мин из различных периферических вен - например, левой и правой локтевой вены. Один образец помешается во флакон для выделения аэробов, другой для выделения анаэробов. Объем крови при каждой венепункции должен составлять не менее 10 мл для взрослых и 3 мл для детей.

Непосредственно перед венепункцией производится дезинфекция кожи в месте венепункции циркулярными движениями от центра к периферии дважды 70 %-м раствором спирта или 1 - 2 %-м раствором йода. Необходимо дождаться полного высыхания дезинфектанта, и провести манипуляцию, не касаясь места обработки кожи.

После венепункции следует удалить оставшийся йод с поверхности кожи, чтобы избежать ожога.

До момента транспортирования с целью бактериологического исследования образец вместе с направлением хранится при комнатной температуре (не более 2 ч) или в термостате.

Правила получения венозной крови для ПЦР-исследования

Взятие крови следует производить натощак или через 3 ч после приема пищи из локтевой вены в положении сидя. Взятие крови осуществляют в пробирки с антикоагулянтом (ЭДТА).

Непосредственно перед венепункцией производится дезинфекция кожи в месте венепункции циркулярными движениями от центра к периферии дважды 70 %-м раствором спирта или 1 - 2 %-м раствором йода. Необходимо дождаться полного высыхания дезинфектанта, и провести манипуляцию, не касаясь места обработки кожи. После венепункции следует удалить оставшийся йод с поверхности кожи, чтобы избежать ожога.

После взятия крови пробирку следует несколько раз плавно перевернуть вверх дном, чтобы кровь в пробирке тщательно перемешалась. Пробирку поместить в штатив.

До момента транспортирования в лабораторию с целью ПЦР-исследования образец вместе с направлением хранится при температуре 20 - 25 °С в течение 6 ч с момента получения материала - для количественного определения нуклеиновых кислот, и в течение 12 ч - для качественного определения нуклеиновых кислот; при температуре 2 - 8 °С - не более одних суток для качественного и количественного определения ДНК/РНК инфекционных объектов. Замораживание образцов цельной крови недопустимо.

Правила получения плевральной жидкости для бактериологического и ПЦР-исследования

Взятие материала осуществлять в одноразовые, плотно завинчивающиеся пробирки объемом 10 - 15 мл.

Перед манипуляцией производится дезинфекция кожи 70 %-м этиловым спиртом, затем 1 - 2 %-м раствором йода, избыток йода удаляется марлевой салфеткой, смоченной 70 %-м спиртом во избежание ожога кожи пациента. После этого выполняется чрезкожная аспирация для получения пробы плевральной жидкости при тщательном соблюдении правил асептики. Объем пробы должен составлять не менее 5 мл. Из шприца удаляются все пузырьки воздуха, после чего проба немедленно переносится в стерильный пластиковый контейнер. Контейнер плотно закрывается крышкой.

До момента транспортирования образец вместе с направлением на бактериологическое исследование хранится в холодильнике при температуре 4 - 8 °С. Продолжительность хранения плевральной жидкости при комнатной температуре не должна превышать 2 ч.

Для исследования методом ПЦР допускается хранение образца в течение 1 суток при температуре от 2 до 8 °С, более длительно - при температуре не выше -16 °С.

Бронхоскопия выполняется в условиях оксигенотерапии (ингаляция кислорода через носовые катетеры, с помощью маски Вентури либо маски с резервуаром). Если не удается обеспечить достаточную оксигенацию крови, бронхоскопия выполняется в условиях неинвазивной вентиляции легких. У больных на искусственной вентиляции легких процедура выполняется под общей анестезией в условиях миоплегии через адаптер респиратора, снабженный клапаном для бронхоскопа. Бронхоальвеолярный лаваж проводят по принятым правилам. Фибробронхоскоп проводят в бронх до его заклинивания, после чего вводят подогретый до 37 °С 0,9 %-й раствор натрия хлорида с помощью одноразовых шприцев 8 порций по 20 мл (150 - 160 мл). С целью предотвращения коллапса альвеол отсасывание проводят при 50 - 80 мм рт. ст. Данная процедура позволяет получить необходимое количество альвеолярных макрофагов, в которых размножается возбудитель ВП.

При жизни легочную ткань получают трансбронхиальной биопсией с помощью бронхоскопа, что позволяет выявить пневмоцисты в 66 - 98 %, однако этот метод забора материала показан далеко не всем больным. Получение материала для исследования возможно и при открытой биопсии легкого или с помощью чрезкожной интраторакальной аспирации легочной иглой у больных, которым противопоказано проведение трансбронхиальной биопсии при прогрессирующем течении заболевания. Метод открытой биопсии легкого дает наилучшие (100 %) результаты и приравнивается по результату к хирургическому вмешательству, при этом получается достаточно большой объем материала для исследования и ложноотрицательный результат полностью исключается.

В настоящее время в клиниках стали активно исследовать бронхоальвеолярный лаваж для выявления цист и трофозоитов.

Посмертный материал собирают в течение первых суток после гибели больного, приготавливают мазки-отпечатки легкого или мазки из пенистого содержимого альвеол.

Правила получения трахеального аспирата для ПЦР-исследования

Манипуляцию проводят натощак после чистки зубов и полоскания полости рта водой. Пациента просят сделать несколько глубоких вдохов с задержкой дыхания на несколько секунд, затем с силой выдохнуть. Это способствует появлению продуктивного кашля и очищению верхних дыхательных путей от мокроты. После присоединения мукус-экстрактора через трубку-переходник к отсосу катетер для забора трахеального аспирата вводился в глотку через полость рта. Вследствие раздражения слизистой в области голосовой щели провоцируется кашлевой рефлекс и проводится извлечение трахеального содержимого через стерильный катетер (6-го или 7-го размера) с помощью отсоса. Объем трахеального аспирата должен составлять не менее 3 - 5 мл.

Правила получения индуцированной мокроты для бактериологического и ПЦР-исследования

Перед процедурой пациенты получают сальбутамол (дети - 200 мкг) через дозирующий ингалятор для предотвращения бронхоспазма. Затем в течение 15 мин через струйный небулайзер (аэрозольный аппарат) подается кислород со скоростью 5 л/мин с 5 мл 5 %-го стерильного раствора NaCl. После этого проводится постукивание по передней и задней стенкам грудной клетки с целью стимуляции отхождения мокроты.

Затем пациента просят хорошо откашляться и собрать отделяемое из нижних дыхательных путей (не слюну!) в стерильный контейнер. Объем образца мокроты должен быть не менее 3 мл для взрослых и около 1 мл для детей.

В случае если мокрота не откашливается, процедуру рекомендуется комбинировать с последующим получением аспиратов из трахеи с целью отсасывания содержимого из трахеи с помощью стандартного отсоса с использованием стерильного катетера 6-го или 7-го размера.

До момента транспортирования образец вместе с направлением на бактериологическое исследование хранится в холодильнике при температуре 4 - 8 °С. Продолжительность хранения мокроты при комнатной температуре не должна превышать 2 ч.

Для исследования методом ПЦР допускается хранение в течение 1 суток при температуре от 2 до 8 °С, более длительно - при температуре не выше-16 °С.

Правила получения мазков из верхних дыхательных путей для ПЦР-исследования

Материал берут после полоскания полости рта кипяченой водой комнатной температуры. Если полость носа заполнена слизью, перед процедурой рекомендуется провести высмаркивание. В течение 6 ч перед процедурой нельзя использовать медикаменты, орошающие носоглотку или ротоглотку и препараты для рассасывания во рту.

Мазки у пациента берут двумя разными зондами сначала со слизистой нижнего носового хода, а затем из ротоглотки, при этом концы зондов с тампонами после взятия мазков последовательно помещаются в одну пробирку объемом 1,5 - 2,0 мл с 0,5 мл транспортной среды.

Мазки со слизистой носоглотки у детей берут сухим стерильным назофарингеальным велюр-тампоном на пластиковом аппликаторе. Зонд вводят легким движением по наружной стенке носа на глубину 2 - 3 см до нижней раковины, слегка опускают книзу, вводят в нижний носовой ход под нижнюю носовую раковину, делают вращательное движение и удаляют вдоль наружной стенки носа. Общая глубина введения зонда должна составлять примерно половину расстояния от ноздри до ушного отверстия (3 - 4 см для детей и 5 - 6 см для взрослых). После забора материала конец зонда с тампоном опускают в стерильную одноразовую пробирку с транспортной средой до места слома, при этом гибкая часть зонда сворачивается спиралью, далее, прикрывая сверху пробирку крышкой, рукоятку зонда опускают вниз, добиваясь полного отламывания верхней части зонда. Пробирку герметично закрывают.

Мазки со слизистой носоглотки у взрослых допустимо брать также сухим стерильным зондом из полистирола с вискозным тампоном. Зонд вводят легким движением по наружной стенке носа на глубину 2- 3 см до нижней раковины, слегка опускают книзу, вводят в нижний носовой ход под нижнюю носовую раковину, делают вращательное движение и удаляют вдоль наружной стенки носа. Общая глубина введения зонда должна составлять примерно половину расстояния от ноздри до ушного отверстия (5 см для взрослых). После забора материала конец зонда с тампоном опускают на глубину 1 см в стерильную одноразовую пробирку с транспортной средой и отламывают, придерживая крышкой пробирки. Пробирку герметично закрывают.

Мазки из ротоглотки берут сухим стерильным зондом из полистирола с вискозным тампоном вращательными движениями с поверхности миндалин, небных дужек и задней стенки ротоглотки, аккуратно прижимая язык пациента шпателем. После забора материала рабочую часть зонда с тампоном помещают в стерильную одноразовую пробирку с транспортной средой и зондом с мазком из носоглотки. Конец зонда с тампоном (1 см) отламывают, придерживая крышкой пробирки с расчетом, чтобы он позволил плотно закрыть пробирку. Допускается хранение в течение трех суток при температуре 2 - 8 °С, более длительно - при температуре не выше -16 °С.

Правила получения материала для серологической диагностики
(Выявление специфических антител)

Для серологического исследования (определение антител) необходимы две пробы сыворотки крови, 1-я проба берется в день постановки первичного диагноза, 2-я проба - через 2 - 3 недели после первой. Взятие крови осуществляется из вены в объеме 3 - 4 мл, или из третьей фаланги среднего пальца в объеме 0,5 - 1,0 мл в одноразовую пластиковую пробирку без антикоагулянта. Пробы крови отстаивают при комнатной температуре в течение 30 мин или помещают в термостат при 37 °С на 15 мин. После центрифугирования (10 мин при 3 000 об./мин) сыворотку переносят в стерильные пробирки, используя для каждого образца отдельный наконечник с аэрозольным барьером. Срок хранения цельной крови - не более 6 ч, замораживание недопустимо. Срок хранения сыворотки крови при комнатной температуре - в течение 6 ч, при температуре 2 - 8 °С - в течение 5 суток, более длительно - при температуре не выше -16 °С (многократное замораживание/размораживание недопустимо).

Правила получения аутопсийного материала для ПЦР-исследования

Посмертный материал собирают в течение первых суток после гибели больного стерильным индивидуальным инструментом (индивидуально для каждого органа) из зоны поврежденной ткани объемом 1 - 3 см 3 , помещают в одноразовые стерильные пластиковые контейнеры с герметично завинчивающейся крышкой, замораживают и хранят при температуре не выше - 16 °С.

Правила получения и транспортирования мочи для определения антигена легионелл или пневмококка

Образцы мочи для исследования объемом 5 - 10 мл помещают в стандартные пластиковые контейнеры и хранят при комнатной температуре (15 - 30 °С) не более 24 ч после забора перед постановкой реакции. В случае необходимости образцы могут храниться при температуре 2 - 8 °С до 14 дней или при -20 °С в течение длительного времени для первичного или повторного исследования. В качестве консерванта может быть использована борная кислота. Перед постановкой реакции охлажденные или замороженные образцы мочи исследуют на наличие антигена после достижения комнатной температуры.

Требования к маркировке материала для лабораторного исследования

На этикетке пробирок (контейнеров) с материалом указывается: фамилия и имя обследуемого, дата взятия материала, тип материала.

В сопроводительном документе (направлении) к материалу, собранному для исследования в лаборатории, необходимо указать:

Наименование учреждения, которое направляет материал на исследования, и телефон;

Фамилию и имя обследуемого больного;

Возраст;

Дату заболевания или контакта с больным;

Предполагаемый диагноз, тяжесть заболевания или повод к обследованию;

Степень тяжести заболевания;

Данные о вакцинации против гриппа в текущем эпидемическом сезоне (вакцинирован / не вакцинирован / нет данных);

Дату и подпись медицинского лица.

Транспортирование материала производится в термоконтейнерах при рекомендованной для хранения температуре. Образцы от каждого пациента дополнительно упаковываются в индивидуальный герметичный пакет с адсорбирующим материалом.

Обработка биологического материала перед проведением лабораторных исследований

В лаборатории перед началом проведения ПЦР-исследований биологического материала вязкой консистенции (мокрота, аспираты из трахеи) необходима его предобработка с целью снижения вязкости, например с помощью препарата типа «Муколизин», согласно инструкции. Аутопсийный материал подвергается гомогенизации с последующим приготовлением 20 %-й суспензии с использованием буферного раствора (физиологического раствора натрия хлорида или фосфатного буфера).

Список литературы

1. Внебольничная пневмония у взрослых: практические рекомендации по диагностике, лечению и профилактике: Пособие для врачей/А.Г. Чучалин, А.И. Синопальников с соавт. М., 2010. 106 с.

2. Пневмония /А.Г. Чучалин, А.И. Синопальников, Л.С. Страчунский. М., 2006.

3. Стандарт специализированной медицинской помощи при пневмонии тяжелой степени тяжести с осложнениями: Приложение к приказу Минздрава России от 29.01.2013 № 741н.

4. Козлов Р.С. Пневмококки: уроки прошлого - взгляд в будущее. Смоленск, 2010.

5. СП 3.1.2.2626-10 «Профилактика легионеллеза».

6. СП 3.1.7.2811-10 «Профилактика коксиеллеза (лихорадка Ку)».

7. СП 3.1.7.2642-10 «Профилактика туляремии».

8. СП 3.1.7.2815-10 «Профилактика орнитоза».

10. МУ 3.1.2.3047-13 «Эпидемиологический надзор за внебольничными пневмониями».

11. МУ 4.2.2039-05 «Техника сбора и транспортирования биоматериалов в микробиологические лаборатории» (утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 23.12.2005).

12. Методические указания МЗ РФ № 99/168 «Организация выявления больных туберкулезом с применением лучевых, клинических и микробиологических методов». 2000.

13. МУ 1.3.2569-09 «Организация работы лабораторий, использующих методы амплификации нуклеиновых кислот при работе с материалом, содержащим микроорганизмы I - IV групп патогенности».

14. МУ 2.1.4.1057-01 «Организация внутреннего контроля качества санитарно-микробиологических исследований воды».

15. МР № 01/14633-8-34 «Выявление антигена бактерий Legionella pneumophila серогруппы 1 в клиническом материале иммунохроматографическим методом» (утв. Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации 9.12.2008).

16. МУК 4.2.1890-04 «Определение чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам» (утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 4.03.2004).

Если человек долго страдает хроническим кашлем, то ему редко удается самостоятельно распознать пневмонию (воспаление легких), бронхит или другой острый воспалительный процесс в нижних отделах дыхательных путей. Бронхит и пневмония часто возникают после перенесенных простудных заболеваний. Обе патологии могут иметь как вирусную, так и бактериальную природу.

Острая пневмония и острый бронхит во многом имеют схожие признаки и симптомы, поэтому с уверенностью определить пневмонию в домашних условиях самостоятельно без участия специалистов и без использования «золотых стандартов» диагностики невозможно.

Дифференциальная диагностика

Дифференциальная диагностика пневмонии крайне важна, поскольку в отличие от бронхита ее необходимо совершенно по-иному лечить. Дифференциальный диагноз пневмонии должен складываться по симптомам больного и лабораторно-инструментальным критериям:

1. Заболевание начинается, как правило, остро и сопровождается лихорадочным состояние (температура тела превышает 38°C).
2. Появляется мокрота с гноем и примесями крови.
3. Аускультация выявляет ранее отсутствующие, локальные укорачивания легочного звука при перкуссии.
4. Наблюдается лейкоцитарная формула со сдвигом влево.
5. Специалисты лучевой диагностики в ходе обследования укажут основной рентгенологический признак - скопление крови и клеток в определенном участке легкого, которое создают определенную картину затемнений.

Диагностика пневмонии - это задача не из простых. Кроме того, что это заболевание легко спутать с другими патологическими процессами, оно само может быть нескольких видов и иметь различную клиническую картину. Классификация воспаления легких у взрослых и педиатрических пациентов зависит от формы, этиологии, условий возникновения, характерных признаков, локализации и возможных осложнений.

По форме данную патологию делят на такие группы:

• внебольничная (домашняя) - встречается наиболее часто;
• воспалительно-инфекционный процесс, приобретаемый в условиях стационарного пребывания;
• пневмоцистная - наблюдается у пациентов с иммунодефицитом.

Большое значение в тактике лечения имеет выявление возбудителя, которым может оказаться один из таких патогенов:

• пневмококк;
• микоплазменные микроорганизмы;
• хламидии пневмонии;
• легионелла;
• палочка Пфейфера;
• золотистый стафилококк;
• палочка Фридлендера;
• неклеточные инфекционные агенты;
• патогенные грибы.

• очаговое (бронхопневмония) бывает с мелкими локализациями или сливное;
• долевая (нижнедолевая);
• двустороннее (поражаются оба легких).

Диагностике и лечению пневмонии должно уделяться серьезное внимание, поскольку данная болезнь без принятия соответствующих мер может закончиться смертельным исходом. Частота летальности у пациентов среднего возраста, которые не страдают серьезными соматическими заболеваниями, составляет не более 3%. А вот пневмония у пожилых людей, отягощенная хроническими заболеваниями, имеет плохой прогноз у каждого третьего пациента.

Основные методы диагностики

Пациенты, которые ценят свою жизнь, не будут долго разбираться в том, как определить воспаление легких в домашних условиях, а при первых же подозрениях на пневмонию отправятся в медицинскую клинику для диагностики и лечения или хотя бы вызовут на дом фельдшера.

Опытный пульмонолог отлично знает, как распознать воспаление легких, и как отличить бронхит от пневмонии.

Диагностика воспаления легких включает такие лабораторно-инструментальные обследования:

• рентгеноскопия;
• клинический анализ крови;
• биохимический анализ крови;
• анализ мочи;
• исследование мокроты и мазков;
• оценка газового состава крови.

Кроме того, методика при обследовании человека может включать такие диагностические процедуры:

• биопсия легкого;
• бронхоскопия.

Однако прежде, чем прибегать к вышеописанным методам, пульмонолог начинает обследование с оценки того, какая у пациента аускультативная картина.

Аускультация

Когда пульмонологи диагностируют патологию с помощью аускультации, то острая пневмония может давать такие признаки заболевания:

1. Появляются усиленные признаки бронхиальной фонии о стороны пораженной области.
2. При очаговом поражении прослушивается смешанное дыхание. На вдохе его характеризуют как везикулярное, а на выдохе наблюдается ослабленное бронхиальное дыхание.
3. При крупозной форме болезни прослушивается хрустящий звук в начальной фазе и в стадии разрешения.
4. Плевропневмония характеризуется выраженным шумом, создаваемым трением плевральных листков. А когда образовывается выпот, то наблюдается резкое послабление дыхания.
5. При тяжёлом течении воспалительного процесса при выслушивании сердца выявляется выраженное ускорение сердцебиения.

Особенно у престарелых пациентов может наблюдаться резкое снижение артериального давления с развитием острой сосудистой недостаточности.

Диагностика крупозной формы болезни всегда начинается с выслушивания. Данная патология имеет 2 информативные характеристики:

1. Альвеолярный треск на вдохе, который не проходит после того, как пациент откашливается.
2. Влажные хрипы на вдохе. Они объясняются тем, что при прохождении воздушного потока пузырчатый вязкий экссудат в бронхах лопается.

При очаговой пневмонии специфичный хрустящий звук появляется в первой и третьей стадии. А хрипы при накоплении жидкого секрета классифицируются как мелкопузырчатые звенящие. Аускультация при долевой патологии помогает пульмонологу определить стадию воспаления.

Видео

Видео — Что такое пневмония?

Рентгенологическая диагностика

Рентгенодиагностика заболевания играет ключевое значение в постановке точного диагноза. Но практически все пациенты знают, что при выполнении рентгена при пневмонии не избежать лучевой нагрузки на организм, поэтому они интересуются тем, не покажет ли флюорография воспаление легких.

На самом деле задача флюорографического исследования заключается в профилактике серьезных заболеваний нижних дыхательных путей. И оно занимает достойное место в рентгенологии. Однако если сравнивать снимок легких на флюорографии и легких рентген, то становится очевидно, что затемнения или патологии лучше видно на рентгенограмме.

Можно ли увидеть недуг на флюорографии и насколько хорошо, во многом зависит от разновидности инфекции, которая поражает легочные структуры. В свою очередь рентген легких при пневмонии - это не только способ выявления заболевания, но также с его помощью можно осуществлять контроль лечения и замечать положительную или отрицательную динамику.

Крупозная пневмония на рентгеновском снимке может выглядеть следующим образом:

• обширное затемнение;
• односторонне тотальное или частичное затемнение;
• ограниченное затемнение (изменения не выходят за пределы сегмента).

Очаговую пневмонию рентгеновский снимок показывает не всегда, поскольку на начальных стадиях болезнь характеризуется появлением небольших уплотнений с биологическими структурами. И все же опытный рентгенолог знает, как выявить воспалительные процессы даже при отсутствии уплотнений, поскольку очаговая форма на рентгене может показать косвенные признаки:

• локальные патологические тени;
• воспаление плевры с образованием фиброзного налёта на её поверхности или выпота внутри нее;
• увеличение легочных корней;
• искажение легочного рисунка на определенном участке.

Если недуг на рентгеновском снимке явно визуализируется, но существует необходимость обнаружить более тонкие детали патологического процесса, то прибегают к помощи КТ. Компьютерная томография позволяет выявить пневмонию на самых ранних стадиях, поскольку уже тогда она четко показывает патологические изменения в тканях.

Исследование крови

Если, проходя профилактический осмотр, пациенты сомневаются в том, покажет ли флюорография пневмонию, то точно не пропустить развивающийся недуг помогут показатели СОЭ (скорость оседания эритроцитов). При стандартном обследовании они могут сильно превышать норму. А тем более, когда сдается общий анализ крови при пневмонии.

Как правило, острая пневмония имеет показатели СОЭ - 20-25 мм/час. В тяжелых случаях она может достигать 40-50 мм/час. А если имеют место показатели СОЭ - 80 мм/час и выше, то могут заподозрить онкологию или аутоиммунный недуг. Однако стоит учитывать, что СОЭ не является абсолютным показателем, особенно для пациентов, которые проходят терапию, подавляющую нежелательные иммунные реакции организма.

При крупозной пневмонии диагностика не обходится без анализа крови. Гемограмма в таком случае имеет стандартное описание - ускорение СОЭ и сдвиг лейкоцитозной формулы влево. Если уровень лейкоцитов в крови достигает более 10-12х109/литров, то это указывает на высокую вероятность бактериальной инфекции, а если их уровень становится ниже 3х109/литров или выше 25х109/литров, то такие показатели указывают на неблагоприятный прогноз.

Также делают биохимию, но такой анализ крови при воспалении легких не дает специфической информации.

Исследование мочи и кала

При обнаружении патогена в кале и в моче лечение подбирается специфичное. Особенно это актуально в случае клебсиеллезной ее формы. Если бактериальный процесс не будет своевременно выявлен и не начнется адекватное лечение, то патология начнет распространяться на желудочно-кишечный тракт, гепатобилиарную область, мочевыделительную систему и даже может поразить головной мозг.

Если появляется клебсиелла пневмония в моче, то это указывает на то, что процесс затронул мочеполовую систему. Любая другая острая пневмония показывает в моче небольшое количество эритроцитов (микрогематурия), а также белок (протеинурия), чего не бывает в норме. Анализ на пневмонию, исследующий мочу не входит в число наиболее информативных исследований.

Если обнаружена клебсиелла пневмония в кале, то очагом поражения считается пищеварительная система. Но следует учитывать, что эта бактерия при нормальных показателях является стандартным обитателем толстого кишечника и общей микрофлоры желудочно-кишечного тракта. Лабораторное исследование фекалий позволяет четко распознавать отклонение от нормы у младенцев. А если получается обнаружить клебсиеллу пневмонию в кале у взрослого, то эта информация не будет столь существенной.

Исследование мокроты

По усмотрению лечащего врача, который точно знает, как определить пневмонию, может быть назначен анализ мокроты при пневмонии. Изучение секрета, получаемого из дыхательных путей, проводят с целью выявления рода и вида возбудителя развившегося недуга. Решающими оказываются ответы бактериоскопии мазка мокроты, который окрашивают по Граму и проводят микробиологическое исследование.

Для подтверждения хламидийной патологии наиболее специфичным и чувствительным является культуральный метод выделение возбудителя, однако он отличается длительностью и трудоемкостью процесса и на практике обычно ограничиваются серотипированием. При проведении стандартной бактериоскопии мазка мокроты на микоплазму обнаружить этот патоген не удается, поэтому используют метод иммунофлуоресценции или иммуноферментного анализа.

Кроме того, существует целая схема того, как диагностировать редкую пневмонию, вызываемую палочкой Фриндлендера. Проводятся микробиологические исследования на высев бактерий. Выявиться возбудитель могут в мазке из цервикального канала, в мазке из зева, а также иногда обнаруживается клебсиелла пневмония в мазке слизи из горла. Как правило, последний случай характерен для нозокомиальной инфекции.

Формулировка диагноза

После проведения всех определенных анализов при воспалении легких, оценки того, как выглядит пневмония на снимке, будет дана формулировка диагноза. В ней будет указано, что это за патология - бронхит или пневмония, а также другие детали:

• возбудитель, спровоцировавший возникновение патологии;
• область расположения процесса и его масштабы (поражение затрагивает сегмент, долю, одну сторону или сразу две);
• критерии тяжести пневмонии;
• характеристику осложнений, если такие присутствуют;
• в какой фазе находится болезнь (начало, разгар, восстановление нормальной структуры, разрешение, заключительная стадия, затянувшийся процесс);
• общая картина соматических заболеваний, которые могут сказаться на выздоровлении.

Пример формулировки диагноза: «Долевая острая пневмония, вызванная пневмококком. Наблюдается нижнедолевое правостороннее поражение. Болезнь находится в фазе разгара и протекает тяжело. Наблюдается острая частично компенсированная дыхательная недостаточность».

Пациенты, перенесшие тяжелую форму заболевания нижних дыхательных путей, в дальнейшем должны тщательно следить за своим здоровьем и регулярно проходить профилактические осмотры. Даже при хорошем самочувствии раз в год им обязательно показана рентгенография или флюорография.

Диагностика пневмонии необходима для своевременного выявления воспаления легких и лечения этого грозного заболевания. Также диагностика помогает убедиться в точности поставленного врачом диагноза, выявить причины болезни, определить степень тяжести воспаления.

Понятие диагностики

Диагностика пневмонии включает дифференциальную (разграничительную) диагностику с другой патологией легких, визуальный осмотр больного, выслушивание (аускультацию), простукивание (перкуссию), рентгенографию, лабораторное и лучевое диагностирование, компьютерную томографию, спирографию.

Врач сначала собирает анамнез (историю начала заболевания и его течения), где фиксирует данные о недавних простудах, сопутствующих хронических болезнях, осматривает кожные покровы, грудную клетку и межреберные промежутки, оценивает общее состояние пациента и назначает ряд анализов.

Диагностировать воспаление легких хороший специалист может на основании данных осмотра и выслушивании органов дыхания, но для назначения четкой схемы терапии заболевания пользуется подтверждающими способами.

Выслушивание легких

Аускультация при пневмонии основана на выслушивании органов дыхания фонендоскопами и стетоскопами.

Понять, что у больного воспаление легких при аускультации можно по таким признакам:

1. Слышны мелкопузырчатые влажные хрипы.
2. Четко прослушивается бронхиальное дыхание (бронхофония) и ослабление и укорочение легочного звука.
3. Прослушивается инспираторная крепитация пневмонии – ее четкий признак (специфический звук в момент выдоха).

Отсутствие хрипов в легких говорит о том, что воспаления легких нет.

Выслушивание легких должно быть проведено правильно:

1. Грудь и спину пациента обнажают, чтобы белье ненужными шумами не мешало разграничивать звуки.
2. Если у мужчин много волос, то их смачивают не холодной водой или жирным кремом, чтобы трение стетоскопа о волосы не мешало уху.
3. Прослушивание должно быть при тишине и комнатном температурном режиме, так как мышечное сокращение из-за окружающей прохлады, может симулировать другие звуки.
4. Трубка должна плотно и без боли прилегать к кожным покровам пациента с фиксацией пальцами, чтобы не образовывать ненужные шумы.
5. Аускультация обязательно должна сравнивать симметричные участки органов дыхания.
6. Прослушивать начинают с верхушки легкого и вниз по боковым и задним отделам.

Перкуссия (простукивание) – это физический метод, основанный на специальном простукивание границ легкого пальцевыми ударами, с оцениванием получившихся звуков врачом.

Данный метод позволяет определить патологию легких и плевральной полости, путем сравнения перкуторного звука на одинаковых участках и определить размер и форму органа. Метод основан на знании характера возникающих звуков, которые существуют в норме.

Пример: притупленно-тимпанический звук слышен в начале и конце протекания крупозного воспаления легких.

Правильная перкуссия заключается в нанесении двух ударов глухого характера пальцами короткими временными интервалами по груди с целью установления расположения поля легких и их воздушности. При пневмонии они плотные (особенно при крупозном воспалении легких).

Перкуссия при пневмонии считается наилучшим методом диагностирования у детей всех возрастов.

Рентген

Это основной и наиболее информативный метод при диагностики пневмонии, основанный на использовании специальных лучей. Рентген позволяет наблюдать за органами дыхания во время терапии с оценкой ее эффективности.

Рентгенограмму выполняют в трех проекциях: прямой, боковой (правой или левой) и в одной из косых. Фотография должна быть четкой. Изменения на снимках рентгена при воспалении возникают к третьему дню болезни. Ранний рентген показывает усиленный легочной рисунок, который бывает и при других заболеваниях.

Рентген выявляет увеличенные лимфоузлы средостений, характеризует появившиеся тени, показывает, как деформировался в процессе воспаления корень бронха, обнаруживает прикорневую инфильтрацию, сам очаг воспаления.Рентгенографию повторно делают спустя один месяц после терапии с оценкой ее эффективности.

Рентгенодиагностика пневмоний показывает следующее:

• очаговые, долевые или сегментарные затемнениях;
• деформацию легочного рисунка тканей;
• усиление корня легкого и лимфаденит;
• процессы воспаления в плевре;
• видимый экссудат.

На снимках очаги воспаления представлены затемнением тканей разной плотности и распространенности. Встречается затемнение очага, поли-сегментарное затемнение, субтотальное и тотальное.

Ограниченный инфильтрат не выходит за сегментный отдел. Субтотальный очаг обнаруживается при воспалении одной или двух долей легкого. Такие признаки характерны для крупозного воспаления и при осложнениях.

Если за 7 дней инфильтрат на рентгеновской пленке не исчезает, то это говорит о вирусной пневмонии.

Рисунок появляется из-за повышенного снабжения кровью и сниженной легочной емкости. Рентгенограмма выглядит решеткой, но только в месте очага. Когда повышается воздушность, поля легкого на снимке прозрачные.

Рентгенограмма при воспалении легких при выздоровлении характеризуется тем, что:

• снижается интенсивность затемнения;
• уменьшается размер тени;
• расширяется корень легкого;
• обогащается легочный рисунок (появляется много мелких элементов на всей поверхности легкого).

Расширенным корень может быть потом несколько месяцев подряд, до полного восстановления легочной ткани.

Лабораторная диагностика

Лабораторная диагностика пневмонии заключается в различных исследованиях крови, мокроты, смыва бронхов, плевральной жидкости, мочи, использовании иммунологических тестов на коже при выявлении аллергенов на антибактериальные препараты и др.

Методы лабораторной диагностики пневмонии:

1. Клинические анализы крови показывает признаки пневмонии в виде умеренного или повышенного лейкоцитоза, ускоренной СОЭ, сдвига повышения формулы нейтрофилов влево, с патологической зернистостью.
2. Биохимию крови — это исследование С-реактивного белка при пневмонии (при нарушении обмена белков), гликемический уровень, рост глобулинов, низкий уровень активности сыворотки, печеночные ферменты (АЛТ, АСТ) и др. Назначают при определении патологических процессов, сопутствующих болезнях, затрудняющих лечение пневмонии.
3. Микробиологию образцов крови применяют при культивировании микробов на питательные среды у больных, которым необходима госпитализация в отделении интенсивной терапии.
4. Серологию крови применяют в диагностировании таких вирусов, как микоплазмы, хламидии, легионеллы. Назначают, когда есть предположения об атипичной пневмонии.
5. Иммунологический показатель характеризует умеренное снижением Т — лимфоцитов и повышение их активности (Ig G) и снижением (Ig А) (при микоплазменной пневмонии).
6. Свертывание крови определяют тестами, которые отражают процесс в легочной ткани для предотвращения кровотечений, тромбозов и эмболий артерии.
7. Мокроту и смыв из бронхов исследуют: бактериоскопией мазков, окрашенных по Грамму, лабораторным исследованием культур, определяют чувствительность к антибактериальным препаратам. Микробиологию делают тогда, когда эффект от лечения антибиотиками не наступает за первые семь дней после установления диагноза.
8. Исследования мокроты позволяют узнать характер патологического процесса. Количество и цвет говорят о гнойных процессах в легких и наличии осложнений. При пневмонии мокрота бывает слизистой, гнойной, с примесью крови – ржавой. По консистенции вязкой или клейкой (при крупозном воспалении), жидкой (при начинающемся отеке легкого). Запах – при пневмонии она без запаха. Если запах присутствует – возникли осложнения в виде абсцессов, гангрены. Смотрят на состав и сгустки. В мокроте всегда есть лейкоциты.
9. Исследуют мокроту на наличие грибка и других микроорганизмов — проводят посевы мокроты и идентифицируют их, а также выявляют их чувствительность к антибиотикам
10. Плевральную пункцию используют при необходимости удаления жидкости или воздуха из плевральной полости, а также для введения в плевру лечебных средств при плевритах, возникших как осложнение пневмонии. Плевральную жидкость исследуют цитологически, оценивают физически, химически, микроскопически в нативных и окрашенных препаратах.
11. Определение газов артериальной крови используют у больных с признаками дыхательной недостаточности.
12. Назначают общий анализ мочи и дополнительный экспресс-метод, когда выявляются легионелллы, из-за который часто погибают больные.
13. Бактериологию крови делают при наличии патологического процесса. Она помогает коррегировать лечение в больничных условиях.

Лучевая диагностика

Лучевая диагностика пневмоний имеет огромное значение в правильной постановке диагноза и определении очага воспаления и состоит из ряда методов, использующих действие лучей.

Методы лучевой диагностики пневмонии включают в себя:

1. Обзорное рентгенографическое исследование органов дыхания двумя проекциями. Современные технологии воздействия рентгеновских лучей значительны и безвредны.
2. Компьютерную томографию (КТ) легких. Этот метод позволяет подробно просмотреть изображения очагов, которые находятся в глубине и определить изменения.
3. Ультразвуковое исследование (УЗИ) позволяет сделать оценку состояние плевры и ее полости при экссудате и очаге воспаления. УЗИ назначают для уточнения всей характеристики легочных процессов.

Лучевая диагностика нужна для установки размеров легочных изменений и последовательность развивающегося воспалительного процесса в долях легкого.

Беременным женщинам лучевую диагностику не назначают!

КТ легких

Томограмму лёгочной ткани назначают тогда, когда у больного предполагают воспаление у корня, чтобы тщательно изучить легочную ткань при воспалении легких. КТ выявляет изменения не только в паренхиме под разными углами, но и в средостении. Компьютер превращает контрастное исследование в изображение поперечного сечения, которое реконструируют на экране монитора, пленке слайда несколькими режимами.

КТ при пневмонии позволяет получить послойное изображение с уровнем корней легкого. Здесь пучок импульсного рентгеновского облучения проходит через слой легочной ткани.

Томографию легких выполняют при низкой интенсивности рентген-снимка легких, когда нужно разграничить несколько видов патологии органов дыхания, с детальной фокусировкой заданного слоя, неподвижного по отношению к рентгеновской пленке в течение всего времени проведения.

КТ способствует распознаванию очаговых изменений и распада легочной ткани и обладает следующими преимуществами: более высокой чувствительностью (чем рентген), безопасностью, безболезненностью, эффективностью и высокой точностью (достигает 94%), дает возможность предотвращения осложнений. Но ранние стадии пневмонии снижают его точность. Приборы для проведения КТ позволяют значительно снизить дозу облучения процедуры.

Спирография - это запись регистрационных изменений объемов легкого графическим методом при движениях во время дыхания для получения показателя, описывающего легочную вентиляцию при помощи специальных приборов – спирографов.

Этот метод описывает воздушность объемов и емкость (характеристику упругости и растяжения органов дыхания), а также динамичность показателя определения количества воздуха, проходящего сквозь ткань легкого при вдохе и выдохе за принятую временную единицу. Показатели определяются режимом спокойного дыхания и проведением форсированных манёвров дыхания для выявления бронхиально–легочной обструкции.

Спирография при пневмонии показана в таких случаях:

1. Когда нужно определить тип и степень легочной недостаточности, и при начальных признаках.
2. Когда нужен мониторинговый анализ всех показателей вентиляционной способности органов дыхания и определение степени стремительности развития болезни.
3. Для того, чтобы провести разграничительную диагностику недостаточности легких и сердца.

Данные спирографии изображаются в виде кривой: сначала при спокойном дыхании – затем при глубоком дыхании – затем манёвры с наиболее глубоким вдыханием, а затем - быстрым и долгим (6 с) выдохом, с определением форсированной жизненной емкости легкого (ФЖЕЛ). Затем проводят записывание максимума вентиляции легких за 1 мин. Существуют общепринятые нормы объема ФЖЕЛ. По ним определяют отклонения и измеряют проходимость трахеи и бронхов при пневмони.

Чтобы распознать воспаление легких с помощью всех способов диагностики, надо вовремя обращаться к врачу, так как медицина имеет много средств диагностирования пневмонии, чтобы предотвратить появление грозных осложнений.